[word doc]隔山消与氟化钠对牛切牙脱矿的动力学研究

[word doc]隔山消与氟化钠对牛切牙脱矿的动力学研究 隔山消与氟化钠对牛切牙脱矿的动力学研 究 大理学院 JOURNALOFDALIUNIVERSITY 第9卷第8期2010年8月 Vo1.9No.8Aug.2010 隔山消与氟化钠对牛切牙脱矿的动力学研究 刁水全,陈娜,李翔,张进唯,江金霖.蓝海 (大理学院药学院,云南大理671000) [摘要]目的:比较中药隔山消与预防龋齿最常用的药物氟化钠对牙齿脱矿速率的影响.方法:通过动力学实验比较牛切牙分别 经隔山消和氟化钠处理后抗酸脱矿作用的强弱.结果:脱矿速率曲线图明隔山消组脱矿最慢,氟化钠组次之,空白组最快,差 异显着.结论:100mg/mL~山消对牙齿有保护作用,抗龋效果比氟化钠(2Omg,L)好,提示隔山消可有效防龋,值得进一步研究和 开发. [关键词】隔山消;氟化钠;脱矿;动力学 [中图分类号]R975[文献标志码】A[文章编号]1672—2345(2010)08—0012—03 KineticsStudyofDemineralizationEffectsofGeraniumstr却 esR.KunthandSodiumFluorideonBovineIncisor DIAOShuiquan,CHENNa,LIXiang,ZHANGJinwei,JIANGJinlin,LANHai (CollegeofPharmacy,DaliUniversity,Dali,Yunnan671000,China) 【AbstractJObjective:TocomparetheeffectoftraditionalChinesemedicineGeraniumStrietipesR.Kunthonthespeedofthe demineralizationofteethwiththatofSodiumFluoride.Methods:Kineticsexperimentwasusedtocompareacid—resistant demineralizationeffectsofBovineincisorwhichwastreatedbyGeraniumStrictipesR.KunthandSodiumFluoriderespectively. Results:ThereweresignificantdifferencesinthedemineralizationeffectsbetweenSodiumFluoridegroupandGeraniumstrietipesR. Kunthgroup;therateorderofdemineralization—GeraniumstripeR.Kunthg roup<SodiumFluoridegroup<deionisedwatergroup. Conclusion:TheinhibitingdemineralizationeffectoflO0mg/mLGeraniumstripeR.Kunthonteethisbetterthanthatof20mg/L SodiumFluoride;theresultssuggestthatGeraniumStrictipesR.Kunthcaneffectivelyinhibitdemineralizationofteethandiswell worthexploiting. [KeywordsjGeraniumStnctipe8R.Kunth;SodiumFluoride;demineralizati on;kinetics 龋病是人类的常见病,在各种疾病的发病率 中,龋病位居前列.龋病是一个复杂的连续动力学 过程,一般情况下,疾病过程缓慢不危及患者生命, 因此不易受到人们的重视.龋病的发生以牙齿硬组 织的脱矿为基本特征[1]卜.,因此通过用阻止牙齿硬 组织脱矿的药物来预防龋病的发生发展一直是人 们关注的课.在过去30多年中已经进行了不少龋 病防治的药物研究,其中氟化物是预防龋病最常用 的药物,但长期使用氟化物可能通过抑制CyclinD1 和PCNA的正常表达而抑制牙胚细胞的增殖分化, 进而影响随后的基质合成分泌,引起牙胚发育矿化 缺陷,氟化物还能抑制体外培养的人牙胚内釉上 皮细胞中Smadl,5的表达,提示氟可能通过抑制smad1, 5分子干扰上皮和间充质之间骨形成蛋白(BMP)正 常的信号转导,进而使釉质的分化发育受到影响, 这可能是氟斑牙发生的细胞内机制之一(].因此, 开发安全而有效的防龋药物已成为研究的热点.天 然药物由于存在资源丰富,应用方便,使用安全等 优点,在龋病的预防和治疗方面天然药物的发展前 景受到广泛的关注.隔山消(GeraniumStrictipesR. Kunth)为白族,彝族民问习用草药,原植物为栊牛 儿苗科老鹳草属植物,其根人药,民间长期用作厌 食症的治疗,同时具有消炎,止痢和收敛的功效.有 实验证实,隔山消还具有抗酸防龋作用[4]. 本实验通过恒pH法进行隔山消水提物和氟化 钠对牙齿的脱矿动力学研究,比较天然药物隔山消 和化学制剂氟化钠对牙齿脱矿的影响,为开发防龋 的天然药物提供理论依据. 