去甲肾上腺素对受损背根节神经元持续性钠流的作用神经作用性的背

去甲肾上腺素对受损背根节神经元持续性钠流的作用神经作用性的背 第四军医大学 硕士学位论文去甲肾上腺素对受损背根节神经元持续性钠流的作用 姓名:刘志洋 申请学位级别:硕士 专业:神经生物学 指导教师:胡三觉 20050501 , ,,,,,, 攘耱犍岿辑 秉承学较严谨的学风与优良的科学道德，本人声明所呈交的论文是我 个人在导师指导下进行的研究工作及取得的,,究喊果。尽嚣所知，除了文 中掎别加以标往和致谢鹕地方外，论文中不包含募他,已经发表或攥写过 的研究成果，不包含本八或他，已申请学位或其他用途使用过的成果。与菱一河工维数同意对奉殁究所擞照拄弼菱献均已在论文中作了明确的说明并表示了致谢。 申请学,】论文与资料若有不窦之妤，本人承翅一切相关。 论文作者签名: 曼,堑,亟 日期 保护知识产权声嚼 本，完全了解第四军医大学有关保护知识产杈的，即:研究生在较攻读学位期问论文工作的知识产权单位屠第四军医大学。本八保证毕业离坟后，发表论文或使用论文工作成亲时署各举,晒慧着第西军落丈擎。学校可以公布论文的全部或部分内容(含电子版，保密内容除外)，可以采用影掰，箍或共他复裁手段保存论文，学校有驭允许论文谖查嘲和惟阿，并在校园网上提供论文内容的浏览和下载服务。 黼粼:单扯冁名啼移么 去甲肾上腺素对受损背根节神经元 持续性钠流的作用 研究生:刘志洋 学科专业:神经生物学 所在单位:第四军医大学神经科学研究所 导 师:胡三觉教授 辅导教师:王玉英 博士关键词:背根节神经元去甲肾上腺素阂下膜电位振荡 持续性钠流,,, 膜片钳 中国人民解放军第四军医大学 ,,,,年,,月 本研究受国家自然科学基金重点顼昼(,,(,,,,,,,) 利面上项目(,,,,,,,,)?资助 笙幽兰堕叁堂塑主堂垡堡壅—— 缩略语表缩略语 英文全称 中文全称,, ,,,,,,,,,,,,,, 去甲肾上腺素,,, ,,,,,, ,,,, ,,,,,,, 背根节,,,, ,,,,,,,,,,,, ,,,,,,,, ,,,,,,,,, ,,;,,,,,,,, 闽下膜电位振荡 ,,,,,,,,,, ,,,,,, ;,,,,,, 持续性钠流，,。, 始川军医太学硕„,,学位论文 去甲肾上腺素对受损背根节神经元 持续性钠流的作用 硕士研究生:刘志洋 导 师:胡三觉教授 第四军医大学神经科学研究所，西安,,,,,, 中文摘要机械性外伤、缺血、局部炎症等各种致病因素可直接或间接引起外周神经的损伤，诱发以痛觉过敏、痛性感觉异常、自发性疼痛为主要表现的持久异常痛感觉，称为慢性痛。由椎间盘脱出以及椎问孔狭窄等引起的背根神经节(,,,,,, ,,,, ,,,,,,,，,,,)或脊神经根受压导致的疼痛是临床常见的慢性痛症状。此时作为感觉传递第一站的,,,受损神经元的兴奋性往往异常增高，呈现超兴奋状态。这种神经元超兴奋主要表现为闽值降低，适应性减弱，自发放电等变化，并成为产生慢性神经病痛的“起搏点”。这种异位自发放电产生的基础是阈下膜电位振荡 (,,,,,,,,,,,, ,,,,,,,, ,,,,,,,,, ,,;,,,,,,,,，,,,,)。同时，在组织炎症和周围神经损伤后，感觉神经元和外周感受器表现对去甲肾上腺素(,,,,,,,,,,,,,,，,,)受体激动剂和交感传出纤维兴奋异常敏感。在体加入,,对这种异位自发放电的产生有一定的促进作用。并且证明了是,,,,介导,,对损伤,,,神经元的兴奋性作用。然而，,,影响,,,,的离子通道机制尚不清楚，制约着慢性病痛机制的进一步研究。 