216例男性精子形态异常实验室资料分析并文献复习

216例男性精子形态异常实验室资料并文献复习 216例男性精子形态异常实验室资料分析并 文献复习 检验医学与临床2010年10月第7卷第2O期IabMedClin,October2010,Vo1.7,No.20 1不同疾病引起的关节腔积液检查结果 积液量均值8.6 颜色异常例数7 浑浊例数36 低黏稠度例数35 检出凝块例数18 尿酸盐结晶例数0 白细胞均值(×lO0/L)19.8 中性分叶均值()73 总蛋白均值(g/L)44.3 葡萄糖均值(mmol/L)4.6 尿酸均值(~mol/L)244 RF均值(U/mL)568 8.6 4 30 33 18 28 21.0 72 40.2 6.3 504 26.3 2.3病原体分布9例化脓性关节炎分离出4株金黄色葡萄 球菌,1株松鼠葡萄球菌,1株铜绿假单胞菌,3例为阴性. 3讨论 正常膝关节腔内仅有1,4mL的关节液,为清亮,淡黄 色,黏稠度高的液体,主要起润滑关节和营养关节软骨,关节盘 的作用;关节液中的总蛋白在10,30g/I,葡萄糖在3.33, 5.55mmol/I,尿酸119,4769mol/L(男),119,357~mol/L (女),因缺乏纤维蛋白原,凝血原子而不能自凝;在显微镜下白 细胞小于(O.2,O.7)×10./i,中性粒细胞小于0.25【.当关 节发生炎性反应时,常累及滑膜,使关节液的合成增多,化学组 成,细胞成分均发生改变,关节液的变化可直接反映疾病的性 质和程度,因而关节腔积液的检查对疾病的鉴别诊断具有重要 意义[. 引起关节腔积液最常见的疾病有类风湿关节炎,痛风性关 节炎,强直性脊柱炎,占总数的56.类风湿关节炎关节腔内 可出现大量浑浊积液,黏稠度降低,并且由于纤维蛋白原和其 他凝血因子进入关节腔积液,使之自发形成凝块;白细胞总数 增高,以中性粒细胞增加为主,总蛋白增加,葡萄糖,尿酸无明 显异常,特异性改变有关节液中检出高滴度的RF,该调查组 RF均值为568U/mi,较同期血清中RF水平高].痛风性关 节腔积液外观白色而不透亮,黏稠度下降,表现为以中性粒细 胞增多为主的白细胞增多,该调查组尿酸均值为504~mol/L, 与同期血清中尿酸水平相当,但此类积液的特征性变化为关节 腔内检出尿酸盐结晶l4].强直性脊柱炎积液外观一般为淡黄 色到黄色的浑浊液体,黏稠度降低,部分积液可自凝;白细胞, 总蛋白总数增高,葡萄糖,尿酸,RF均正常.化脓性关节腔积 液改变明显,颜色灰白色或血色,黏稠度下降的浑浊液体,白细 胞总数大幅度增加,均数为53.5×10./L,中性粒细胞均数高达 92.由于关节腔内细菌的生长繁殖消耗大量糖类,葡萄糖明 显下降,均值为1.7mmol/I,病原菌以金黄色葡萄球菌为主. 参考文献 ~11王学谦.检验与临床诊断:骨质疏松与骨关节病分册 [M].北京:人民军医出版社,2006:262—468. E23叶应妩,王毓三,申子瑜.全国临床检验操作规程EM].3 版.南京:东南大学出版社,2006:318—319. E33于淑燕.关节液和血液中ASO,RF,补体C.检测的对比 EJ].中国煤炭工业医学杂志,2007,10(3):297—298. E43胡望平,肖海,饶华春.应重视关节液尿酸结晶检验EJ3. 江西医学检验,2004,22(1):22-23. (收稿日期:2010-05—23) 墨蠲 216例男性精子形态异常实验室资料分析并文献复习 杨华军(浙江大学医学院附属妇产科医院,杭t'1"I310006) 【摘要】目的分析统计畸形精子症患者精子各结构畸形的临床发病率,为其诊断和治疗提供依据,为开发治 疗精子形态异常的药物靶点提供临床数据.方法采用KrugerS严格法对216例男性精液就精子头部,胞质 小体,尾部及总畸形等进行分析,综合PubMed,HighWirePress有关精子畸形,精子形成文献,推测具有开发潜力 的药靶.结果精子总畸形率为(43.16--+13.03),其中头部畸形为(17.85--+-11.45),胞质小体畸形为(6.O6? 6.23),尾部畸形为(19.24?10.44).