荧光光度法测定饲料中糖精钠含量

荧光光度法测定饲料中糖精钠含量 第18卷,第5期 2001年9月 光谱实验室 ChineseJournalofSpectroscopyLaboratory Vol+18,NO.5 September,200l 荧光光度法测定饮料中糖精钠含量 王守兰?谢杨 【北京工业大学经济与管理学院北京市赣阳区罕乐园i00号100022) 摘要 糖精钠在碳酸钠介质中可形成具有强荧光特性的荧光配合物l据此可在荧光光度计上测定饮料中糖 精钠台量?同时对分析最佳条件进行了探讨.其结果为:汇源苹果汁中糖精钠台量为0046ug/mL.的 线性范围为o50g/mL.平均回收率为87.5.相对偏差?368. 关键词荧光光度法,饮料.错精钠. 中国分类号:0657.31文献标识码:A文章编号:1004—81381(2001)05—0601一? 1前言 糖精钠作为人工合成甜味剂,已有8o多年的使用历史,并广泛用于食品,医药,日用化工等行 业中.但其食用性及安全性越来越引起人们的重视,尤其是近年来国内外一些学者对糖精钠的致 癌问有所争论,因此我国对糖精钠的使用量做出严格的规定.由此看来,研究快速,高效的检删糖 精钠的方法是十分必要的 目前测定食品中糖精钠的方法很多,国标中规定的测定方法有,高效液相色谱法,薄层层析法 和离子选择电极法.文献报道的删定方法有,比色法和紫外吸收分光光度法等.前者中以高效 液相色谱法最为理想,后者中或需高温反应,或需配置大量试剂,其分析速度也较慢,因此,本实验 探讨了一种新的测定糖精钠的方法——荧光光度法. 荧光光度法是基于糖精(钠)能与碳酸钠形成荧光配台物而的【,此法不仅灵敏度高,选择 性好,而且简便,快速,测定结果令人满意. 2实验部分 2.1仪器及工作条件 RF一540型荧光分光光度计(日本岛津制作所),激发波长283nm,发射波长420rim,通带宽EX t0nm,EM]0nm,扫描速度中档. 2.2主要试剂 糖精钠标准溶液(1):精确称取0.0213g经l2o?干燥4h的糖精钠于小烧杯中,加去离子水溶 解,定容至10mI容量瓶中,得到2.5mg/mL糖精钠标准溶液. 糖精钠标准溶液(2):精确称取0.0212g经120C干燥4h的糖精钠于小烧杯中,加0.30 @液;精确称取3.1797g碳酸钠于10Ora1烧杯中,加去离子水溶解定容至 100Ore[容量瓶中,摇匀备用. 其他试剂如无水乙醚,盐酸,磷酸,氯化钠等.均为分析纯. 2.3实验方法 2.3.1样品预处理 取汇源苹果汁,雪碧100mL于蒸发皿中,在100c水浴上浓缩至50mI.把旅缩撵转移至 150mL烧杯中,加入7g氯化钠固体,1mL磷酸和几粒沸石,放在电炉上加热至济25mm,冷却后以 去离子水移至50ml容量瓶中定容. 2.3.2标准工作液的制备 取2.5mg/mL糖精钠标准溶液(1)1.Oml,置于l50mI分液漏斗中,加去离子水至20mIi加 (1+1)盐酸1.0mI;然唇分别用2o.10,1OmL乙醚萃取3次,弃去水层,台并乙醚萃取液:用20 20.20ml去离子水,分3次洗涤醚层,弃去水层;用o03mol/I碳酸钠溶液20,lO,10m[分3次反 苹取,台并萃取液于5Oml容量瓶中;再将容量瓶置予60?水俗中20min,挥发去乙醚,冷却至室 温.以0.03mol/L碳酸钠溶液定容至刻度,摇匀,得到5g/mL的荧光配合物溶液,待用 2.3.3样品工作液的制备 取经过预处理的样液40m1于150mI分液漏斗中,加(1+1)盐酸1.0ml,,以下操作与标准工 作液制备相同,待用. 3结果与讨论 3.1荧光配合物的激技与发射波长的选择和确定 启动RF,540荧光分光光度计,选择上述仪器参数,对糖精(钠)与碳酸钠所形成的荧光配台物 进行激发与发射光谱扫描,其结果是,激发波长为283nm,发射波长为420nm;起始泼长分别为250 — 300nm和400—430nm. 3.2校准曲线的绘制 从50/~g/ml荧光配台物溶 液中分别移取0.1,0.2,0.5, 1.0,2.0,4.0,6.0,8.0ml于 10mL比色管中.