牛肉中沙门氏菌的检测

牛肉中沙门氏菌的检测 中国动物检疫2011年第28卷第4期一59一 主持人:庞素芬sufen4.@h.mail.c0m 牛肉中沙门氏菌的检测 隋慧’,庄天中z (1.辽宁医学院畜牧兽医学院,辽宁锦州121001;2.锦州北山饲料添加药品厂,辽宁锦州 I121019) 摘要:对95份牛肉样品进行沙门氏菌实验室检测,通过增菌,选择性分离培养及生化试验,血 清学鉴定等检验,结果3份 样品检出沙门氏菌,检出阳性率为3.15%. 关键词:沙门氏菌;分离;鉴定;牛肉 中图分类号:S852.61文献标识码:C文章编号:1005—944X(2011)04—0059—02 沙门氏菌在动物中传播很广,人的传染和带菌也 很普遍.因传染源或污染食品,使人发病.世界各地食 物中毒中,沙门氏菌常占首位或第二位.有些国家沙 门氏菌食物中毒占细菌性食物中毒的40%,60%以 上.在我国细菌性食物中毒,也以沙门氏菌引起的占 首位.世界上最大的一起沙门氏菌食物中毒是1953 年于瑞典由吃猪肉所引起的鼠伤寒沙门氏菌.本菌种 类多,分布广,1885年首次分离到沙门氏菌,其后从 人,动物病例中不断发现不同血清型菌株,至今已有 2000种以上.对人致病的仅少数,其余对动物致病. 它在肠杆菌科的地位及其在公共卫生,食品卫生检验 中都是十分重要的【l】.2010年7—8月,对锦州某农贸 市场,早市及超市95份牛肉样品进行沙门菌实验室 检测. 1材料与方法 1.1材料 被检牛肉95份来自锦州某农贸市场,早市及超 市.亚硒酸盐胱氨酸(sc)增菌液,革兰氏染色液,ss 琼脂,HE琼脂培养基,三糖铁斜面,糖发酵管,蛋白胨 水培养基,葡萄糖蛋白胨水培养基,尿素琼脂,枸橼酸 盐营养琼脂,半固体培养基均按常规方法配制.沙门 菌A.F群”o”多价血清购自广州市辉康生物科技有 限公司. 1.2方法 1.2.1肉样处理检样表面先消毒,可用沸水烫 3-5次,或以酒精棉球烧灼,后以无菌剪刀和镊子采 取深层检样25g,置入无菌乳钵内,剪碎,加入灭菌海 砂或玻璃砂,研磨,然后加入无菌生理盐水225mL, 充分混匀,静置15,20min,取上清,备用. 1.2.2增菌取上清液10mL,转种于100mL亚硒 酸盐胱氨酸增菌液内,于36?1?培养18,24h. 1.2.3分离培养取呈均匀浑浊的增菌液1环,分 别划线接种于HIE,SS琼脂平板.于36?1?分别培 养18-24h,观察菌落生长状况. 1.2.4接种三糖铁(TSI)选择HE或SS平板上的 可疑菌落进行革兰氏染色,符合沙门氏菌特征者转种 三糖铁斜面. 1.2.5生化试验选择生长模式符合TSI上可疑菌 落分别做常规生化试验. 1.2.6血清型鉴定用沙门氏菌A—F群”0”多价血 清做玻板凝集试验. 2结果 2.1分离培养 将检样增菌后分别接种SS,HE平板,在SS琼脂 上形成中心黑色,边缘灰白的透明小菌落,部分菌落 全部黑色;在HE琼脂上形成蓝绿色菌落,部分菌落 全部黑色. 2.2涂片镜检 取SS或HE上可疑菌落进行革兰氏染色镜检, 油镜下观察可见革兰氏阴性无芽孢的直杆菌,两端钝 圆,散在或成对,无可见荚膜. 2.3TSI结果 TSI斜面划线,底层穿刺接种,反应模式为K/A /+;--I-. 2.4生化试验 TSI培养物生化结果见表1. 