【中图分类号】R 329233 【文献标识码】B 【文章编号】100426879 (2001) 0320235202
姬姆萨 (Giem sa) 染料是一种复合性染料, 呈中
性。目前该染料已成为研究细胞生物学、遗传学的常规
染料, 尤其在动、植物核型分析、人类染色体病的检查
和染色体显带技术中应用最广泛。该染液是一种优良
的核染色剂, 染色效果较稳定, 易被工作者采纳。笔者
在长期的工作实践中摸索出一种更简易的配方, 现介
绍如下:
1 试剂配制
1. 1 姬氏原液 取姬姆萨染料 (上海试剂三厂) 1. 0g
放研钵中研磨, 研细后加入 5m l 丙三醇继续研磨。充
分研溶后, 再加入丙三醇 61m l (总量 66m l) , 将研钵放
入 60℃恒温水浴箱中 2 小时, 促其彻底溶解。取出冷
却后, 加入甲醇 (北京化工厂, A R ) 66m l, 过滤于棕色
瓶中, 放 37℃恒温箱中 15~ 30 天, 移入室温中长期保
存备用。
1. 2 pH 6. 8~ 7. 4 磷酸缓冲液 配制 1ö15mo löL 的
KH 2PO 4 和 1ö15mo löL 的N a2H PO 4, 按所需 pH 值将
二液按一定比例混匀。
1. 3 姬氏染色液 (旧) 取 1m l 原液, 加入到一定倍
数 (9、10、20、40 等)的pH 6. 8~ 7. 4 的磷酸缓冲液中混
匀即可。
1. 4 姬氏染色液的简易配方 取 1m l 姬氏原液加入
60m l 的自来水中 (可根据需要, 配成小于 1∶60 的任
意浓度)混匀, 放 37℃水浴箱中或放室温中备用。
2 染色
将制好的 SCE 标本、各种显带标本、X 染色质、胸
腹水细胞、血涂片及绒毛细胞等玻片标本分别浸入上
述两种染色液中 (或滴加染液覆盖玻片标本上) , 染色
7~ 10 分钟, 自来水冲洗, 干后镜检。
3 结果与讨论
3. 1 染色效果比较 采用同种玻片标本, 染色液浓
度、染色时间相同, 在相同环境下进行染色, 两种染液
染色的标本其颜色略有不同。改良的姬氏染色液使细
胞核和染色体呈紫红色, 背景干净, 特别是 G 带、C 带
和R 带标本, 染色体形态清晰, 深浅带纹分明, 利于识
别。而用缓冲液配制的染色液, 随缓冲液 pH 值增高,
其胞核与染色体的颜色加深, 当缓冲液的 pH 值大于
7. 1 时, 胞核与染色体呈蓝紫色或蓝色, 不利于带纹的
识别。只有缓冲液pH 值小于 7 时, 两液的染色效果基
本相同。工作中还发现, 染液预热至 37℃时, 细胞核和
染色体着色快 (只需 7~ 8 分钟) , 用水配制的染液使用
时间较长 (2~ 4 小时)。
我们用改良的染色液染过多种标本, 如小鼠骨髓
细胞、脾细胞、睾丸细胞和小肠上皮细胞, 人胸腹水细
胞、绒毛细胞, 染色体 G 带、C 带和 R 带标本, X 染色
质与 SCE 标本等, 效果均较好。从细胞核和染色体的
颜色上看, 改良的姬氏染液与用 pH 6. 8~ 7. 0 的缓冲
液配制的染液其染色效果无差别, 但与 pH 7. 1~ 7. 4
缓冲液配制的染色液染色效果相比, 前者优于后者, 因
后者染色的细胞和染色体呈蓝紫色或蓝色, 颜色深, 不
利于带纹的识别。
3. 2 简易配方的优点 ①节约试剂。简易配方不需磷
酸缓冲液, 染色液的浓度 (1∶50 或 1∶60) 也较低, 可
节约N a2H PO 4、KH 2PO 4、染料、丙三醇和甲醇。②省
时。用自来水替代磷酸缓冲液, 不用配制缓冲液, 省时、
简便、经济, 因自来水可随用随取 (停水除外) , 非常方
便。经酸度计测定, 自来水的pH 值在 6. 7~ 6. 9 之间,
