【doc】多塞平乳膏的毒理学研究

【doc】多塞平乳膏的毒理学研究 多塞平乳膏的毒理学研究 医药导报2006年2月第25卷第2期?99? 多塞平乳膏的毒理学研究 潘经媛,邱银生,严汉池,凌飒 (湖北省医药工业研究院药理毒理实验中心,武汉430061) [摘婪]目的考察多塞平乳膏经皮肤用药的安全性.方法?取家兔6只,随机分为完整皮肤组和破损皮肤 组各3只,实验开始前24h脱毛并制作破损皮肤模型,采用同体左右侧自身对比法,脊柱左侧上半部涂5%多塞平乳膏, 左侧下半部涂10%多塞平乳膏,脊柱右侧上半部涂基质,右侧下半部为空白对照,观察多塞平乳膏的单次皮肤刺激性; 另取家兔6只,分组及皮肤处理方法同上,每日给药1次,连续给药7d,观察多塞平乳膏的多次皮肤刺激性.?取家兔 32只,随机分成10%,20%,30%多塞平乳膏3个剂量组和基质组,每组8只(完整皮肤和破损皮肤组各4只).于给药 前24h脱毛并制作破损皮肤模型.将10%,20%,30%多塞平乳膏和基质各10g均匀地涂于相应各组家兔背部脱毛区, 24h后洗净残留药物.连续14d观察多塞平乳膏的皮肤急性毒性反应.?取豚鼠3O只,随机平均分为3组,每组lO 只.取5%多塞平乳膏和基质各O.2g,阳性致变态反应物(1%的2.4-二硝基氯笨,用75%乙醇配制)O.2mL,分别涂于 豚鼠脊柱左侧脱毛区,固定6h后洗去受试物,在第7和第14天以同样方法各重复1次,观察药物所致的豚鼠皮肤变态 反应.末次给受试物致变态反应后第14天,将多塞平乳膏O.2g潦于豚鼠背部右侧脱毛区,6h后去掉受试物,即刻观 察,然后于24,48,72h再观察皮肤变态反应情况;将基质O.2g及阳性致变态反应物O.2mL涂于豚鼠背部右侧脱毛区, 6h后去掉受试物,观察多塞平乳膏导致的皮肤变态反应.结果单次和多次给予多 塞平乳膏对家兔完整和破损皮肤均 无刺激作用;给予10%,20%,30%多塞平乳膏和基质后,未见该药对家兔有明显毒 性作用.给予30%多塞平乳膏组家 兔在涂药5h后有轻微嗜睡现象,12h后恢复正常.豚鼠皮肤未见变态反应.结论多 塞平乳膏对莩兔皮肤无明显刺 激性和毒性作用,对豚鼠皮肤无明显致变态反应作用. [关键词]多塞平;刺激性,皮肤;毒性,急性;变态反应,皮肤 [中国分类号]R978.7;R965.3[文献标识码]A[文章编号]1004-0781(2006)02-0099-03 AToxicologicalStudyofDoxepinHydrochlorideCreaminAnimaIs PANJing-yuan,QIUYin-sheng,YANHan-chi,LINGSha(CenterofPharmacologyandToxicology,Hubei Pr0vincialResearchInstituteofPharmaceuticalIndustry.Wuhan430061,China) ABSTRACTObjectiveToinspectt}lesafenessofpercutaneousapplicationofdoxepinhydmchloridecream(DHC)in animals.MethodsExperiment(~):6rabbitswererandomlydividedinto2equalgroups:intactskingroupanddermalinjury group.24hbeforethebeginningoftheexperiment,rabbitsofbothgroupsweresubjectedtolocalizeddepilationoftheskinofthe backtotheleftandrightofthespine.Dermalinjurywasproducedbyscrapingtheskinwit}lasterilizedneedleuntiloozingof bloodbegantoappear.Anauto.contrastmethodwasadoptedinwhichchangesintheskinonbothsidesofthespineofthesame animalwerecompared.Inrabbitsofbothgroups,theupperpartofthedepilatedareatotheleftofthespinewassmearedwith 5%DHCwhilethelowerpartwaspaintedwith10%DHC.Theupperpartoft}ledepilatedareatotherightofthespinewas smearedwiththegroundsubstanceofthecreamwhilethelowerpartwasleftforblankcontro1.Skinirritationcausedbythesin~e applicationofDHCwaskeptunderobservation.Another6rabbitsweredividedandtreatedas describedaboveexceptthatDHC andcontrolsubstanceswereappliedoncedailyfor7consecutivedays.SkinirritationcausedbyrepeatedapplicationsofDHCwas keptunderobservation.Experiment ?:32rabbitswererandomlydividedinto4equalgroupseachofwhichwassubdividedinto2 