2.5血清型鉴定 将纯化获得的3株菌株分别与沙门菌A.F群 “o”多价血清进行玻片凝集反应,结果均发生凝集反 应. 3讨论 绝大多数沙门氏菌对人和动物有致病性,能引起 人和动物的多种不同临床表现的沙门氏菌病,并为人 类食物中毒的主要病原之一,在医学,兽医和公共卫 生上均有十分重要作用. WHO指出,蛋,家禽和其他肉类产品是沙门氏菌 病的主要传播媒介污染畜产品所致沙门氏菌病是最 为普遍的健康问题.本试验对95份牛肉样品中3份 一 60一中国动物检疫2011年第28卷第4期 双城市近郊奶牛场结核病检疫净化情况调查 宋德花,韩双,张宝泉 (黑龙江畜牧兽医职业学院,黑龙江双城150111) 中图分类号:S852.618文献标识码:c文章编号:1005—944X(2011)04—0060—02 随着黑龙江省质量效益型畜牧业的发展,特别是 “两个千万”工程的出台,加快了畜牧业专业化,标准 化,规模化和产业化发展进程.畜牧生产企业规模不 断扩大,数量不断增多.近年来,黑龙江省大力发展奶 牛养殖业,现已成为我国最大的奶源基地.结核病是 对奶牛养殖业危害较大的传染病之一,通过近六年来 对黑龙江省双城市近效几个奶牛场结核病检疫,并及 时采取了有效的净化措施,使结核病基本得到了控 制. 双城市近郊共有十几个规模化奶牛场,其中3个 奶牛场的结核病检疫,净化情况见下表1. 1牛结核病检疫的方法 牛结核病仍采用牛提纯结核菌素皮内变态反应 的检疫方法. 1.1材料准备牛提纯结核菌素,1.0mL注射器, 游标卡尺,牛鼻钳,8号针头,5%碘酊棉球,70%酒精 棉球,5%来苏儿等. 1.2检疫由助手保定被检牛只,术者于牛左侧颈 部中上1/3处剪毛,直径约10.0cm,如左侧皮肤异 常,换右侧颈部剪毛.然后用游标卡尺测量术部皮褶 厚度3次,取平均值.再用5%碘酊棉球,70%酒精棉 球依次消毒该部位皮肤,并在皮内注射牛提纯结核菌 素0.1mL.3个月以内犊牛在肩胛部注射同等剂量. 72h后观察术部炎症变化,并再次测量术部皮褶厚度 3次,取平均值,计算皮厚差. 2检疫结果 2.1检疫结果判定标准 局部肿胀,炎症反应明显,皮厚差>4.00mm,为 病牛:局部炎症反应轻微,2.00mm?皮厚差?4.00 mm,为可疑感染牛;局部炎症反应不明显,皮厚差< 2.00mm为健康牛. 2.2检疫结果 这3个牛场奶牛结核病检疫结果统计见上表1. 从表1可以看出,这3个牛场奶牛结核病的感染 表1生化特性反应结果样品的纯培养物,TSI反应式符合沙门菌的培养特 性,经生化特性检验和血清学鉴定为肠道沙门菌(S. enterica)[2].沙门菌检出阳性率为3.15%.农贸自由市 场销售的牛肉卫生情况是保证健康的重要因素,夏季 高热气候易使之发生变质,可能是沙门氏菌污染的重 要原因,也存在与其他商品交叉感染的可能[31.因此, 不能低估露天农贸市场引起沙门氏菌食物中毒的危 险.应加强生肉制品的卫生管理,加强对屠宰业的卫 生监督,实施肉类运输,加工,冷藏等方面的卫生措 施.控制沙门菌的污染来源和肉类销售的温度条件是 控制沙门菌污染,预防细菌性食物中毒的有力手段. 参考文献: [1]周阳生.动物性食品微生物学检验[M].北京:中国农业出 版社,1996:75. [2]陆承平.兽医微生物学[M].3版.北京:中国农业出版社, 2007:223—230. [3]王冬梅,董开忠,雒晓芳,等.冻猪肉中沙门氏菌的检测与 [J].西北民族大学学报:自然科学版,2009,30(74): 63—65