用去离子水定 1回收率实验结果(~g/mL) 容至刻度,摇匀,依次测定其荧光强度,绘制校准曲线其相关系数为0.9978回归方程为= 1.1149一1.4426.说明糖精钠含量在.一50/~g/ml.范围内,曲线线性关系良好. 3.3回收率实验 分别称取汇碌苹果汁样品液2份,每份40ml,进行加标回收实验,其结果见表1.表1的结果 表明,此法的回收率较好,相对标准偏差符合要求.是一种较理想的分析方法. 3.4样品中糖精钠含量的测定结果 取经(2.3.1),(2.3.3)处理过的样品,在上述仪器参数条件下进行测定,其结果见表2用以下 篱5期王守兰等-荧光光度珐j则定饮料中糖精钠含量 公式计算,x一(cXVt)/(×2),其中:x——样品中糖精钠含量(~g/mI);c——由校准曲线得到 的糖精钠的浓度(.ug/ml);V.——样品定容的体积(m1);V——取样体积(m1);2——浓缩的倍 数.样品中汇源苹果汁中糖精钠的台量为0.046~g/mL,雪碧中未检出. 表2样品中糖精钠含量测定结果 3.5方法的精密度 在上述仪器参数条件下,准确称取用加标法处理的汇源苹果汁样液,平行测定6次,根据测定 结果计算相对标准偏差为3.12可见此方法精密度较高. 3.6样品中防腐剂对测定结果的影响 由于本实验是在酸性条件下将样品中的糖精(钠)萃取出来的,而在此条件下,样品中的苯甲酸 钠或山梨醛钾也会同时被萃取出来.苯甲酸会使糖精(钠)与碳酸钠形成的荧光配合物产生熄灭作 用,从而干扰其糖精钠的测定.为解决这个问题,本实验采用了(2.3.1)的样品预处理方法,可将防 腐剂除掉. 37讨论 本实验分别采用糖精钠标准溶液(1)和标准溶液(2),绘制校准曲线,其结果表明,以水为溶剂 的校准曲线,不仅线性范围广,荧光强度稳定,且操作简便,方法灵敏,符合要求. 4结论 用荧光光度法测定饮料中糖精钠含量,其精密度,回收率均较高,是一种较为理想的测定方法; 在所测样品中,汇源苹果汁中糖精钠台量为0.046,ug/mI,雪碧中未检出.以上结果均符台国家标ide(Na)byFIuorimetricMethod WANGShou—LanXIEYang (Callege.Exoticsand汕g槽衄,BimgPt4~chn&U…如 -No100Pingleyuan-Chaoyangqu,B,imglO002g-PR?China) Abstract 0一 Sufobenzoicacidimide(Na)reactswithsodiumcarbonatetoformthefluorescentcomplex whichhasstrongfluorescentcharacteristic.o-Sufobenzoicacidira[de(Na)wasdeterminedwith lluorophotometer.Theconcentrationol.一 sulohenzoicacidimide(Na)inhuiyuanapplesyrupis 0.046og/m1.Theaveragerecoveryis87.5andtherelativestandarddeviationislessthan3.68%. Themethodhashighsensitivityandselectivity. KeywordsFluorimetricMethod,Drinks,0-SufohenzoicAcidImide(Na).