结论在杭州地区男性精子形态异常患者中,精子头部,尾部畸形发生率 较高,其中尾部畸形率占第1位,其次为头部畸形;逆转精卵融合障碍及精子运动能力的丧失将成为临床治疗的重点. 【关键词】精子畸形;临床调查;精子形成 D01:10.3969/j.issn.1672—9455.2010.20.035 中图分类号:R698.2文献标志码:A文章编号:1672—9455(2010)20—2240—03 一 般认为精液参数中的精子密度,活力和正常形态率是评 估男性精液质量及生育能力的重要参考指标.近年来,由于人 们生活环境,饮食习惯的改变,精子形态异常的发病率明显上 升.由于精子形态异常并不是导致男性不育的最主要因 67,2963 &0o& 42442 4,. 铊 36;6766 .;0 74}5673.蛾 5542,,5船O" 检验医学与临床2O10年10月第7卷第2O期 IabMedClin,October2010,Vo1.7,No.20 素,l临床上精液常规分析也以总畸形率作为检测指标.为了解 精子各结构畸形的发病率,以及各结构畸形发生是否具有相关 性,作者对216例畸形精子症患者进行了精子形态分析和精子 各结构畸形之问关系的研究,现报道如下. 1资料与方法 1.1一般资料2008年6月至2009年12月在本院男性不育 科就诊的216例畸形精子症患者,并且已排除器质性疾病.受 检者年龄24,5O岁,平均29.2岁. 1.2方法 1.2.1精液采集禁欲2,7d,在实验室附近用手淫取精法, 收集完整精液于清洁,干燥的小瓶内,置37口C培养箱内,液化 后按照《WHO人类精液及精子,宫颈黏液相互作用实验室检 验手册》(第4版)[的要求进行精液常规检查,精子形态学分 析采用改良巴氏染色法,用KrugerS标准法分别观察正常形 态精子,头部缺陷精子,胞浆小体缺陷精子,尾部缺陷精子等 数目. l_2.2统计学方法观察200个精子,对存在头部,胞浆小体 或尾部缺陷的精子分别进行记录.用SPSS17.0软件对数据 进行统计学处理.正态分布计量资料数据采用j:?S表示,相 关性分析采用Spearman等级相关法,以P%0.05为差异有统 计学意义. 1.3文献学习以精子畸形症(teratospermia),精子形成 (spermiogenesis)为关键词,在PubMed,HighWirePress中检 索文献,了解精子形成的分子机制及导致精子畸形症的病因. 2结果 216例男性精子畸形症患者精子形态分析:按照KrugerS 标准法及相关参考指标对216例男性精子畸形症患者的精子 形态进行常规分析.总畸形率大于3O的共180例,占调查 总病例的83.33.然后对精子各结构畸形进行分类统计,其 中头部,胞浆小体,尾部畸形及总畸形率指标的极值(最高值和 最低值)和平均值(?)结果见表1. 表1216例男性精子畸形症患者的精子形态常规分析 精子头部畸形又分为大头,小头,尖头,双头,无头,不定行 头,梨形头,按Kruger8标准法对头部各种畸形的检查结果进 行分类统计(其中1人可出现2项或2项以上的异常结果),见 表2. 表2216例男性精子畸形症患者精子头部畸形的分类统计 精子头部,胞浆小体,尾部畸形之间的Spearman等级相关 法分析显示,各结构畸形之间差异无统计学意义(P>0.05), 即头部畸形,胞浆小体畸形,尾部畸形的发生没有相关性. 3讨论 精子形态的分类最初由Macleod等于1951年提出,此后 有关精子形态的评定标准一直处于争议中.在本研究中,作者 根据wH0的标准,对精子形态各相关参数进行评估.本 资料显示尾部畸形率位居精子亚结构畸形的第1位,其次为头 部畸形.本项研究提示,精子头部或尾部畸形导致精卵融合障 碍及精子运动能力的丧失是精子畸形症患者不育的主要原因, 调控精子头部及尾部形成过程的关键蛋白将是极具潜力的药 物靶点. 在本研究结果中,l例患者往往有2种或2种以上的畸形 存在,这提示研究者和l临床医生在研究和治疗精子畸形症时需 要综合分析,综合治疗;也说明精子畸形发生机制的复杂,提示 精子畸形的发生与复杂的精子形成的变态过程密切相关.