白胶香挥发油对替硝唑透皮吸收促进作用的研究

白胶香挥发油对替硝唑透皮吸收促进作用的研究 第 20 卷第 6 期 广 东 药 学 院 学 报 VOI. 20 NO. 6 2004 年 12 月 ACADEMIC JOURNAL OF GUANGDONG COLLEGE OF PHARMAC Dec. 2004白胶香挥发油对替硝唑透皮吸收促进作用的研究徐贵丽 尚北城 赵益斌 陈 翔 恽 渊 唐雪梅( 成都军区昆明总医院 云南 昆明 650032)摘 要 目的 研究白胶香对替硝唑的促透效果，为透皮促进剂的选择提供参考。方法 通过离体家兔皮肤渗透释药实验，测定含不同浓度白胶香和氮酮对替硝唑溶液的促透效果。结果 不同浓度促透剂对替硝唑的透皮吸收促进效果大小顺序为 5白胶香 gt 4 白胶香 gt 4 氮酮。结论 5 白胶香对替硝唑溶液有显著的透皮促进作用，与其他浓度的白胶香和氮酮相比具有 (显著差异 P lt 0. 05)。关键词 白胶香;氮酮;透皮促进剂;透皮吸收中图号 R 944 文章编号: ( 1006 - 8783 2004) - 0617 - 02 06 文献标识码:A ( 白胶香为金缕梅科植物枫香 Liguidambar tai- mL，振摇使溶解，沿管壁加硫酸 2 mL，两液接界处显waniana Hance)的干燥树脂。白胶香含有丰富的丹 红色环。宁类、三萜类及挥发油成分，还含有黄酮等其他成 2. 1. 3 取白胶香 0. 2 g，加四氯化碳 5 mL，振摇使分，具有抗血栓、保肝及抗肿瘤等活性。有文献报 成混悬液，加硝酸 3 mL，轻轻摇匀，待分层，上层液 〔1〕道 白胶香的挥发油中主要成分枫香油具有促透 显淡红色或红橙色。作用，但未见深入研究。白胶香在云南产量丰富，民 2. 2 白胶香挥发油的提取间常用白胶香与其他药材共同用于美容;为进一步 取白胶香用水蒸气蒸馏法提取，再将蒸馏出的证实白胶香的透皮促进作用，本试验采用自制透皮 混合液用相同量的乙醚提取 3 次，把提取出的乙醚扩散装置，以离体家兔腹部皮肤为透皮屏障，用生理 液在 40 C 水浴锅中冷凝回收，即得白胶香挥发油。盐水做接收液，以替硝唑(TNZ)为模型药物，用白胶 2. 3 工作曲线的制备香挥发油与常用促透剂氮酮对 TNZ 的透皮吸收作 精密称取干燥至恒重的 TNZ 25 mg 于 250 mL用进行比较，以考察白胶香挥发油作为透皮促进剂 容量瓶中，加生理盐水溶解并稀释至刻度，摇匀。分的开发应用价值。 别取 0. 5、 0、 0、 0、 0、 0 mL 于 10 mL 容量 1. 2. 3. 4. 5. 瓶中， 于 用生理盐水稀释至刻度， 317 nm 波长处分1 仪器与材料 别测定吸收值，以吸收度 A 对浓度 C 进行线性回 ( ; 透皮扩散装置 自制) UV-2201 紫外分光光度 归，得标准曲线方程为: 52. 6765C 0. 2552 r A ( ( ; (计 日本岛津) DK-98-1 型恒温水浴锅 天津市泰斯 0. 9999， 6) n 。 ; (特仪器有限公司) 实验用家兔 昆明生物药厂，合 2. 4 含不同浓度的枫香油和 AZ 的 TNZ 溶液的制备格证号为滇动字: ; ( 2002066 号) 白胶香 在云南丽江 将适量的 TNZ 溶于适量的 75 的乙醇中，采集，由中国科学院昆明植物所左国营博士鉴定); 每组分别制成 2 个样品，分别含不同浓度的枫香油 (替硝唑原料及对照品 中 日 合 资 大 连 光 彩 制 药 公 和 AZ 的 TNZ 溶液 ， (10 mg / mL) 见表 1。 ; (司) 氮酮 AzOne， ( 山东梁山亨尼化工实业有限 AZ) 表1 不同浓度枫香油和 AZ 的编号 ，公司) 其余试剂均用分析纯。 Tab. 1 The serial number of samples in different concen- trations2 实验方法 NO. 1 2 3 4 5 6 7 8 〔2〕2. 1 白胶香的理化鉴别 resin / 0. 0 0. 2 0. 5 1. 0 2. 0 3. 0 4. 0 5. 02. 1. 1 取白胶香少量，燃烧，有多烟火焰，具有特异 AZ / 0. 0 0. 2 0. 5 1. 0 2. 0 3. 0 4. 0 5. 0香气。 2. 5 离体皮肤的制备2. 1. 2 取白胶香 50 mg，置于试管中，加四氯化碳 5 取体重为(2. 5 1 0. 2) 的实验用家兔， kg 腹部皮作者简介:徐贵丽， 42 岁， 女， 主任药师，硕士生导师。 肤用脱毛剂 quot 0. 8 硫化钠溶液) ( 脱毛，温水洗净研究方向: 天然药物制剂学及药效学研究。 皮肤表面。饲养 2 1 后，选取皮肤表面目测无破 损 617 ( 广东药学院学报 ACA J GCP) 2004，( 6) 20 的实验用家兔处死取 皮，去除皮下脂肪、组织，用蒸 长处测定吸收度，用相应对照品的透皮接收液作为 馏水反复洗涤，再用生理盐水漂洗，放置于生理盐水 空白。 