吗啡通过突触前机制抑制视上核神经元兴奋性突触传递_医学论文

吗啡通过突触前机制抑制视上核神经元兴奋性突触传递_医学论文 吗通吗突前机制抑制吗上核神吗元吗吗性突吗吗啡触触_吗文医学 吗通吗突前机制抑制吗上核神吗元吗吗性突吗吗啡触触_吗文医学 【吗吗吗】 吗上核 　　吗吗吗: 吗上核吗片全吗胞吗吗吗突吗吗 啡触 　　摘 要:目的 究吗吗大鼠吗上核神吗元吗吗性突后吗流研啡触 ;excitatory postsynaptic currents～EPSCs,的影～吗其突机响并触 制吗行探吗. 方法 采用吗片膜片吗全吗胞吗吗技吗～在吗吗吗吗下～吗吗吗吗大状啡 鼠吗上核神吗元EPSCs和mEPSCs;miniature EPSCs,的影响. 吗果 20μmol L-1 的吗可分吗使大鼠吗上核神吗元的啡EPSCs的吗率下降 65%～幅度少减44%～mEPSCs吗率下降45%～幅度少减12%. 吗吗 吗啡 通吗突前机制抑制吗上核神吗元突前吗吗性吗吗的吗吗触触. 　　Keywords:supraoptic nucleusbrain slicewhole-cell recordingsynaptil transimission 　　Abstract:AIM To observe the effects of morphine on the excitatory postsynaptic currents;EPSCs,and miniature EP-SCs;mEPSCs,in rat supraoptic nucleus;SON,neurons and to determine its synaptic mechanism.METHODS Using whole-cell voltage-clamp recording technique in brain slices～the EPSCs and mEPSCs of rat SON neurons were recorded～respectively.RESULTS 20μmol L-1 morphine decreased the frequency of EPSCs and mEPSCs;EPSCs by65%～mEP-SCs by45%,～and decreased the amplitude of EPSCs by44%in all SON neurons～but had no effect on the amplitude distri-bution of mEPSCs.CONCLUSION Morphine inhibits the excitatory transmissions via presynaptic mechanisms in SON neurons from rat brain slices. 　　0 引言 　　吗上核;supraoptic nucleus～SON,分泌大吗胞主要通吗液途内体 径来体内吗控机的平衡和自主功能.受到吗激、吸、渗透吗改吗以及其当吮 他生理刺激吗～吗上核神吗元就吗放催吗素或;和,加吗素入血以及其会 在吗干吗吗系吗的投射域,区1～2, ～在激素吗放吗程中吗上核神吗元的放 吗模式起了定性作用～而放吗模式主要由吗上核神吗元在膜特性和决内 突吗入的吗合作用吗控,触3, . 阿片是一吗重要的神吗吗吗～能抑制吗上核神吗元的分泌活吗内.阿片的吗吗 抑制作用主要通吗直接抑制吗上核神吗元吗吗～但在吗多吗阿片吗能通吗来区 抑制突吗吗的吗放而影突后神吗元的吗特性,触从响触学4, .在吗上核～ 阿片是否也能通吗抑制突前吗吗的吗放影分泌大吗胞的吗活吗～触来响内尚 没确研啡有明吗吗～本吗吗采用吗片膜片吗全吗胞吗吗方法究吗吗吗上核神吗元吗吗 性突吗吗的影触响. 　　1 材料和方法 　　1.1 材料 成年SD雄性大鼠～吗量吗体250g～由本校吗吗吗物中心提 供.蔗糖ACSF的成分吗;mmol L-1 ,:蔗糖250～KCl2.5～CaCl2 2～Mg-SO4 2～NaH2 PO4 1.25～NaHCO2 25.ACSF的成分吗;mmo l L-1 ,:NaCl125～KCl3～CaCl2 2～Mg-SO4 2～NaH2 PO4 1.25～NaHCO2 25～葡萄糖10.蔗糖ACSF吗液的成分极内 ;mmol L-1 ,:K-Glu-conate140～MgCl2 2～Hepes10～ATP2～KOH吗pH吗7.2.bicuculline、吗酸吗啡 ;morphine,～CN-QX～APV～naloxone和TTX;Sigma吗品,在吗吗前溶解于ACSF. 　　1.2 方法 　　1.2.1 吗薄片的制吗 大鼠吗ip吗吗;胺100mg kg-1 ,麻醉后～使用0,4?吗950mL L-1 O2 和50mL L-1 CO2 吗和的蔗糖人工吗脊液;artificial cere-brospinal fluid～ACSF,吗行心吗灌流～然后吗吗迅断并 速取吗～快速置于冷的冰0,4?吗950mL L-1 O2 和50mL L-1 CO2 吗和的蔗糖人工吗脊液中.待吗完全冷却后～吗吗上核所在吗吗行修吗～然区 后在震吗切片机;Campden Instruments～USA,上制吗厚度吗吗300μm的含吗上核的水平下丘吗吗片～置于并26?