胃复春片对幽门螺杆菌抑制作用的实验研究

胃复春片对幽门螺杆菌抑制作用的实验研究 题目:胃复春片对幽门螺杆菌抑制作用的实 验研究 编辑:司马小 【关键词】 幽门螺杆菌 近年来～临床治疗幽门螺杆菌,Helicobacter pylori～Hp, 遇到了很大困难～Hp耐药的问题日益严重～如何选择更有效的西药和研究中药对 Hp的治疗～是摆在消化科医生面前的重要任务之一。本实验选用中药胃复春片对 Hp的体外试验～旨在探讨中药胃复春片对幽门螺杆菌可能的抑制作用和临床意义。 1 材料与方法 1.1 实验材料 (1)菌种: Hp菌株NCTC11637由浙江大学医学院病原生物学系医学细菌研究室提供。近期从临床胃炎或消化性溃疡患者胃黏膜活检标本中分离了60株 Hp～经系统细菌学鉴定证实为 Hp后保存于- 70?。(2)药物:受试药物胃复春片由杭州市胡庆余堂药业有限公司生产～每片重0.359g, 批号060618,国药准字 Z20040003。对照药丽珠得乐,枸橼酸铋钾颗粒,～由丽珠集团丽珠制药厂生产～国药准字H10900086。将胃复春片碾成粉末～加灭菌蒸馏水4?浸泡24h～滤除残渣～100?水温15min灭菌。枸橼酸铋钾颗粒先用灭菌蒸馏水溶解～然后0.22μm滤膜过滤除菌。上述试验药和对照药再用灭菌蒸馏水配制成所需浓度的溶液。 1.2 实验方法 (1)细菌培养基:采用含5%脱纤维羊血的哥伦比亚琼脂,法国梅丽埃公司,～作为分离和培养 Hp的培养基～同时该培养基也作为药敏试验的基础培养基。脱纤维羊血购自杭州康裕贸易有限公司～ Hp培养时环境气体条件是5%O2、10% CO2及85% N2,杭州特种气体厂提供,。(2)药敏试验培养基:将上述哥伦比亚培养基加热充分溶解～冷却至60?左右时加入终浓度为5%脱纤维羊血～再分别加入不同稀释度的上述药物溶液～使培养基所含药物的浓度分别为0.005、0.01、0.02、0.04、0.08、0.16、0.32、0.64、1.28、2.56、5.12、10.24 mg/ml～倾注平板～37?孵育24 h检菌合格后臵4?备用。(3)药物最低抑菌浓度(MIC)测定:采用二倍平皿稀释法。刮取新鲜培养的 Hp菌苔～用灭菌生理盐水充分混匀～用麦氏比浊法配制成1×107/ ml的菌液。取各菌液5μl点种于含药物的平板上～37?培养72h后观察结果。以50%和90% Hp菌株的生长被抑制为该药物的50%最低抑菌浓度,MIC50,和90%最低抑菌浓度,MIC90,。实验中同时设臵不加任何药物、正常培养的对照。 2 结果 正常对照中60株 Hp均生长良好。受试药胃复春片和对照药丽珠得乐对60株 Hp临床分离菌株和标准菌株NCTC11637的MIC测定结果见表1。表1 胃复春片和丽珠得乐对60株Hp及NCTC11637的MIC测定结果,略, 3 讨论 Hp是一种微需氧的革兰阴性螺旋形细菌～主要栖居于人胃黏膜的黏液层～被认为是慢性胃炎、消化性溃疡的重要致病因素～并与胃癌的发 生也有一定关系。新近研究发现Hp感染与胃肠外疾病如心血管疾病等 也有一定相关性。因此～Hp感染及其相关疾病已成为一个严重的问 题。Hp在人群中感染率约为60%，70%～慢性胃炎或消化性溃疡患者中 可高达70%，90%左右。人胃是Hp感染的主要栖居场所。随着对抗Hp 感染治疗的深入～发现 Hp耐药的问题日益严重。据国外资料报道～Hp 对克拉霉素的耐药率在3%，14%,,，？,～对甲硝唑的耐药率在 20%，40%,,,～某些发展中国家可高达50%，80%,,,。国内资料 显示～克拉霉素的耐药率为6.1%，25%,,，,,～且有上升的趋势。 中成药胃复春片是纯中药制剂～临床广泛用于慢性浅表性胃炎、 萎缩性胃炎、肠腺化生、肠上皮不典型增生、功能性消化不良等症。 本实验结果表明～胃复春片具有一定的体外抑制 Hp作用～虽然达到 MIC90所需的药物浓度是丽珠得乐的4倍。在先前作者的研究也表明～ 某些药物虽无具备直接抑制Hp的成分～但确有抑制 Hp的作用,, ,,。国内应用中药对Hp治疗进行了许多研究～结果发现确有30，40 味中药或6个以上复方有不同程度的抗Hp作用。某些中药及非抗生素 类非铋剂类西药对 Hp的抑菌作用～推测除了直接作用外可能与其改变 了Hp赖以生存的局部胃内环境有关。胃复春可能亦有此作用。椐此作 者认为抗生素耐药现象日益严重的今天～不断开发治疗Hp的新药～包 括中西医结合治疗～是避免耐药菌株产生的有效方法～中药及非抗生 素类非铋剂类西药作为抗Hp的二线或后续治疗的作用～值得临床进一 步研究。 【参考文献】 1 Franzin L, Pennazio M, Caboli D, et al. Clarithromycin and amoxicillin susceptibility of Helicobacter pylori strains isolated from adult patients with gastric or duodenal ulcer in Italy. Curr Microbiol～ 2000,40:96，100. 2 Taylor DE, Jiang Q, Fedorak RN, et al. Antibiotic susceptibilities of Helicobacter pylori strains isolated in the Province of Alberta. Can J Gastroenterol～ 1998,12:295， 298. 3 Savarino V, Zentilin P, Pivari M, et al. The impact of antibiotic resistance on the efficacy of the three 7-day regimens against Helicobacter pylori. Aliment Pharmacol Ther, 2002,14:893，900. 4 Pillotto A, Rassu M, Leandro G, et al. Prevalence of Helicobacter pylori resistance to antibiotics in Northeast Italy: a multicentre study. GISU. Interdisciplinary Group for the Study of Ulcer. Dig Liver Dis, 2000,32:763，768. 5 Torres J, Camorlinga-Ponce M, Perez-Perez G, et al. Increasing multidrug resistance in Helicobacter pylori strains isolated from children and adults in Mexico. J Clin Microbiol, 2001,39: 2677，2680. 6 张晓光～胡品津～陈为～等. 广东地区幽门螺杆菌耐药的调查. 胃肠病学～2001～6(1):A66. 7 成虹～胡伏莲.北京地区幽门螺杆菌耐药的临床研究. 胃肠病 学～2001～6(1):A31. 8 史彤～刘文忠～萧树东～等. 上海地区幽门螺杆菌对抗生素耐 药率的变迁. 中华内科杂志～2000～39,8,:576. 9 邵军～扬昭徐～唐明忠～等. 幽门螺杆菌对4种抗菌药物的敏 感性检测及意义. 临床检验杂志～2003～21,4,:219，220. 10 王杭勇～黄怀德～严杰. 麦滋林-S对幽门螺旋菌的抑菌作用. 浙江医科大学学报～1994～23,1,:22，23.