高级计算器方差分析的计算程序

高级计算器方差分析的计算程序 JournalofMathematicalMedicineVo1.24No.22011 文章编号:1004—4337(2011)02-0138—02中图分类号:TP323文献标识码:A 高级计算器方差分析的计算程序 毕永杨莉 (陕西省子长县疾病预防控制中心子长717300) doi:10.3969/j.issn.1004-4337.2011.02.006 方差分析是重要的统计推断方法之一,计算F值的过程 繁琐复杂.笔者利用SD机能输入程序变量,编制了方差分析 的计算程序,通俗易懂,键面简洁,运算方便.现以操作 CASIOfX-180P计算器为例,介绍方法如下: 1写入程序 1.1准备 M0DE3(SD状态) INVKAC(K寄存器清零) 令:2DATAKin6INVMin(输入数值) 5DATA 8DATA M0DEO(LRN状态) INVPCL(程序存储器清零) P(进入程序P1区) 1.2程序 Kout2Kin一2Kin+5INVxz?Kout3Kin一3Kin 十6一Kin+41M+MRINVHIKout5INVX.?Kout 6一Kin一1Kin一41INVM—Kin一6Kout4Kin—l ?MRKin一6?Kin5Kout1Kin2×Kout6Kin?2一 Kin3(38步显示1.66???) 1.3退出与运算 M()DE3 2运算实例 2.1单因素方差分析的计算 1两种制剂治疗钩虫感染效果资料] 编号对照组甲组制剂乙组制剂 279 334 303 338 198 收稿日期:2010—09—05 *陕西省子长县妇幼保健所 ? 138? 229 274 310 21O 285 117 ? 方法评介? 本例F值一1.89,查表F(2,8)...一4.46 ' .'1.89<4.46..P>O.05 结论:3组均数间差别无显着意义. 2.2双因素方差分析的计算 仿2.1操作,按RUN键后在M寄存器,l<4寄存器,I(5寄 存器分别读取处理组或单位组的n,SS,MS,列入分析用表. 求出单位组(或处理组)各值后,由Kl寄存器数据减去处理组 数理医药学杂志2011年第24卷第2期 文章编号:1004—4337(2011)02—0139—03中图分类号:Q813.11文献标识码:A?基础医学研究? 大鼠骨髓问充质干细胞体外培养以及成骨诱导 龚子龙戴冀斌 (武汉大学基础医学院武汉430071) 摘要:目的:分离培养大鼠骨髓问充质干细胞,研究其体外培养的生物特性.方法:获取骨髓间充质干细胞进行培养,倒置相 差显微镜观察细胞生长情况,绘制生长曲线,流式细胞仪鉴定细胞表面抗原.在地塞米松,甘油磷酸钠,抗坏血酸的作用下,进行成 骨诱导分化.结果:原代和传代培养的体外培养细胞呈现梭形,多角形外观,具有较强的生长增殖能力;细胞CD29抗原呈阳性表达, CD34呈阴性表达.分化细胞表现成骨细胞特性,茜素红染色有橘红色磷酸盐胞外基质沉积.结论:建立稳定可靠的分离培养大鼠骨 髓BM-MSCs方法,分离出的BM-MSCs具有干细胞的生物特性,可用于组织工程中的种子细胞. 关键词:间充质干细胞;骨髓;成骨诱导;细胞培养 doi:10.3969/j.issn.1004—4337.2011.02.007 在大鼠骨髓基质系统存在的骨髓间充质干细胞(Bone marrowmesenchymalstemcells,BM-MSCs),是一种除造血干 细胞以外的,具有多向分化潜能的干细胞,可以向骨,软骨,肌 组织,皮肤,脂肪,神经等多种组织分化,因此可以作为组织工 程中的种子细胞].虽然容易分离得到,但骨髓中BM-MSCs 含量很少,难以满足组织工程和细胞治疗的需要,因此体外纯 化和扩增尤其重要. 1材料与方法 1.1主要试剂及仪器 SPF级SD大鼠(雄性,体重9O,100g),由武汉大学实验 动物中心提供.DMEM/F12培养基(Gibco),胎牛血清(杭州 四季青),胰蛋白酶(Invitrogen),倒置相差显微镜(Olympus), 细胞培养箱(Forma),CD29,CD34兔抗鼠单克隆抗体均购自 DAKo公司. 1.2MSCs体外分离,培养 颈椎脱臼法处死大鼠,于骨髓中分离出细胞,置于37?, 5COz饱和湿度的培养箱中培养,3,4天首次换液,以后每 3天换液1次.每天观察细胞生长情况,8,12天细胞生长融 合达8O以上,用含有0.01EDTA的0.25胰蛋白酶消 化,用含1OFBS的DMEM/F12培养夜终止消化,收集细胞 悬液,1000r/min离心,弃上清,用含1OFBS的DMEM/F12 培养夜悬浮细胞按1传2比例传代培养. 1.3骨髓Mscs传代培养的生长曲线测定 选取l,5,10传代细胞胰酶消化,以3x10个/孑L接种于 24孔板,每天取3孑L消化计数,连续7天.以培养时间为横 轴,细胞数为纵轴,绘制生长曲线,进行分析比较,计算倍增时 间. 1.4MSCs的鉴定及成骨诱导 收集培养的第3代MSCs,PBS洗涤3次制备成单细胞 悬液,每个样品约需2×10个细胞.将重悬后的SD大鼠骨 髓间质干细胞悬液转移至流式检测管中,分别加入CD29, CD34及同型对照各10/,1;避光室温孵育30分钟;PBS冲洗2 遍后进行流式检测;实验组加DMEM/F12诱导液(完全培养 基+10mrnol/l地塞米松+0.3mmol/1维生素C+10mmol/ l磷酸甘油钠),对照组仅加入完全培养基,培养3周,PBS冲 洗后4%多聚甲醛固定细胞,进行茜素红染色5min,显微镜下 观察细胞外基质的钙沉积. 2结果 2.1倒置相差显微镜观察 细胞原代培养的最初培养物中悬浮血细胞成分居多,逐 (或单位组)SS,即为sS,手工操作,计算出各F值.3冯志臣,张旭平.~-N素多组资料 方差分析简捷计算法探讨.卫 生研究,1995,24(6):383~384. 参考文献 1上海第一医学院卫生统计教研室.医学统计方法.第1版,上海 上海科学技术出版社,1979,37,71. 2胡国忠.方差分析的计算程序探讨.中国公共卫生,1989,5(8) 22. 收稿日期:2010—11-25 4王继明.计算器在单因素方差分析中通用计算模式探讨.四川省 卫生管理干部学院,1999,18(2):133,134. 5王净净.两因素方差分析的计算器程序.湖南中医药,t999, 5(11):42-~43. ? 139?