本研究利用大鼠背根节慢性压迫造成的神经元超兴奋标本，通过离体单细胞膜片钳记录技术对受损,,,神经元电生理检测，阐明,,对,,,,影响的离子通道机 制(有助于深入揭示慢性痛“起搏点”形成的原因，为慢性痛治疗提供新的策略。 , 第凹军医大学硕士学位论文 实验结果 ,(受损,,,神经元上持续性钠流(,,,,,,,,,, ,,,,,, ;,,,,,, ，,,,)的检测 依据持续性钠通道的生物学特点:(,)激活电位比快钠通道低，大约负,,,,,,,。(,)通道激活时间较长，即失活过程较慢。(,)通道完全开放时，电流的幅值较低。(,)对,,,的高度敏感性。在,,例慢性压迫损伤的,,,，记录了,,,个神经元，其中大细胞(,,,,,,,),,个，中等细胞(,:,,,,,,,,,),,个，小细胞(,,,,,,,斗,),,个。膜片钳成功封接后，给予神经元斜波(,,,, ,,至,,,, ,,，时间, ,)刺激，采用穿孔全细胞式记录。根据细胞大小不同，电流幅值也有所不同。较大细胞有较大电流，中等细胞电流的激活电压在(,,,,左右，其最大电流出现在(,,,,左右，幅值平均在,,,士,, ,,。引出的持续内向电流的时间跨度差别不是很大，中等细胞的持续时间为】,,,:,, ,,，小细胞的持续时间为,,,士,, ,,，平均电流持续时间约为,,,,,,,,,之间。,(持续性电流对,,,的敏感性 在损伤,,,神经元上测得的持续性内向电流，对极低浓度的兀,具有高度敏感性，通常在,,, ,,,,,,浓度水平可以完全阻断。说明这是一种不同于快钠电流的持续性钠电流。,(持续性电流与,,,,的关系 在电流钳记录模式下，给予,,个检测的中等神经元斜波(强度,,,,,时间,,,, ,,)刺激，有,,个神经元产生,,,,(频率为,,士, ,,，振幅为,士, ,,)，还有,个神经元没有产生,,,,。然后，对产生,,,,的神经元给予,,,,,,,,,的,,,，,,,,减小至消失。洗脱,,()(后。,,,,又恢复原来大小。提示，,。。参与介导,,,,的产生。,(,,对，。的作用 当被检测的,,,神经元引导出，,。后，加入,,,,,,,,,,的,,，观 —— 墨些垩堕查堂塑兰兰垡垒兰测到，,,,的幅值增加。当洗脱,,后。，。。的幅值基本恢复到原来大小。表明,,对，。。有增强作用，,(,,对,,,,的作用 在电流钳记录模式下，在被检测的,,个,,,神经元中，有,,个产生,,,,，然后加入,,,,,,,,,,的,,，观测到,,,,的幅值有增加的趋势，,,,神经元并由原来的不放电转变为放电。洗脱,,后，,,,,又恢复到原来大小。说明,,对,,,,也有增强作用。 结 论,(在受损,,,中等神经元上检测到持续性钠电流(，。。)。,(,。对低浓度,,,敏感，介导,,,,的产生。,(,,对，,,,有增强作用。,(实验结果提示，,,通过增强，?，进而增强,,,,。关键词:背根节神经元去甲肾上腺素阈下膜电位振荡持续性钠流 ,,,膜片钳 , ;,;叫军医大学硕,,学位论立 ,,, ,,,,, ,, ,,,,;, ,,, ,,,,,,,,,,,,,, ,, ,,,,,,,,,, ,,,,,, ;,,,,,, ,, ,,,,,,, ,,, ,,,,,,, ,,,,,,,,, ,,, ,,,,,,:,,,—,,,, ,,, ,,,,,,,,,,:,,,,(,,,?,,, ,, ，,,,,,,,, ,, ,,,,,,;,,,;,，,,,,,, ,,,,,,,, ,,,,;,, ,,,,,,,,,,， ,,?,,, ,,,,,,，,,,,, ,,,,,,;, ,,,,,,,,,, ,,,,, ,,,,,, ,,,,;,, ,, ,,;,,,,;,, ,,,,,,，,,;,,,,,，,, ,,;,,,,,,,,,,,,,, ,, , ,,,, ,, ;,,,,,; 