呈弱酸性或近似中性, 与所需磷酸缓冲液的 pH 值基
本吻合, 故不影响染色效果。③染色液预热至 37℃加
速了细胞核和染色体着色, 节约了时间。④用水配置的
姬氏染色液使用时间较长, 原因不详。
实践证明, 改进后的染液简便、经济、实用、省时,
胞核和染色体呈紫红色, 背景清晰, 色调稳定。笔者用
该液染色的 G 带、C 带等标本已保存 15 年之久, 细胞
核和染色体的颜色仍呈紫红色, 带纹无任何变化。
(收稿日期: 2001—02—22)
氧气疗法在临床中的应用
王洪芳, 李 萍, 李坤贤
(承德医学院附属医院, 河北 承德 067000)
【关键词】氧气疗法; 应用
【中图分类号】R 459. 6 【文献标识码】B 【文章编号】100426879 (2001) 0320236203
氧气疗法 (氧疗) 是纠正各种原因所造成的缺氧, 特别是抢救和治疗心、肺功能不全的重要措施之一。通
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承 德 医 学 院 学 报
JOU RNAL O F CH EN GD E M ED ICAL COLL EGE V o1. 18 N o. 3 2001
过氧疗提高动脉血氧分压和血氧饱和度, 对改善组织
缺氧、促进代谢、维持机体生命活动有着重要意义。
1 缺氧的原因
1. 1 肺性缺氧 由各种肺部疾病所致, 如支气管炎、
哮喘、肺肿瘤和肺叶切除等。
1. 2 循环性缺氧 由于血液循环障碍所致, 如心功能
不全、休克。
1. 3 贫血性缺氧 是因血红蛋白量的不足或质的异
常, 导致输送氧的能力降低, 如严重贫血、外伤失血、脑
血管病变、血红蛋白变性。
1. 4 大气性缺氧 吸入的气体中氧的含量不足, 如高
空飞行、登山探险和急性高山病等。
1. 5 组织性缺氧 即组织利用氧的能力降低, 如氰化
物中毒和一氧化碳中毒等。
1. 6 需要性缺氧 机体对氧的需要增加所致, 如高
热、甲亢、剧烈运动等。
2 缺氧的判断
2. 1 症状和体征 缺氧的一个重要的体征和指标是
紫绀, 表现为皮肤及粘膜呈蓝紫色, 尤其在唇、面颊、指
甲、耳鼻部位因毛细血管丰富而较为明显。另外还可表
现为胸闷、心悸、气促。长期缺氧可出现厌食、消瘦无
力、头晕、头痛及精神障碍。
2. 2 实验室指标 动脉血氧分压 (PaO 2) 测定低于正
常预计值 (PaO 2= 100- 0. 325×年龄) 的 90% 可以确
定为低氧血症。本公式适用于居住在海平面的成人, 在
高原, 粗略估计海拔每升高 3km , PaO 2 则下降 2.
24mmH g。
2. 3 缺氧程度判断及吸氧调试
2. 3. 1 轻度缺氧: 临床主要表现为轻度紫绀、呼吸稍
有困难, PaO 250~ 70mmH g。若 PaO 2> 50mmH g 时, 给
予低流量低浓度吸氧, 若 PaO 2 在 65mmH g 以上, 氧饱
和度 (SaO 2) > 80% , PaO 2 < 50mmH g 者, 一般不需给
氧。
2. 3. 2 中度缺氧: 临床表现为紫绀明显、呼吸困难、神
志正常或烦躁不安。PaO 2 在 36~ 50mmH g, SaO 2 在
65%~ 80% , 可持续吸氧, 氧流量 2~ 4L öm in, 浓度为
29%~ 37%。
2. 3. 3 重度缺氧: 紫绀更明显, 出现“三凹征”, 患者呈
昏迷或半昏迷状态, PaO 2 在 35mmH g 以下, SaO 2 在
49%~ 65% , PaCO 2> 90mmH g, 急需给氧。应在持续
低流量给氧的基础上, 加用间断加压供氧吸入措施。
3 给氧原则
临床上根据不同的病理、生理状况, 供氧的浓度应