中冷藏。2. 6 〔3 实 验方法 - 5〕 3 结果 ( 将兔皮固定于自制透皮装置 管径 2. 3 cm，面 3. 1 不同 时间各种 TNZ 溶液的累积透皮吸收量 积 4. 15 cm2 ) 部， 质 层 向 上 面 对 释 放 液 1. 0 下 角 ( 将每次测得的吸收度值通过 TNZ 标准曲线的 ， mL) 接 收池中以生理盐水为接收液 ， (15. 0 mL) 并 线性回归方程计算浓度，根据公 式: 保持释放液和接收液的液面持平。将透皮装置置于 H -1 N CI?V?10 V0 ? CI - 1 恒温水浴上，保持温度(37. 0 1 0. 5)C 。分别于 2、 ( 计算累积透皮吸收量 N CI: 时刻的计算浓度值; I V:4、 8、 12、 h 从侧管中取样 1. 0 mL， 6、 10、 24 置于 10. 0 V 每次取样体积) 结果见表 2。 接收液总体积; 0 : ， mL 容 量瓶中， 于 用生理盐水稀释至刻度， 317 nm 波 表2 不同时间各种 TNZ 溶液的 累积透皮吸收量 mg / cm2 ， i quot， 3) ( Tab. 2 The accumulated penetration absorbed dose of TNZ solution with different concentrations in different time 编号 组别 2h 4h 6h 8h 10h 12h 24h 1号 对照组 0. 123 1 0. 006 0. 225 1 0. 006 0. 519 1 0. 003 0. 861 1 0. 002 0. 902 1 0. 003 0. 989 1 0. 002 1. 013 1 0. 002 2 号 0. 2 白胶香 0. 447 1 0. 003 0. 642 1 0. 002 0. 751 1 0. 003 0. 828 1 0. 004 0. 965 1 0. 003 1. 066 1 0. 004 1. 444 1 0. 004 0. 2 氮酮 0. 213 1 0. 006 0. 510 1 0. 008 0. 716 1 0. 009 0. 796 1 0. 002 0. 928 1 0. 006 0. 995 1 0. 001 1. 116 1 0. 003 3 号 0. 5 白胶香 0. 704 1 0. 002 0. 963 1 0. 003 1. 115 1 0. 006 1. 239 1 0. 003 1. 338 1 0. 004 1. 452 1 0. 004 1. 816 1 0. 003 0. 5 氮 酮 0. 517 1 0. 005 0. 802 1 0. 002 0. 911 1 0. 004 1. 024 1 0. 002 1. 228 1 0. 003 1. 340 1 0. 002 1. 401 1 0. 005 4 号 1 白胶香 1. 249 1 0. 002 1. 417 1 0. 004 1. 643 1 0. 003 1. 801 1 0. 004 1. 919 1 0. 003 2. 022 1 0. 004 2. 397 1 0. 002 1 氮酮 0. 562 1 0. 006 0. 921 1 0. 006 1. 223 1 0. 002 1. 462 1 0. 001 1. 533 1 0. 004 1. 725 1 0. 004 1. 878 1 0. 008 5 号 2 白胶香 1. 426 1 0. 003 1. 669 1 0. 004 1. 817 1 0. 003 1. 928 1 0. 003 2. 445 1 0. 003 2. 545 1 0. 004 2. 914 1 0. 004 2 氮酮 1. 264 1 0. 008 1. 503 1 0. 008 1. 677 1 0. 002 1. 777 1 0. 001 1. 961 1 0. 006 2. 239 1 0. 003 2. 513 1 0. 002 6 号 3 白胶 香 0. 730 1 0. 004 0. 877 1 0. 006 1. 033 1 0. 004 1. 098 1 0. 004 1. 268 1 0. 003 1. 368 1 0. 003 1. 721 1 0. 003 3 氮酮 1. 307 1 0. 006 1. 642 1 0. 002 1. 802 1 0. 001 1. 922 1 0. 004 2. 102 1 0. 007 2. 315 1 0. 004 2. 489 1 0. 002 7 号 4 白胶香 1. 568 1 0. 003 1. 769 1 0. 004 1. 900 1 0. 004 2. 061 1 0. 004 2. 501 1 0. 