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,,,,( ,, ,,,,,,, ,,, ,,,,,,,;,,,,,, ,,,;,,,,,, ,, ,,, ,澹酰颍铮睿?,, ;,,,,,;,,,, ;,,,,,,,, , ,,,(,,,,,,, ,,,;,,,,,,,,,,,,,;,, ,,,,;,,,, ,,, ,,,,,—;,,, ,,;, ;,,,, ,, ,,,,,, ;,,, ,, ,,,,,,, ,,, ,,,,,,, ,, ,,,,,，,, ,,, ,, ,,,;,,,,, ,,, ,,, ,,;,,,,,, ,, ,, ;,,,,,,,,,,, ,, ,,,,(,,,, ,,,, ,,,, ,, ,,,, ;,,,, ,, ,,, ,,,,,, ,, ,,, ,,, ,,;,,,,,, ,, ;,,,,,; ,,,, ,,,,,,(,, ;,,, ,,,,,, , ,,, ,,,,,,, ,,,,,,,, ,,, ;,,,,; ,,,,( ,,,,,,,,,, ,,,,,,, ,(,,,,;,,,, ,,,,, ,,,,,,,,,, ,,,,,, ;,,,,,,(，,,,),, ,,,,,,, ,,, ,,,,,,, ,;;,,,,,, ,, ,,, ,,,,,,,;,, ,,,,,,,, ,, ,,,,,,,,,, ,,,,,, ;,,,,,,(,),;,,,,,,,, ,,,,,,,,, ,,, ,,,,,,,,, ,,,,,, ;,,,,, ,,,,, ,,,, ,,,，,,,,, ,,,, , ,,, ,,,,,,,, ,, ,,, ,,,,,,,,, ,,,,,, ;,,,,,,((,),,, ,,,, ,, ,,, ;,,,,,,,;,,,,,,,, ,, ,,,,,,，,,,, ,, ,,,;,,,,,,,, ;,,,,, ,, ,,,,((,),, ,,, ;, ,,,,,,,,,,,,,,,,，,,, ,,,,,,,,, ,, ,,,,,, ,, ,,,,,((,),,, ,,,, ,,,,,,,,, ,, ,,,(,,,,,, ,, , ,, ,,,,,,, ,,,, ,, ;,,,,,; ;,,,,,,,,, ,,,, ,,,, ,,;,,,,,，,,,,,,,, , ,(,,,,,(,,),,, ;,,,, ,,, ,, ,,, ,,,,,, ,,,, ;,,,,(,,,,,,,“,),,, , ,,,, ,,,,, ;,,,,(,,,,,,,(,,),,,,,,, ,,,,(,,,, ,,,,, ,,,,,, ,, ,,,;,—;,,,,，,,,,,,,, ,, ,,,, ,,,,(,,,,,,,,, ,,,,,,,，,,,, ,,)，,,;,,,,,, ,,,,,,,,,,,, ,,,,,—;,,, ,,;, ;,,,,(,,, ;,,,,,, ,, ,,,,,,,,, ,;;,,,,,, ,, ,,,;,,, ,,,,(,,, ,,, ;,,,, ,,,, ,,, ,,,,,, ;,,,,,,(,,, ,;,,,,,,,, ,,,,,,,,, ,,,,,,,, ,,,, ;,,,, ,, ,,,,,,,,,,，,,, ,,, ,,,, ,,,,,,, ;,,,,,, ,,,,,, ,,一,,,,，,,, ,,,,,, ,,,,,,,,, ,, , ,,士,, ,,(,,, ,,,,,,, ,,,, ,, ,,,,,, ,,,,,，,,,,,,,,, ;,,, ,, ,,,士,, ,