由 圆形的精子细胞逐渐转变为蝌蚪状的精子的变态过程称为精 子形成(spermiogenesis),包括:(1)核染色质高度浓缩,核变长 并移向细胞一侧,构成精子头部的主要结构.(2)高尔基复合 体形成顶体泡,逐渐增大,凹陷为双层帽状覆盖在核的顶端,形 成顶体(aerosome).(3)中心体迁移到顶体对侧,其中一个中 心粒的微管延长,形成轴丝,成为精子尾部的主要结构.(4)线 粒体汇聚于轴丝近端周围,盘绕成螺旋形的线粒体鞘.(5)其 余的胞质聚集尾侧,形成残余胞质,最后脱落].由此可见, 在精子形成过程中,任何一个阶段关键调控蛋白功能的异常都 将影响精子细胞变态过程的正常进行,最终导致精子形态异常 的发生. 导致精子畸形的病理因素有感染,损伤,睾丸应激反应,内 分泌紊乱,化学药物以及遗传因素等多种原因口].感染和损伤 都会引起炎性反应,导致炎性反应部位活性氧的升高,而高水 平的活性氧会对精子DNA产生影响,从而影响精子的形 态?6J.Saleh和Agarwal【认为在不育男性中,较高的活性氧 水平会使精子的质膜发生过氧化反应,导致精子中段缺陷数增 高,活动度下降,都将损及精子获能和顶体反应的发生,影响精 子的受精能力.Said等认为还原型辅酶(NADPH)在由活 性氧引起的DNA损伤中扮演重要角色,它使得男性不育症患 者具有更多异常形态的精子. 已有研究表明,高浓度的活性氧破坏精子GSH循环,抑 制组蛋白一鱼精蛋白的转换,从而阻止DNA的折叠压缩[9]. 阻碍组蛋白一鱼精蛋白转换的另一因素是精子细胞中蛋白质 泛素化系统的E2酶表达不足或功能缺失,致使组蛋白不能被 泛素化进而被蛋白酶降解,而导致鱼精蛋白替换组蛋白的失 败l1.替换组蛋白的鱼精蛋白有P1和P2两个亚型.在替换 组蛋白过程中,P1鱼精蛋白富含精氨酸/丝氨酸的短结构域需 高度磷酸化,但在精子细胞变态过程中需去磷酸化.P1鱼精 蛋白的磷酸化需要与核内膜蛋白(IBR)结合,但在未发育的精 子细胞中,胞质中的P32蛋白与IBRN端的精氨酸/丝氨酸二 肽紧密结合,阻止P1鱼精蛋白的磷酸化.因此P32蛋白为研 究精子形成及精子畸形的发生提供了新视角.最近研究表 明,RIMBP3是在精子形成中必须的颈部相关蛋白.RIM BP3在顶体形成及精子头部变态过程中发挥重要作用,它与 Hookl蛋白在头部变态时共表达,但不干扰Hookl的功能. RIMBP3突变与Hook1的突变一样会导致精子头部畸形,因 此RIM—BP3为研究精子头部畸形的分子机制提供了一个新方 向. 检验医学与临床2010年1O月第7卷第20期LabMedClin,October20i0,Vo1.7,No.20 参考文献 .关于男性不育症的几个问题[J].中国男性科学 [1]张桂元 杂志,2obo,14(3):147—149. [2]陈延,杨金玲,杨海霞,等.84例男性不育患者精液常规分 析[J].济宁医学院,2009,32(1):49—50. E3]WorldHealthOrganization.wHOlaboratorymanualfor theexaminationofhumansemenandsperm-cervicalmu— CUSinteraction[M].4thed.London:CambridgeUniversi— tyPress,1990:1-50. E43蔡玉文.组织学与胚胎学[M].北京:中国中医药出版社, 2003:172—177. [5]沃尔珀特L,杰塞尔T,劳伦斯P,等.发育的原理[M].3 版北京:科学出版社,2007:421432. [6]吴颖,徐惠明,张海英,等.精子形态变化对体外受精率的 影响.中华男科学杂志,2008,14(7):610—613. [7]SalehRA,AgarwalA.Oxidativestressandmaleinfertil— ity:fromresearchbenchtoclinicalpractice[J~.JAndrol, 2002,23(6):737—752. r8]SaidTM,AzizN,SharmaRK,eta1.Novelassociationbe— tweenspermdeformityindexandoxidativestress—induced DNAdamageininfertilemalepatient[J].AsianJAndrol, 2005,7(2):121-126. 