有所不同。对于急性呼吸抑制, 如心跳骤停、急性中毒
者要分秒必争, 立即给予高浓度氧或纯氧进行抢救。吸
入氧浓度在 50% 以上者, 不应长时间使用, 吸入纯氧
不超过 24 小时[1 ] , 以预防氧中毒。对于缺氧与二氧化
碳潴留同时并存者, 应低浓度供氧。氧浓度与氧流量之
间关系
如下: 吸氧浓度 (% ) = [ 21+ 4×氧流
量 (L öm in) ]×100%。
4 缺氧对机体的影响
生命体内代谢过程必须有氧的参与, 身体组织器
官缺氧会导致代谢紊乱、组织功能障碍和组织细胞损
害。一般认为 PaO 2< 30mmH g, 心、脑、肝、肾等重要脏
器的细胞将受损害, 如不及时纠正缺氧, 组织严重损害
必将危及生命。
5 氧疗指征
通过血气分析决定用氧指标, 当病人 PaO 2 低于
50mmH g 时, 应 给 予 吸 氧 ( PaO 2 正 常 值 80~
100mmH g, 50mmH g 为最低限值)。
5. 1 肺泡通气过低 如呼吸骤停、呼吸中枢抑制、上
呼吸道梗阻, 可引起缺氧及二氧化碳潴留。治疗原则是
改善通气同时吸氧。
5. 2 通气血流灌注比例失调 如哮喘、支气管肺炎、
气胸、肺心病, 可给予持续低流量低浓度吸氧。
5. 3 血液循环功能障碍 如心功能不全、心源性休
克, 使肺部淤血而致呼吸困难。
5. 4 各种中毒 如巴比妥、吗啡、一氧化碳中毒, 使组
织利用氧发生障碍导致缺氧, 引起呼吸困难。
5. 5 昏迷病人 如脑血管意外或颅脑损伤。
5. 6 其它 贫血性缺氧, 如大出血引起的失血性休克
和分娩时产程过长或胎儿心音不良等。
6 氧气表安装使用中应注意的问题
氧气表由压力表、减压器、流量表和湿化瓶四部分
组成。值得注意的是湿化瓶内应装入 1ö2~ 2ö3 的清洁
水用以湿润氧气, 以免干燥的气体刺激呼吸道。另外,
抢救急性肺水肿病人吸氧时, 将湿化瓶内放入 20%~
40% 酒精, 可降低肺泡内泡沫表面张力, 使泡沫破裂,
气体和肺泡壁接触面扩大, 气体易于弥散至血液, 从而
改善气体交换功能。湿化瓶液体内放入药物, 如氟美
松、Α—靡蛋白酶、庆大霉素及其它抗生素, 随着氧气的
吸入可以起到超声雾化吸入的效应, 达到治疗、消炎效
果。安装氧气表时, 必须注意保持流量表与地面垂直放
置。有关资料证实, 流量表倾斜 45 度左右, 输氧量减少
20% 左右, 若加之倾斜时浮子靠在管壁上产生的摩擦,
误差会更大, 可影响输氧效果[2 ]。
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7 给氧方法
7. 1 单侧鼻导管法 即把导管插入鼻咽部吸氧。此法
方便简单, 临床上常采用, 缺点是长期应用刺激鼻腔粘
膜, 病人感觉不适。
7. 2 鼻塞法 是将塑料球状物塞于鼻孔连接吸氧管
吸氧法, 是现在临床上最常采用的, 适用于较长时间用
氧病人, 但因鼻塞进入呼吸道长度短, 吸氧确切效果有
待研究。
7. 3 口罩法 是以漏斗连接橡皮管, 并将漏斗放于距
离病人口鼻 1~ 3cm 处吸氧。此法耗氧量较多, 一般 4
~ 6L ö分, 多用于婴儿。
7. 4 面罩法 是将简易呼吸器面罩边缘充气, 紧贴于
病人口鼻并连接呼吸囊吸氧法。多用于严重缺氧者, 需
调节氧流量至 7~ 8L öm in。
7. 5 氧气枕法 在抢救急、危重病人时, 因氧气瓶准
备不及时, 或在转移病人途中, 用氧气枕代替氧气装
置。
7. 6 氧气帐法 用于抢救婴幼儿, 是将病儿头部放进
紧闭的帐篷内, 帐篷经导管连接氧气瓶。一般氧气流量
需 10~ 12L öm in, 耗氧量大。
7. 7 其它 如高压氧舱、气管内插管、呼吸气囊及呼
吸机正压给氧, 用于抢救危重症及特殊缺氧的病人。