总第80期刁水全,陈娜,李翔,等隔山消与氟化钠对牛切牙脱矿的动 力学研究第9卷 1材料与方法 1.1仪器与药品雷磁ZDJ一4A自动电位滴定仪 (上海精科);雷磁温度补偿电极(上海精科);雷磁 E-201C~~JpH复合电极(上海精科);磨牙打磨机 (SAEYANGCO);超级恒温水浴(上海实验仪器厂有 限公司);IKAAllbasic分析用研磨机(广州仪科实 验技术有限公司);SY5200DH超声清洗器(上海声 源超声波仪器设备有限公司);80—2台式低速离心 机(上海医疗器械有限公司手术器械厂);SIEMENS 冰箱(博西华家用电器有限公司);乙酸(AR);氯化 钾(AR);乙醇(AR);乙醚(AR);氟化钠(AR),隔山 消水提液. 1.2实验材料市场购买新鲜拔出的牛切牙15颗, 去除牙根,软组织及冠髓,用磨牙打磨机打磨去除 釉质表面的色素菌斑,用0.9%的生理盐水超声 40min,自然晾干.随机将15颗牙齿分为三组,每组5 颗,分别用100mg/mL隔山消水提物,20mg/L氟化钠 溶液,超纯水浸泡48h,晾干,分别再用95%乙醇浸泡 15min,无水乙醇浸泡15min(2次),无水乙醚浸泡 15min,进行梯度脱水,在空气中过夜干燥,用研磨 机将牛切牙粉碎至颗粒粒径20目,备用. 隔山消采购于云南大理集盛堂大药房,经大理 学院生药学马晓匡教授鉴定为正品.将隔山消药材 洗净置80~C干燥至恒重,粉碎成粉末,准确称取20g 于一个干净烧杯中,~JN2OOmL超纯水浸泡24h后,提 取离心收集上清液备用;准确称取氟化钠20mg~H去 离子水5OraL充分溶解后加水至lOOmL,备用. 1.3脱矿脱矿液的制备:0.15mol/L的KC1,用HAc 调pH至4.00.实验开始时分别准确称取隔山消组牙 粉10rag于50mL脱矿液中,置于(37+0.1)?恒温,用 自动电位滴定仪向脱矿液中滴加0.1193mol/L的 HAc,恒pH法控制pH为4.00,每5rain定时记录HAe的 加入量,绘制消耗HAc体积与时间的关系曲线,即为 隔山消组骨粉的脱矿动力学曲线,同法实验操作并 绘制氟化钠组,对照组牙粉的脱矿动力学曲线,每 组实验分别重复3次. 2结果 2.1统计方法计算消耗HAc的体积并进行统计 学处理,实验结果经过t检验,所测数据用?s表示, 隔山消组和氟化钠组消耗的HAc均比空白组少,差 异具有显着的统计学意义(P<0.05).见表1. 表1各组脱矿消耗HAc的体积(?s) 汪:P<0.05,P<0.05. 对隔山消组和氟化钠组作方差分析得P<0.05, 则两组之间消耗的HAc体积存在显着性差异,具有 统计学意义. 2.2绘制脱矿动力学曲线绘制消耗HAc体积与 时间的关系曲线,三组牙粉脱矿动力学曲线见下 图.隔山消,氟化钠,空白组的线性回归方程分别为 y=0.O04X-O.0320,y=0.0054X+0.0041,y=O.0062X+ 0.0273,相关系数r分别为0.9983,0.9994,0.9975, 线性关系良好. 实验消耗的HAc越少,脱矿速率越陧,抗酸能力 越强.脱矿速率由低到高依次是隔山消组,氟化钠 组,空白组,结果显示,抗酸作用最强的是隔山消 组. 图1脱矿动力学曲线 3讨论 龋病的主要发生机制是由于菌斑下的致龋菌 在代谢过程中造成局部微环境pH值下降,微环境与 牙体组织问氢离子交换平衡被打破,从而启动了羟 基磷石晶体的溶解破坏.增强牙釉质表面抗酸蚀能 力,是预防龋病发生发展的重要措施之一. 目前主要应用氟化物作为防龋的药物,20mg/ L氟化钠液作为安全防龋液抑制釉质脱矿的效果 已被认可,其防龋机制包括:?降低釉质的溶解 度;?促进再矿化;?抑制细菌酶,如烯醇化酶,硫 酸酯酶,过氧化氢酶,葡萄糖磷酸变位酶和某些转 磷酸酶;?对大分子合成的影响;?影响牙齿的外 形等?]1?.但由于应用氟化钠可导致耐氟菌株的 出现,以及氟的毒副作用等问题,氟化物的应用受 13 总第8O期医学大理学院 到限制. 实验研究证实,鞣酸能与牙釉质中的有机质和 钙结合形成不溶性的复合物,可以抑制牙本质胶原 分解,促进牙本质再矿化,提高釉质的抗酸蚀性,对 龋病的发生发展具有明显的抑制作用【5-11].隔山消 中含有大量的可以水解的鞣酸],推测其抗龋性 能可能与鞣酸有关. 本实验通过比较隔山消水提物和氟化钠对牛 切牙的脱矿速率说明隔山消和氟化钠均具有抑制 牙齿脱矿的作用,二者均能抑制早期龋齿的形成, lOOmg/mL隔山消的抗酸防龋功能强于20mg/L氟化 钠,提示天然药物隔山消防龋效果可以肯定,值得 进一步研究和开发. 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[基金项目]大理学院大学生f+研基金资助项目(2009DXSKY02) [收稿日期]2010—05—18 [作者简介】刁水全,主要从事综合药学研究. 通信作者:蓝海,教授,电话:0872—2257414 (责任编辑蒋康) ? 公益广告? 殄倦命预艾澎 消除歧视算李健廉