subgroups,theintactskinsubgroupandthedermalinjurysubgroup.24hbeforetheexperiment,theanimalsweredepilatedand dermalinjurywasproducedasdescribedinexperiment(D.10gof10%.20%and30%DHCweresmearedontothedepilated skinareasofeachoftherabbitsofthe3groups,respectively.Equivalentamountsofgroundsubstancewereappliedsimilarlyfor rabbitsofthe4group.24h.1ater,theremnantsofthedrugandgroundsubstancewerewashedaway.Acutetoxicskinreactions ofDHCwerekeptunderobservationfor14consecutivedays.Experiment ?:30guineapigswererandomlydividedinto3equal groups.0.2gof5%DHC,0.2gofgroundsubstanceand0.2mLofallergen(1%4-DNCBin75%ethano1)weresmeared ontothedepilatedskinofeachoftheanimalsofthe3groups,respectively.Thetestsubstanceswerewashedaway6hlater.The experimentwasrepeatedonday7andday14.Skinallergicreactionscausedbythedrugswerekeptunderobservation.14days afterthelastsmearingofthedrugs,0.2gofDHCwassmearedontotherightdepilatedareaofeachoftheguineapigs.Thetest substanceswerewashedaway6h.1aterandskinallergicreactionswerekeptunderobservationimmediatelyand24,48and72h. afterthewashing.respectively.0.2gofgroundsubstanceand0.2mL..of0.1%DNCBweresimilarlyappliedontotheright depilatedareasofguineapigsforcontro1.ResultsNoirritativedermalreactioninintactorinjuredskinwasinducedbysingle orrepeatedapplicationsofDHC.Nomajortoxiceffectswereobservedaftertheapplicationso f10%,20%and30%DHC.5h afterthesmearingof30%DHC,slightsomnolencewasobservedintherabbits,whichfadeda way12h.afterwards.Noallergic skinreactionsweIinducedbyDHCinguineapigs.ConclusionDHCwasshowntoexertnoapp arentirritativeortoxic effectsontheskinofrabbits,norallergicskinofreactionsinguineapigs. ? 10o-HeraldofMedicineVo1.25No.2February2006 KEYWORDSDoxepinhydrochloride;Skinirritation;Acutetoxicity;Skinallergy 多塞平(doxepin)是一种三环类抗抑郁药,因其能 有效地拮抗组织胺H,和H:受体,从而具有抗变态反 应和止痒作用.口服多塞平治疗慢性荨麻疹,效果优 于赛庚啶?J.多塞平乳膏首先由美国GenDerm公司 研究开发,用于治疗湿疹,异位性皮炎,慢性苔癣等疾 病,有较好的疗效.我院研制了多塞平乳膏,为评 价局部应用该药的的安全性,笔者在本实验中进行了 该药的皮肤毒性实验. 1与方法 1.1动物13本大耳白兔,体重2.2,2.5kg;豚鼠, 体重240,280g.均由武汉生物制品研究所提供. 1.2试药多塞平乳膏,浓度分别为5%,10%, 20%,30%,批号:980802,980805,980806,980807;乳 膏基质,批号:980805.均由本院制剂室提供. 1.3家兔皮肤刺激性试验单次给药试验:取家兔6 只,随机分为两组,即完整皮肤组和破损皮肤组各3 只.试验开始前24h将家兔背部两侧对称脱毛,脱毛 范围相当于体面积的10%.破损皮肤组家兔用消 毒针头在脱毛皮肤区划痕,以渗血为度.采用同体左 右侧自身对比法,兔脊柱左侧为受试物区,左侧上半部 涂5%多塞平乳膏,左侧下半部涂10%多塞平乳膏;脊 柱右侧为对照区,上半部涂基质,下半部为空白对照. 在相应部位涂受试药后,用自制塑料枷固定兔,24h 后用0.9%氯化钠溶液洗去受试物及基质.