,，,,, ,,,,, ,, ,,,圭,, ,,，,,, ,,,,,, ,,,, ,, ,,,,,,,,,(,(,,, ,,,,,,,,,, ;,,,,,, ,, ,,,,,,,,, ,, ,,, ,,, ,,,,;,,, ,,,,,,,,,, ;,,,,,, ,, ,,,, ,,,,,,,,, ,, ,,, ,,, ;,,;,,,,,,,,,,,, ,, ,,,,,,, ,,, ,,,,,,,(,,,,,,, ,, ,,, , ,,,,, ;,,;,,,,,,,,, ,,, ,,,,,;,,, ,,,,,,(,,,, ,,,,,,,, ,,,, ,, ,, , ,,, ,,,,,,,,,, ,,,,,, ;,,,,, ,,,,,,,,, , ;;,列军医人学嚼，:学位论史,,,, ,,, ,,,, ,,,,,, ;,,,,,,(,(,,, ,,,,,,,,,,,, ,, ,,, ,,,,,,,,,, ;,,,,,, ,,,, ,,,, ，, ,,, ;,,,,,,—;,,,, ,,;,,,,,, ,,,,,，,,, ,, ,,, ,,,,,,, ,,,, ,,,,, ,,,,,,,,,,, ,, ,,,, ,,,,(,,,,,,,,, ,,, ,,，,,,, , ,,, ,,)(,,, ,, ,,, ,,,,,,,,,,,,;,, ,,,, ,,, , ,,, ,,,,,,, ,,,,?,(,,,,，,,,,,, ,,, ,,,;,,;,,,,,,,,, ,,,(,,, ,,,,,,)，,,, ,,,, ,,,,,,,,,, ,, ,,,,,,,,,,,;,(,,,, ,,,,,,, ,,, ,,,，,,, ,,,, ,, ,,, ，,,, ,,;;,,,,,,(,,,, ,,,,,,,, ,,,, ,,,,,,,,,,, ,, ,,,,,;,,, ,,, ,,,,(,(,,, ,,,,,,,,,,, ,,,, ,,,,;,,, ,, ，,。。 ,,,, ,,, ,,,,;,,, ,,, ,,,,,,, ,,,,,;,, ，,。。，,,,,,, ,,, ,(,,,,, ,,，,, ,,,,,,,, , ，,。, ,, ,,;,,,,,,,(,,,, ,, ,,,,,,,,, ,, ,,,,,,, ,,, ,,，,,,,,,,,,,,, ,, ，,?,,;,,,,,,(,,,, ,,,,,,,, ,,,, ,, ;,, ,,,,,,, ,,, ，,。,(,(,,, ,,,,,,,,,,,, ,,,, ,,,,,,,, ,, ,,,, ，, ,,, ;,,,,,,,;,,,, ,,;,,,,,, ,,,,,，,,, ,, ,,,,;,,, ,,, ,,,,,,, ,,,,,,,, ,,,, ,, ,,, ,,,,,,, ,,,,,;,, ,,, ,,,,，,,,, ,,,,,, ,,,,,,,,, ,,，,,, ,,,, ,,,,, ,, ,,,,,,,，,,, ,,,, ,,,,,,, ,, ,,,;,,,,,(,,,, ,,,,,,,,,, ,,，,,, ,,,, ,,;,,,,,,(,,,, ,,,,,,,, ,,,, ,, ;,, ,,,,,,, ,,, ,,,,,,,,( ,,,,,,,,,,,(,,, ,,,,;,,, ,,,,,,,,,, ,,,,,, ;,,,,,,(，,,口),, ,,,,,,, ,,, ,,,,,, ,,,,,,,(,(,,, ，,,, ,, ,,,, ,,,,,,,,, ,, ,,, ,,, ;,,;,,,,,,,,, ,,, ,,, ;,,,,,,,,,,, ,, ,,,,,;,,, ,,, ,,,,(,(,, ;,, ,,,,,,, ，,,,(,(,,, ,,,,,,,, ,,,,,,, ,,,,,,,, ,,,, ,,, ,,,,;, ,, ,, ,,,,,,,,, ,,, ,,,, ,,;,,,,, ,, ,,, ，,。