[word格式] 瓜子壳上唾液斑DNA检验1例

[word格式] 瓜子壳上唾液斑DNA检验1例 瓜子壳上唾液斑DNA检验1例 ? l58? 体外.作为代谢产物.正常尿液中并不会有太多成型 细胞,不过,新鲜的尿液中含有的脱落细胞中含 DNA,其中的DNA使得尿液及尿斑的STR分型成为 可能.由于尿液中含有尿素,尿酸,无机盐类,蛋白质, 糖类等人体代谢产物.可能会直接影响到DNA, 随着尿液放置时间的增长,检验难度也加大.据报道 7天后就检验不到DNA. 在本案例中.案发5天后尿液被送检.我们先利 用医学检验.将该可疑液体送医院进行尿常规检 验,其各项指标数据都符合正常人尿;再利用免疫方 法检测到了该液体中的抗人P30,其阳性结果提示男 性犯罪嫌疑人留尿的可能.虽然镜检没有上皮细胞或 白细胞等有形细胞.但我们认为存在两种可能,一是 细胞量较少,未能检出:二是因尿液放置时间较长,细 胞已经遭到破坏,但细胞中释放的DNA链并没有被 完全破坏,这使得STR检验成为可能.在本案中我们 曾用原液直接纯化提取DNA没有获得成功.在对尿 液进行了70倍以上的富集浓缩后成功检出DNA,我 们认为这在本案例中尤为重要. f收稿日期:2006—11-02) (本文编辑:柳燕) 瓜子壳上唾液斑DNA检验1例 林锦锋,康伟,俞俊,顾连军 (宁波市公安局,浙江宁波315040) 『关键词1瓜子壳;唾液斑;现场勘验;DNA检验 『中图分类号1DF795.2[文献标识码]B 『文章编号11004—5619(2007)02—0158—01 1案例 某日.在某地一大桥洞中发现一具无名男尸.经 法医检验.确定为他杀.死因是棍棒致颅脑损伤死亡. 现场勘验提取到的主要法医物证为2根带血迹的木 棒,5处血迹,4堆瓜子壳,8枚烟蒂. 对4堆瓜子壳上的唾液斑分别进行DNA提取, 每堆挑选2至3个较潮湿的瓜子壳剪碎.加纯水56 ?浸泡1h离心.沉淀加5%Chelex一100(200,400目) 浸没瓜子壳.56?过夜后常规提取制备DNA,再用 PromegaDNAIQ纯化DNA.其他生物学检材用 JournalofForensicMedicine,April2007,Vo1.23,No.2 Chelex一100法提取制备DNA.扩增使用AB公司 AmpF1STRIdentifilerTM试剂盒,反应体积为10L,其 中瓜子壳上唾液斑模板量为4L.扩增和检测 分别在AB9700型PCR仪和AB3100型基因分析仪 上进行. 结果表明:现场5处血迹,2根木棒上血迹均为 死者所留;现场8枚烟蒂和3堆瓜子壳上唾液斑分别 为不同于死者的另外4名男性所留,另1堆瓜子壳上 唾液斑未检出STR分型数据.在将瓜子壳上唾液斑 的STR分型数据输入DNA数据库后,即刻比中该地 区盗窃前科人员.其到案后.交代了伙同其他案犯在 大桥桥洞中使用木棍殴打被害人致死的犯罪事实. 2讨论 随着法医DNA检验技术的不断发展,可检测的 生物学检材范围不断扩大.尤其是各种物证上唾液斑 的DNA检验越来越受到关注.对比较复杂的现场如 何提取有价值的生物学检材进行DNA检验是现场勘 验的一个重要问.本案除了提取现场血迹,烟蒂等 常规物证外,还特别注意到了留在现场的瓜子壳.分 析认为如果是熟人作案,瓜子壳上残留的唾液斑系案 犯所留的可能性极大.瓜子壳作为唾液的载体,容易 被现场勘验人员忽略.本案侦破的关键就是通过提取 现场瓜子壳,对瓜子壳上的唾液斑成功进行DNA检 验,通过DNA数据库比对,直接认定案犯. 瓜子壳上唾液斑DNA提取的特点:按照一般人 嗑瓜子的习惯,一堆瓜子壳为同一个人留下的可能性 较大,所以在现场提取瓜子壳时应注意按照不同方位 分堆提取,不能全部集中在一块提取.在DNA检验时 可以在同一堆内选择2至3枚瓜子壳放入同一离心 管中进行检验.由于每个人嗑瓜子的方式不同,在瓜 子壳上留下的唾液量也有较大差异,因此对送检的瓜 子壳要认真挑选.比较新鲜的瓜子壳.要注意挑选相 对潮湿的含唾液成分较多的进行检验,这样检验成功 的概率比较高.瓜子在加工时一般加入糖,盐,味精等 佐料.这些成分对DNA扩增有一定的抑制作用,所以 用Chelex法提取后要进一步纯化处理.本例应用 PromegaDNAIQTM纯化DNA取得了良好的效果. (收稿日期:2006—11_o6) (本文编辑:柳燕)