分别于去 除受试物后1,24,48和72h观察涂药部位有无红斑 和水肿等情况,以及上述变化的恢复情况与时间,并取 局部皮肤组织作病理切片,进行组织学观察.多次给 药实验时,取家兔6只,分组及皮肤处理方法同上,每 日给药1次,连续给药7d_4J. 1.4家兔皮肤急性毒性试验取家兔32只,随机分 成4组,即10%,20%,30%3个剂量多塞平乳膏组和 基质组,每组8只(完整皮肤和破损皮肤各4只).于 给药前24h将动物背部两侧对称脱毛,去毛范围相当 于兔体表面积的10%,破损皮肤侧先在脱毛区用9号 针头划"#"字,以划破表皮渗血为度.试验时,将 10%,20%,30%多塞平乳膏和基质各10,g分别均匀 地涂于相应各组家兔背部脱毛区,用自制的塑料枷固 定兔,24h后用0.9%氯化钠溶液洗净残留药物.每 日观察家兔体重,进食量,皮肤,呼吸,体态,眼,中枢神 [收稿日期】2005-05-05[修回日期]2005-06-20 [作者简介]潘经媛(1954一),女,湖北监利人,副研究 员,主要从事新药药理和毒理研究工作.电话:027— 88849935.E—mail:panjingyuan@163.corn. 经系统,四肢活动及其他中毒表现.连续观察l4 d[4,5] . 1.5豚鼠皮肤变态反应试验取豚鼠30只,脊柱两 侧对称去毛,面积3cmx3cm,随机平均分为3组,每 组10只,雌雄各半,即给药组(5%多塞平乳膏),阴性 对照组(基质),阳性对照组(致变态反应物为1%的 2,4一二硝基氯苯,用75%乙醇配制). 致变态反应接触:取5%多塞平乳膏和基质各 0.2g,分别涂于豚鼠脊柱左侧脱毛区,用纱布固定6h 后用0.9%氯化钠溶液洗去受试物.在第7和第14 天以同样方法各重复1次.致变态反应物给药量为 0.2mL,给药及观察方法同受试物. , 激发接触:末次给受试物致变态反应后第14天将受试物0.2g涂于豚鼠背部右侧脱毛区,6h后去掉 受试物,即刻观察,然后于24,48,72h再观察皮肤变 态反应情况;基质(0.2g)及致变态反应物(0.2mL), 给药及观察方法同受试物l5J. 2结果 2.1家兔皮肤刺激性试验结果单次给予5%和 10%多塞平乳膏后,家兔完整皮肤和破损皮肤用药部 位均未见红斑,水肿等刺激反应,两组家兔1—72h内 各个不同时间点刺激反应平均评分值均为0. 多次给予5%和10%多塞平乳膏后,完整皮肤和 破损皮肤组各有1只家兔的皮肤有轻度红斑,1h反应 平均评分值均为0.33,但随后逐渐恢复,48h后反应 平均分值均为0.组织学检查与空白对照组比较均未 见明显差异.对照《新药(西药)临床前研究指导原 则》中《皮肤刺激性强度评分》,判定多塞平乳膏 多次给药对完整及破损皮肤均无刺激性(平均反应分 值范围<0.50).具体结果见表1. 2.2家兔皮肤急性毒性试验结果给予10%,20%, 30%多塞平乳膏和基质后,各组家兔均无死亡,给予 10%,20%多塞平乳膏组家兔的活动,进食,体重,毛 发,眼睛,呼吸,循环,中枢神经系统,四肢活动等情况 与基质组比较均无异常.给予30%多塞平乳膏组家 兔在涂药5h后有轻微嗜睡现象,12h后恢复正常.其 他情况与基质组比较未见明显不同.详细结果见表2 2.3豚鼠皮肤变态反应试验阳性对照组给药后,皮 肤均有红斑和水肿形成,按评分标准评为1.7分,致变 态反应率为100%,24,48,72h后仍有红斑和水肿出 现.多塞平乳膏和基质组均未见红斑及水肿等现象, 多塞平乳膏对豚鼠皮肤无变态反应,详细结果见 表3. 医药导报2006年2月第25卷第2期?101? 组别完整皮肤破损皮肤 给药前给药后给药前给药后 给药后反应平均分值/分致变态反应率/% 0h24h48h72h0h24h48h72h 3讨论 长期以来,治疗皮肤病多采用糖皮质激素外用,但 长期应用这类药物尤其是使用含氟激素可引起肾上腺 皮质功能的抑制,以及骨质疏松,良性颅内高压,免疫 抑制等,在面部用药还可发生酒糟鼻样皮疹.应用多 塞平乳膏治疗皮炎,湿疹引起的瘙痒,可以避免局部应 用糖皮质激素制剂带来的不良反应. 本实验表明,多塞平乳膏对家兔皮肤无刺激性,不 会引起豚鼠皮肤变态反应.由于该药是一种三环类抗 抑郁药,传统用于治疗抑郁型精神病患者,对中枢神经 系统有一定的抑制作用,皮肤急性毒性实验结果发现, 高剂量(临床给药浓度的6倍)对家兔涂药5h后有致 轻微嗜睡作用,但12h后消失,低,中剂量组(临床浓 度的2倍及4倍)未见家兔出现嗜睡表现. [参考文献] [1]郭在培,罗汉超.多塞平和赛庚啶治疗慢性荨麻疹的疗效 比较[J].临床皮肤科杂志,1987,5:242—243. [2]LynnA,DrakeMD,JeromeD,eta1.Rdiefofpruritusin patientswithatopicdermatitisaftertreatmentwithtopical doxepincream[J].JAmAcaDermato,1994,31(4):613— 615. [3]LynnA,DrakeMD,tarryE,eta1.Theantipruriticeffectof 5%doxepincreaminpatientswitheczematousdermatitis [J].ArchDermatol,1995,131:1403—1408. [4]国家卫生部药政管理局.新药(西药)临床前研究原则汇 编[s].北京:中国医药科技出版社,1993.205—208. [5]袁伯俊,王治乔.新药临床前安全性评价与实践[M].北 京:军事医学科学出版社,1997.152—156.