(,,, ,,,,,:,,,,,, ,,,, ,,,,,,,，,,,,,,，,,,?,,,,,,,,,,,，,,,,,,,,,,,,,,,,,,,, ,,,,,,,,, ,,;,,,,,,,,，,,,,,,,,,, ,,,,,, ;,,,,,,，,,?,，,,,;, ;,,,, , 堡竖星垦;,～ ,～堂塑主兰些堡,～兰; 前言和文献回顾,文献回顾,(,前言 神经元的基本性质是具有对刺激产生动作电位的能力，即兴奋性。在生理条件下，神经元兴奋性虽然可以受到多种因素的调制，而且有时会发生短暂的波动，但基本上是维持在稳定的水平。然而在病理条件下，神经元兴奋性却可能发生长时间的显著改变，进入超兴奋状态。由于神经损伤造成的以痛过敏、痛性感觉异常、自发痛等为主要表现的神经病痛?,都是常见的与超兴奋相关的病理生理过程。,艋床上由椎间盘脱出，骨刺增生以及椎间孔狭窄等引起的背根神经节(,,,)或脊神经根受压导致的疼痛是临床常见的慢性痛症状，受累部位常出现明显的压痛点和痛敏感区。此时作为感觉传递第一站的,,,，其受损神经元的兴奋性往往异常增高，呈现超兴奋状态，成为产生慢性神经病痛的“起搏点”，其电生理表现为常产生异位自发放电。由予自发放电是一个易被测量的指标，而且在损伤后自发放电的出现率显著增高，长时间存在，常被作为神经元超兴奋的主要标志。因此，抑制与消除,,,神经元超兴奋，已成为当前国际上探讨缓解慢性神经病痛的一个焦点，我室经过多年的研究，现已证实产生异位自发放电的基础是阈下膜电位振荡(,,,,)四。同时大量的动物模型研究表明，在组织炎症和外周神经损伤后，初级感觉神经元和外周感受器表现对肾上腺素受体激动剂和交感传出纤维兴奋异常敏感睁”,，证明在神经损伤区、组织炎症和损伤区远处的传人神经纤维和,,,等部位均存在交感一感觉藕联现象。离体实验外加去甲肾上腺素(,,)可以使损伤神经元放电明显增加，我们已经证明了是,,,,介导了,,的兴奋性作用,。而,,通过什么样的离子机制对,,,,发生影响尚不清楚。 由于背根节慢性压迫模型(,,,)邮,能够真实反映临床椎间孔狭窄的病理生理过程，因此我们采用这一模型进行研究。本文对损伤神经元的自———— 笙塑垩堕,,～,:堂堡主堂堡垒,苎 发放电研究状况作一下简单回顾。,(,神经元超兴奋的机斟,(,(,钠通道 钠通道广泛分布于可兴奋细胞中，是细胞机能的分子基础之一，它对控制缅艇膜兴奋性及动作电位的产生起着至关重要的作用，铺通道亚型有细胞特异性，并且随着发育水平的不同而变化。在病理情况下，钠通道的表达及功能会发生改变。近年来，从哺乳动物克隆出,,种电压门控钠通道，为了鼹它对损伤,,,裨经元超兴奋豹影响，首先需要了解钠通道在正常,,,神经元内的分布。,(,(,正常,,,神经元钠通道的分布 应用电生理方法，依据铺通道的电压依赖性、动力学特性及药理学特性(如对河豚毒(,,,,,,,,,,,, ,,,)的敏感性)，人们将,,,胞体上钠电流成份分为三种:(,)快失活，,,,—,的快电流。(,)慢激活和失活的,,,,,慢电流。,,水平的朝,对其无阻断作用，(,)失活常数介于上述二者之间的,,,—,钠电流。在,,,小细胞同时存在(,)、(,)两种电流成份。,,,大细胞，只能见到(,)电流成份。而在中等大小细胞，则可能同时存在(】)、(,)，也可能单独存在(,),,,,,,,， 事实上，这种从动力学特性来区分的钠电流可能是胞体上几种钠通道共同表达所造成的结果【,,,。