的持吗充以950mL L-1 O2 和50mL L-1 CO2 的ACSF中孵育. 　　1.2.2 吗吗吗吗 吗片在26?的ACSF中孵育至少2h～待吗片恢吗后移至吗吗槽～用尼吗及网U形吗吗加以固定～以框并1,2mL min-1 的速度灌流26?的充以950mL L-1 O2 和50mL L-1 CO2 的AS-CF.在解剖吗;×15,下根据大鼠吗定位吗吗分辨吗上核～采用“盲”方法吗行插 全吗胞吗吗.璃微吗由玻极PP-83吗拉制器;日本极Narishige公司,拉制～ 尖端吗口吗2μm～充以吗液极内.封接前微吗极阻抗吗3,7MΩ～封接吗 阻吗2,6GΩ～串吗吗阻在20MΩ以下.在形成全吗胞吗吗方式后～吗吗胞的 生物吗信号吗膜片吗放大器Axopatch200A放大～由并Digi-Data1200板 吗行A/D吗吗后～吗入吗算机～由吗件包Pclamp6.0.2;美国Axon公司,吗 行据采数号集和分析～吗吗胞的指令信由吗算机吗D/A吗吗后吗出.采吗吗率吗 10kHz～吗信均低号通吗塞吗吗波;Lowpass Bessel Filter,～-3d吗率吗2kHz. 　　吗吗吗理学:吗吗据以数x ?s表示.吗同一神吗元的吗吗性突后吗流触 EPSCs和微小的吗吗性突后吗流触mEPSCs的分析采用累吗率～吗其吗概 率和幅度的分布采用Kolmogorov-Smirnov吗吗.吗多神吗元的个EPSCs及 mEPSCs的吗率和幅度分析采用相吗吗～用并配吗t吗吗. 　　2 吗果 　　在全吗胞吗流吗吗吗方式下吗得吗上核神吗元的静息膜吗位吗 ;55?8,mV;n=38,.大部分神吗元都有自吗的吗作吗位吗放～放吗分吗 两吗～一吗吗位相型放吗～一吗吗非位相型放吗～吗可能和神吗元的吗型有吗;加吗素神吗元和催吗素神吗元,.神吗元膜的吗入阻抗吗 ;530?110,MΩ～膜的吗吗常数吗;34?13,ms.加入20μmol L-1 吗啡极～所有的吗上核神吗元都表吗吗超化～自吗放吗的吗率下降. 　　吗1 略 　　2.1 吗吗吗上核神吗元啡EPSCs的影 采用全吗胞吗吗吗吗吗方式～响把吗上核神吗元的吗制吗位保持在静息膜吗位附近;-60mV,～在灌流的ACSF中加入30μmol L-1 的GABAA 受体断阻吗bicuculline以阻断抑制性突后吗流的触况情下～可吗吗到EP-SCs～它几乎可被非NMDA受体断阻吗CNQX;10μmol L-1 ,和NMDA受体断阻吗 APV;20μmol L-1 ,完全阻断～吗明吗上核神吗元的EPSCs主要吗谷氨酸能.在灌流的ACSF中加入20μmol L-1 的吗啡3min后～吗上核神吗元的EPSCs的吗率和幅度都下降;Fig1,. 　　EPSCs的吗率明吗下降;0.01配吗t吗吗～n=13,～平均下降;65?13,%EPSCs的幅度降低;0.05配吗t吗吗～n=13,～平均减少;44?11,%;Fig2,～吗的作用啡冲具有洗效吗～且可被naloxone阻断. 　　2.2 吗吗吗上核神吗元啡mEPSCs的影 在灌流的响ACSF中加入1μmol L-1 的TTX和30μmol L-1 的bicuculline～采用全吗胞膜片 吗吗吗吗吗吗方式;吗制吗位吗-60mV,吗吗吗上核神吗元的mEPSCs.20μmol L -1 的吗可使啡mEPSCs的吗率下降～而幅度改吗不明吗;Fig3,. 　　吗2 , 吗3 略 　 　　吗作用后啡mEPSCs的吗率下降;0.05配吗t吗吗～n=15,～平均下降;45?12,%～而幅度减小不明吗;P>0.05配吗t吗吗～n=15,～平均小减;12?5,%;Fig4,. 　　3 吗吗 　　本吗吗表明～吗可少吗上核神吗元啡减EPSCs的吗率降并低其幅度～吗既啡减触概数可能是由于吗少突前吗吗性吗吗的吗放率或;和,吗放的量子目～也可能由于突后膜吗吗吗吗吗的触敏感性降低.吗一步的吗吗解吗了吗吗吗个～加入TTX阻断神吗元的吗作吗位～吗吗mEPSCs～吗啡只降低mEPSCs的吗率～而不改吗其幅度～吗明吗啡减触只是少了吗上核神吗元突前吗吗性吗吗吗放的位点和每次吗放的量子数触并目～而突后膜吗吗吗性吗吗的敏感性未改吗.吗吗作用是突前的～而触触非突后的. 文,献5,吗道全身吗用吗啡可抑制神吗垂体催吗素及加吗素的分泌.吗可能通吗抑制吗上核和室旁核内分泌大吗胞的吗活吗或使神吗垂体脱来的吗吗一吗放偶吗吗吗.吗上核神吗元含有阿片μ受和体κ受～本吗吗及其他作体啡者的吗吗吗吗～吗直接作用于μ受 体极引起吗上核神吗元超化及放吗吗率下降,6, .神吗垂体内的神吗分泌 末稍上的κ受吗吗吗合～可抑制催吗素及加吗素的吗放,体与啡7, .本吗吗 中的吗的突前作用以上文中的突后作用啡触与献触并冲不突～相反吗 明吗在吗吗吗上核大吗胞分泌活吗的作用位啡内点的多吗性.吗吗果个与Onaka 等,8, 吗道的吗可通吗突前机制抑制啡触CCK吗吗的去甲吗上腺素在吗 上核的吗放相吻合.在中央灰吗和海吗～吗啡触断亦能通吗突前机制阻其 突吗吗,触9～10, ～吗吗明在中神吗系吗吗通吗突前机制枢啡触断阻吗吗的吗 放有一定的普遍性. 　　吗4 略 　　外周刺激～如吸、渗透吗改吗、全吮身用CCK等都可刺激吗上核神吗 元的分泌活吗～而内枢几个且刺激中的部位亦能引起吗上核神吗元吗吗 ,11, .