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[12]JingZhou,Ya—RuiDu,WeiHuaQin,eta1.RIM-BP3isa manchette—associatedproteinessentialforspermiogenesis [J].Dev,2009,136:373-382. 1486例新生儿出生时间规律的圆形分布法分析 魏琳娜,黄萍,余友霞,刘禄斌(重庆市妇幼保健院400013) (收稿日期:2010—02—02) 暖蠲 【摘要】目的探讨孕妇自然分娩的时间规律,为指导临床及对分娩机制的研究提供初步统计学数据基础. 方法用圆形分布法分析2005年1月1日至2007年12月31日本院产科住院病例1486例新生儿的生产时间. 结果1O年之中自然分娩日期存在集中趋势:高峰日在7月4日,高峰期为5月4日至9月18日.10d之中分娩 时间存在集中趋势:高峰时段为17:38~07:40,高峰时间为【)():O6.其中女婴分娩时间高峰时段是12:51,22:18, 高峰时间为17:42;男婴分娩时间无集中趋势;初产妇的分娩高峰时段是O7:26,17:46,高峰时间是12:38;而经产 妇分娩时间无集中趋势.结论分娩时间存在24h节律性,在10年中存在季节节律性. 【关键词】圆形分布法;自然分娩;新生儿;时间规律 DOI:10.3969/j.issn.1672—9455.2010.2O.036 中图分类号:R715.7文献标志码:A文章编号:1672—9455(2O1O)20—2242—04 现代时间生研究学认为自然界中的万物都有着自身的节 律.那么,人类自然分娩时间是否存在节律性?本研究统计了 本院2005年1月1日至2007年12月31日1486例自然分娩 时间,探讨其分布趋势和规律,以期对分娩机制的研究提供初 步的统计学数据,对产科临床有一定的指导意义. 1资料与方法 1.1一般资料回顾分析本院2006年1月1日至2007年12 月3113足月,单胎,孕妇无合并症,新生儿正常,自然临产并经 阴道分娩共1486例新生儿.按婴儿的性别,初产妇(孕1,产 0),经产妇(孕大于1,产大于或等于1);分娩时间:零点零分零 秒至23点59分59秒,分类记录.1h为一组,共1486例. 其中男婴794例,女婴692例,婴儿性别比为1:1.14,结果见 表1. 1.2方法 1.2.1本研究中婴儿在1年中的出生规律采用的是圆形分 布]进行统计分析.具体是将婴儿的出生时间转换成角度计 算平均角(丘),用d表示出生时间的集中方向.以1年365d 相当于360.,10d即相当于0.9863.,以元旦零时为零角度,通 过三角函数代换和角均数的显着性检验,求出婴儿出生的集中 时间,离散程度.首先列出各月份的月中位角,然后根据实际 例数计算各月份的角度,见表1. 1.2.2本研究中婴儿在10d中的出生规律采用的也是圆形 分布进统计行分析.10d以24h计算,相当于360.,10h相 当于15..以零时零分零秒为零度,首先列出各组中位角,然后 根据不同性别婴儿的分娩时间和产妇的分娩时间实际例数按 小时合计.将每例婴儿出生时间换成角度(a)后,再计算a值 的均数和标准差.用圆形分布平均角表示时间发生的集中方 向,探讨其出生时间的规律性.见表2. 1.2.3有关公式如下x一~fcosa/n;y—Xfsind/n;r—X+ 2 ;cosd一r;sind一/r;S一122.9548×lgr.由下式计算均 r57.2978.arctgY/X,当X>0时; I180.+57.2978.arctgY/X,当x<O时; 数丘.丘一90.,当X一0,Y>0时; l270.,当X=0,Y<O时; ? l不确定,当X一0,Y一0时. —tg一1Y/X;雷氏z—×r. 把资料按产妇分娩时间制成频数分布表,把每一组段的组