[整理版]泥土nh4测定
土壤NH-N的测定4
(参考文献:Kandeler E, Gerber H. 1988. Short-term assay of soil urease activity using
colorimetric determination of ammonium. Biol. Fertil. Soils 6, 68-72.) 原理:在碱性条件下,用硝普钠催化,土壤中的NH-N可以与水杨酸钠、二氯异氰尿酸钠4
形成绿色复合物。
一、试剂
1、2M KCl溶液:称149gKCl,溶解在蒸馏水中,最后定容到1000ml。
2、0.0125M CaCl溶液:称1.837g CaCl,溶解在蒸馏水中,最后定容到1000ml。22
3、0.3M NaOH溶液:称12gNaOH,溶解在蒸馏水中,最后定容到1000ml。
4、1.06M 水杨酸钠溶液:称17g水杨酸钠和120mg硝普钠,一起溶解在蒸馏水中,最后定容到100ml。该试剂用时配制。
5、试剂A:将100ml的0.3M NaOH溶液、100ml的1.06M 水杨酸钠溶液与100ml的蒸馏水混合,待用,不能保存。
6、39.1mM二氯异氰尿酸钠(dichloroisocyanurate,DCCA)溶液:称0.1g二氯异氰尿酸钠,溶解在蒸馏水中,最后定容到100ml,该试剂用时配制。 7、NHCl
储存溶液(100µgNH-N/ml):称5mgNHCl,溶解在蒸馏水中,最后定容到444
50ml。
8、NHCl标准曲线:分别取上述NH4Cl标准储存溶液0、0.5、0.75、1、1.25、1.5ml于试4
管中,并定容到50ml,各稀释液NHCl的含量相当于0、1、1.5、2、2.5、3.0ug/ml。分别4
取5ml的标准稀释液、2.5ml的试剂A、1ml的39.1mM二氯异氰尿酸钠溶液于试管中,混合,静止30min。于660nm波长比色,
OD,画制标准曲线。 二、步骤
1、称19g鲜土于250ml三角烧瓶中,加75ml 2M KCl溶液(或0.0125M CaCl溶液),室温2下摇1h,过滤,待分析。如果用2M KCl溶液提取,提取后须用蒸馏水按1:5或1:10稀释;如果用0.0125M CaCl溶液提取,则不必稀释。 2
2、取5ml的土壤提取液、2.5ml的试剂A、1ml的39.1mM二氯异氰尿酸钠溶液于15ml的试管中,混合,静止30min。
3、OD值测定:于660nm波长比色,记录OD。
4、通过标准曲线计算NH-N的含量: 4
µg NH-N/gdw干土=(S×V×F×100)/(A×SW×干土%) 4
其中S:样品中NH-N的平均含量;V:土壤提取液的总体积;F:稀释因子(8.5/5);A:4
5ml的土壤提取液;SW:鲜土重
土壤NO-N的测定 3
参考文献:
(Keency DR, Nelson DW. 1982. Nitrogen-inorganic forms. In: Page AL, Miller RH, Keency DR
(Eds), Methods of Soil analysis, part 2. Am. Soc. Agron., Soil Sci. SOC. AM., Madison,
Wisconsin, pp. 643-698.
Scharpf H.C., Wehrmann J. 1976. Die bedeutung des mineralstickstoffvorrates des hodens zu
vegetationsbeginn für die bemessung der N-düngung zu winterweizen. Landw Forsch 32,
100-114.)
原理:土壤提取液中的NO-N可以在210nm波长下进行比色,然后用总的NO-N减去锌还33原的NO-N,即为土壤中植物可利用的NO-N。 33
一、试剂
1、2M KCl溶液:称149gKCl,溶解在蒸馏水中,最后定容到1000ml。
2、0.0125M CaCl溶液:称1.837g 2水的CaCl,溶解在蒸馏水中,最后定容到1000ml。22
3、稀硫酸溶液:按1:10(浓硫酸:蒸馏水)稀释。 4、2.5%硫酸铜溶液(w/v):称2.5g硫酸铜,溶解在100ml蒸馏水中。 5、挂有铜皮的锌粒制备:将100ml的蒸馏水、15ml的稀硫酸溶液分别加到盛有250g锌粒的500ml烧杯中,混合,直到锌粒
面有光亮为止。弃去溶液,用150ml蒸馏水洗四次。再加150ml的蒸馏水,然后再逐滴加入25ml的2.5%硫酸铜溶液,边加边搅拌,直到整个锌粒均被包上一层黑色的铜外壳为止,再用蒸馏水洗四次,室温下干燥,储存在密闭的玻璃瓶中。
7、硝酸盐标准储存溶液(100µgNO-N/ml):称5mgKNO,溶解在蒸馏水中,最后定容到33
50ml。
8、KNO标准曲线:分别取上述KNO标准储存溶液0、0.25、0.5、0.75ml于试管中,并定33
容到50ml。各稀释液NO-N的含量相当于0、0.5、1、1.5µg/ml。分别取25ml的标准稀释3
液,分装于两个50ml试管中,分别加1ml的稀硫酸溶液,混合。加3-4粒处理的挂有铜皮的锌粒到每支试管中,静止过夜。
、于210nm波长下紫外分光光度计比色,记录OD,画制标准曲线。 9
二、步骤
1、称19g鲜土于250ml三角烧瓶中,加75ml 2M KCl溶液(或0.0125M CaCl2溶液),室温下摇1h,过滤,待分析。如果用2M KCl溶液提取,提取后须用蒸馏水按1:5或1:10稀释;如果用0.0125M CaCl溶液提取,则不必稀释。 2
2、取两个20ml清亮的土壤提取液分装于两个50ml试管中,用蒸馏水补充到25ml,分别加1ml的稀硫酸溶液,混合。加3-4粒挂有铜皮的锌粒到其中一支试管中(对照),另一支不加锌粒(样品),静止过液。
3、OD值测定:以试剂空白为参照,于210nm波长下紫外分光光度计比色,记录OD。
4、通过标准曲线计算NO-N的含量: 3
µgNO-N/gdw土=[(S-C)×V×100]/(A×SW×干土%) 3
其中S:不加锌粒的样品中NO-N的平均含量;C:加锌粒的样品中NO-N的平均含量;V:33
土壤提取液的总体积;A:20ml的土壤提取液;SW:鲜土重