而了解不同钠通道亚型的生理意义及其动力学特性需要借助于电生理、分子生物学乃至动物整体行为掌相结合的方法才能阐明。目前，几种,,,特异性钠通道已被克隆和定序，,,,胞体上至少有六种钠通道分布。其中在大、中,,,神经元表达较多的旺，及,,,钠通道在其他神经细胞也有高水平表达，它们产生,,,(,钠电流?,,。此外(另有四种钠通道为,,,或三叉神经节神经元所特有,它们分别是,,,, ,,,,、,,,,,,,、,,,、,,,。,,,,,,,是一种在外周神经系统高表达的钠通道，同时存在于所有,,,神经元，编码一种,,,—,钠通道，这 , 第岫军医大学硕士学位论文 种通道有一较低的激活闽值及较快的失活动力学特性，它可能参与神经元动作电位的形成,。,,,;,,,,,,,钠通道主要在,,,小细胞及三叉神经节神经元表达，在神经系统其他部位不表达，与心脏钠通道有,,,的同原性。,,,是一种去极化激活的电压敏感钠通道，有高的激活闽值及慢失活特性，对高浓度,,,不起反应。这一通道在最初被报道时分别被称作,,,和,,,，之后被证明是均有,,,,个氨基酸序列的同一物质【,,】。,,,,,,,,,在,,,,年又构建了,,,裸基因突变小鼠，这种小鼠对去极化刺激只产生,,,(,钠电流，表明,,,(,钠电流由,,,通道产生。同时，小鼠行为学研究显示，伤害性机械刺激不再引起痛觉反应，伤害性温度刺激作用下，痛觉反应轻微缺失，炎症性痛过敏延迟出现，从而肯定了,,,钠通道是痛觉反应的重要基础四。,,,最初由,,,—,劫在,,,,年报道，随后”,,,, ,也报道了其研究结果，并将之称为,,,一,，,,水平的,,,对其有作用?，。较之,,,，它有较低的激活兄岛涂斓氖Щ钏俣龋 饕 嬖谟冢模遥切?赴 保欤 危幔悄仆ǖ榔鸪跏谴有切谓褐氏赴 目饪寺〕隼矗 ?蝗衔 墙褐氏赴 赜械哪仆ǖ溃妫玻罚剩 壳叭衔 饕 冢模遥巧窬 希 谄渌 窬 系谋泶锝仙伲?,”。,(,(,损伤,,,神经元钠通道分布及性质的变化 超兴奋神经元中所发生的电生理变化，与离子通道的合成及在电起源部位整合入膜的程度有关。其中电压依赖钠通道的聚集以及其电导成分的变化决定了兴奋性的异常升高，进而影响随后神经病痛的发生。早期研究表明，对坐骨神经全切之后的,,,神经元离散并培养一天后进行检测，成年,,,内本不表达的,(口钠通道基因上调伫,,。,,,及,,,基因下调，且持续长达,,,天,,,,,,】。同时，在,,,小神经元上发现,,,—,钠电流明显减小，可持续,,天(而,,?)((,钠电流在切断后虽没有明显变化，但由失活转入复活的速率快了,倍?,。这种通道电流变化的基础可能分别是,,, ,,,,水平的下降和？(口钠通道基因的上调。,,,,,, ,,对这些变 第旧军医大学,,『,上学位论文 化是如何引起神经元损伤放电的解释是:当细胞膜电位在(,,,,,时，,,,—,和,,,—,铺电流具有同等大小。然而，,,,神经元的膜电位接近(,,,,(在这一水平，,,?,(,钠电流是失活的?,。因此，一种潜在的可能是，小的,,,神经元有类似其它可兴奋细胞存在的双稳静息电位〔,,】。正常情况下，小缅胞可能处于,,,—,钠电流不能激活的水平。损伤后，由于,,,,,钠电流减少，使得膜电位超极化，此时，可激活的,,,—,钠电流增加，从而降低产生动作电位的阈值水平，使自发放电易于产生。止,,,,，损伤使得,,,(,铺电流复活增快，不应期将会缩短，使神经元更易于产生高频放电〔,,(,,，。 然而在坐骨神经结扎模型上，尚有不完全相同的结果:,,,,,及,,,—,钠电流在,,,小细胞没有明显交化，,,, ,,,,的表达也没有变化，但,,,钠通道蛋白在,,,胞体减少而在轴突末梢增加，这可能与,,,合成后由胞体移位至损伤轴突末梢有关〔,,,。