8 氧气瓶内氧气的储存量和供给时数的计算
氧气瓶内氧气量= 氧气瓶的容积 (L ) ×压力表所
指压强 (kgöcm 2) ö1 个大气压强 (1kgöcm 2)。
氧气可供给时数= [氧气瓶内氧气量 (L ) - 氧气
瓶容积 (L ) ]ö每分钟氧流量 (L öm in)×60m in。
9 给氧效果的观察和停氧指征
9. 1 给氧效果观察 如紫绀的好转情况, 心率较前减
慢, 呼吸频率减慢且平稳, 意识障碍明显减轻与否。若
吸氧后紫绀和呼吸抑制虽然减轻, 但意识障碍改善不
明显或加重, 可能是给氧方式不当, 要及时通知医生给
予处理。如果氧疗后 PaO 2 上升至 50mmH g 以上, SaO 2
上升至 85% 以上, 升高的 PaCO 2 逐渐下降, 说明氧疗
有效。如果 PaO 2 上升, 但 PaCO 2 不降或增高, 表明氧
疗方法不当或无效, 应该及时采取措施。
9. 2 停氧指征 对急性疾病引起的低氧血症, 病情好
转、缺氧纠正后即可停氧。慢性肺部疾病如果停止吸氧
后 30 分 钟 SaO 2 仍 保 持 在 85% 以 上, PaO 2 在
60mmH g 以上, PaCO 2 低于 50mmH g, 意识清醒、呼吸
平稳, 可以安全撤除氧疗。如果撤掉氧气后出现紫绀、
大汗、呼吸加快、血压升高、精神症状、PaO 2 下降、Pa2
CO 2 升高, 应立即恢复吸氧。
【参考文献】
[1 ] 李应中译. 氧毒性 [J ]. 国外医学护理学分册, 1984, 4:
188.
[ 2 ] 吕焱, 邢梅. 流量表的放置与输氧量的关系[J ]. 实用护理
杂志, 1995, 11 (11) : 9.
(收稿日期: 2001—03—20)
线性扫描伏安法测定维生素C
杜小鹃, 崔凤侠, 韦立红, 郑建军, 刘进军, 刘丽艳
(承德医学院化学教研室, 河北 承德 067000)
【关键词】维生素C; 线性扫描伏安法; 含量
【中图分类号】R 313 【文献标识码】B 【文章编号】100426879 (2001) 0320238202
维生素 C 又名抗坏血酸, 是生命不可缺少的物
质, 它在玻璃电极上能直接发生氧化反应。本研究用线
性扫描伏安法测定片剂中的含量。线性扫描伏安法的
峰电流和峰电位方程如下:
Ip = 0. 4463n3ö2F 3ö2 (R T ) - 1ö2D 01ö2V 1ö2Cb
式中 Cb 为氧化物的本质浓度, V 为电位扫描速
度, Ip 与Cb 的正比关系是线性扫描伏安法定量分析的
依据。
1 材料与方法
1. 1 仪器 L K98A 微机电化学分析系统, 玻碳电极
镀汞为工作电极, 饱和甘汞电极为参比电极, 铂电极为
辅助电极。
1. 2 试剂 1. 00g·m l- 1维生素 C 标液; 2. 00mo l·
L - 1HA C2N aA C 缓冲液; 市售维生素 C 片剂; 实验用
水均为煮沸后冷却的去离子水。
1. 3 方法
1. 3. 1 在 5 个 10m l 比色管中各加入 2m lHA C2N aA C
缓冲液, 再分别加入 0. 10、0. 20、0. 40、0. 60、0. 80m l
维生素C 标液后用离子水稀释至刻度。溶液用作制备
工作曲线。
1. 3. 2 在各比色管中加入HA C2N aA C 缓冲液, 再分
别加入维生素C 标液后用去离子水稀释至刻度。溶液
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承 德 医 学 院 学 报
JOU RNAL O F CH EN GD E M ED ICAL COLL EGE V o1. 18 N o. 3 2001