吗吗明吗入神吗吗吗上核神吗元的吗活吗有重要的吗控作用.吗作用于啡 吗些吗入神吗元胞上的体μ受和吗突体末稍上的κ受～少吗吗性吗吗吗体减 放的率及量概数从达子目～而吗接抑制吗上核神吗元的吗活吗～到吗控吗上 核神吗元分泌的目的内. 　　参献考文: 　　,1,Ludwig M～Callahan MF～Neumann I～Landgraf R～Morris M. Systemic osmotic stimulation increases vasopressin and oxytocin release within the supraoptic neucleus ,J,.J Neuroendocrinol～19946;4,:369-373. ,2,Landgraf R～Neumann I～Pittman QI.Septal and hippocampal release of vasopressin and oxytocin during late pregnancy and parturition in the rat ,J,.Neuroendocrinology～199154;4,:378-383. ,3, Schrader LA～Tasker JG.Presynaptic modulation by metabotropic glutamate receptors of excitatory and inhibitory synaptic inputs to hypothalamic magnocellular neurons ,J,.J Neurophysiol～199777;2,:527-536. ,4,Inenaga K～Imura H～Yanaihara N～Yamashita H.Kappa-selec-tive opioid receptor agonists leumorphin and dynorphin inhibit supraoptic neurons in rat hypothalamic slice preparations ,J,.J Neuroendocrinol～19902;3,:389-395. ,5,Pumford KM～Leng G～Russell JA.Morphine actions on supraoptic oxytocin neurones in anaesthetized rats:Tolerance after i.c.v.morphine infusion ,J,.J Physiol～1991440;8,:437-454. ,6,Russell JA～Leng G～Bicknell RJ.Opioid tolerance and depen-dence in the magnocellular oxytocin system:A physiological mechanism ,J,.Exp Physiol～199580;3,:307-340. ,7,Russell JA～Coombes JE～Leng G.Morphine tolerance and inhi-bition of oxytocin secretion by kappa-opioids acting on the rat neurohypophysis ,J,.J Physiol～1993469;9,:365-386. ,8,Onaka T～Leuckman SM～Guzman RG～Ueta Y～Kendrick K～Leng G.Presynaptic actions of morphine:blockade of cholecys-tokinin-induced noradrenaline release in the rat supraoptic nuleus ,J,.J Physiol～1995482;1,:69-79. ,9,Vaughan CW～Christie MJ.Presynaptic inhibitory action of opi-oids on synaptic transmission in the rat periaqueductal gray in vitro ,J,.J Physiol～1997498;2,:463-472. ,10,Capogna M～Gahwiler B～Thompson S.Mechanism ofμ- opiod receptor-mediated presynaptic inhibition in the rat hippocampus in vitro ,J,.J Physiol～1993470;10,:539-558. ,11,Lenaud LP～Bourque CW.Neurophysiology and neuropharma-cology of hypothalamic magnocellular neurons secreting vaso-pressin and oxytocin ,J,.Prog Neurobiol～199136;2,:131-169.