脊神经结扎模型中(在与损伤相对应的,,,内的小神经元上，其,,,(,钠通道表达下降;而没有损伤的相邻,,,上的大神经元则表现,,,—,钠通道表达增高，研究者认为这一现象有可能解释某些神经病痛相 邻未受损区域发生的触痛?,。 在炎症性损伤，炎症介质可以降低阈电位水平，增加,,,(,钠电流,,,(,,,，并且炎症介质诱导的,,,(,钠电流调变的时间过程与炎症介质注射引起的痛过敏的发生过程一致?,“。由于没有特异阻断剂(人们利用其相应的反义核昔酸阻断,,、,,,钠电流，发现动物对机械性伤害刺激的阈值提高…,，从而证明，炎症损伤后机械性痛过敏与,,,—,钠电流增加有关。 综上所述。损伤,,,神经元的钠通道的调变随动物模型的不同和细胞大小的不同而有不同的表现。这种差异固然决定于损伤的性质，但是在检测其变化时所用方法不同(如在膜片钳记录中，有些离散细胞经过培养而有些则没有这一过程)，也是造成这一差异的不可忽视的原因。我们主要针对离散的、中等大小的、不经过培养的,,,神经元进行研究。 笫州军医大学硕士学位论文 ,(,损伤,,,神经元的交感敏化现象 早在上世纪中叶就已发现，在手术刺激交感神经链时，会迅速增加灼性神经痛患者的自发性疼痛【,, ,。八十年代，人们已经认识到,,,神经元在损伤后产生的自发放电可能是神经病痛形成的主要原因。因此推测，损伤后交感神经可能对感觉神经元有支配作用。大量的研究工作表明，周围神经损伤和组织炎症后，损伤神经的感觉神经元胞体、外周伤害性感受器和神经瘤内再生的神经纤维表现出对肾上腺素受体激动剂和交感传出纤维异常敏感，即存在交感一感觉藕联现象〔,,,,,，。在神经瘤上进行背根的单纤维记录，静脉给予去甲肾上腺素后，,,,的自发放电纤维有兴奋性反应，,,有抑制性反应【,,,，刺激交感神经也有类似反应,，。而在正常未受损神经，交感神经则不存在此作用。研究结果同时证明，交感神经的这一作用是通过?,受体实现的〔,,(,,,。 交感一感觉藕联可发生在不同部位并有其形态学基础。周围神经切断后，神经瘤部位的交感和传人神经末梢之间发生了藕联【,,,。部分神经损伤模型中，交感一感觉藕联作用存在于未受损的伤害性传人纤维与未受损的交感节后纤维之间啪，。交感一感觉藕联除了在外周相互作用外也可以发生在,,,内部。,,,,年,;,,;,,,,在,,,,,,上发表文章肯定了“神经损伤后，交感纤维可随血管走行进入,,,在神经元周围形成篮状结构”这一现象。之后，有研究认为虽然由于实际的解剖结构决定了交感纤维不易到达感觉神经元，但是，将感觉神经元与交感神经元共同培养，可以看到两者在离体情况下形成连接?,。在不同的外周损伤，交感一感觉藕联的形成方式也不同。比较,,，(;,,,,,; ,;,,,,; ;,,,,,,;,,,,,,,,,,)及,,,(,,,,,,,,,,,,,,,,,,,)发现，,,，模型中，交感纤维通过血管长入，是一种间接芽生;而在,,,模型，交感纤维由于结扎阻碍转而相脊神经生长(是一种再生行为,,,,。此外，许多神经因子如神经营养素(白介素一,都可以调节交感芽生。胶质细胞和沃勒氏变性的髓鞘也可以释放这些调节物质来调节交感芽生,,。但是，最近 铺删军医大学硕士学位论文 有文章认为交感一感觉藕联的篮状结构出现在位于神经元表面的胶质细胞表层与交感末梢之间，该物质细胞层通过分泌神经生长因子，提供生长支持细胞表面分子来调节藕联结构，神经元与交感神经没有直接接触懈,。因此，从功能研究中我们不可否认，损伤后交感一感觉藕联机制的存在，但其相应形态学基础及具体作用机制仍有待进.