002 2. 557 1 0. 002 2. 931 1 0. 003 4 氮酮 1. 566 1 0. 003 1. 757 1 0. 005 1. 897 1 0. 002 1. 999 1 0. 005 2. 493 1 0. 004 2. 554 1 0. 001 2. 902 1 0. 007 8 号 5 白胶香 2. 162 1 0. 002 2. 622 1 0. 003 3. 126 1 0. 004 3. 300 1 0. 004 3. 631 1 0. 006 3. 708 1 0. 004 4. 052 1 0. 003 5 氮酮 1. 465 1 0. 005 1. 704 1 0. 002 1. 833 1 0. 004 1. 974 1 0. 005 2. 349 1 0. 003 2. 405 1 0. 006 2. 676 1 0. 0013. 2 运用 I 检验对数据进行统计分析， 得到以下结 ( 验样本 均有显著差异 P lt 0. 05)。 论。 3. 2. 6 2 白胶香的促透作用强于 3 白胶香，说3. 2. 1 不同浓度的白胶香和氮酮对替硝唑溶液都 明浓度与作用强度并不完全呈现正 相关。 有不同程度的透皮促进作用。 3. 2. 7 实验结果表明，对替硝唑溶液透皮促 进效果3. 2. 2 当白胶香浓度 gt 1 时， 促透效果与无促透 最好的是 4 白胶香、 白 胶香、 氮酮， 5 4 他们之 ( ， 剂的对照组有显著差异 P lt 0. 05) 其中效果最 佳 间促透的大小顺序为 5 白胶香 gt 4 白胶香 gt 4的为 4 、 白胶香组; 、 白胶香组与其他白 5 4 5 氮酮。对于白胶香和氮酮总体促透效果比较，两者 (胶香浓度组相比均有显著差异 P lt 0. 05) 。 无显著差异。3. 2. 3 在氮酮浓度组中， 、 、 、 氮酮与 2 3 4 5 (无促进剂的对照组相比有显著差异 P lt 0. 05) 其， 4 讨论 中只有 4 氮酮相对于其他氮酮浓度组有显著差异 ( 药物透皮治疗体系 TTS)具有避免首过效应，( P lt 0. 05)。 用药方便，疗效持久，副作用轻微等特点，是一种极3. 2. 4 对于同浓度的白胶香和氮酮间进行比较， 有前途的剂型。但因皮肤的屏障作用，加上药物本5 白胶香组促透效果显著优于同浓度的氮酮组 P ( 身的理化性质等原因，使一般药物经皮肤的通透率 ; lt 0. 05) 而 3 氮酮则显著比 3 白胶香促透效果 都很低，不能达到治疗浓度。 ( 好 P lt 0. 05) 。 ( 下转第 622 页)3. 2. 5 促透效果最好的 5 的白胶香对于所有实 618 ( 广东药学院学报 ACAD J GCP) 2004，( 6) 202. 3 干扰试验 液外加内毒素回收率均在 50 200 内，表明日 〔2〕2. 3. 1 ( 最大有效稀释倍数 MVD)计算 按公式 常其内毒素含量可用 12 倍稀释液。 其 MVD LC / ， 中 0. 01 EU / mL， 3. 0 EU / L 2. 4 定量检测与热原检查 定量检测样品和操作 mL， 1. 0 mL / mL， C 计算得 MVD 为 300。 同上述正式干扰试验，并以上述正式干扰试验样品2. 3. 2 干扰预试验 将供试品用 BET 水依次稀释 进行热原检查。结果见表 3。 为 6、 24 倍， 12、 记为 A 液，同时另取 3 管配制含内毒 表3 鱼腥草注射液正式干扰试验及热原检查结果 素为 0. 5 EU / mL 的同样稀释倍数的样品阳性管，记 Tab. 3 Interference test and pyrogen examination 为 B 液，分别取 A、 液 0. 2 mL 各加入 0. 1 mL 定量 B results of Herbe Houtuyniae injection 用鲎试剂于反应管中，混合均匀，插入仪器检测，其 样品 A 液内毒素 B 液内毒素 回收率 热原检 批号 ( EU / mL) ( EU / mL) ( ) 查结果 / / / 中每个浓度 3 支，计算平均回收率。结果见表 2。 阴性对照 lt 0. 01 表2 ( 鱼腥草注射液干扰预试验 批号 011203) 阳性对照 0. 5309 Tab. 2 Interference pretest of Herbe Houtuyniae injection 011203 0. 108 0. 6174 96. 0 合格 A 液内毒素 B 液内毒素 回收率 011010 lt 0. 01 0. 5437 102. 4 合格 稀释倍数 ( EU / mL) ( EU / mL) / / ( ) / 030513 lt 0. 01 0. 6513 122. 7 合格 阴性对照 lt 0. 01 011202 lt 0. 01 0. 6954 131. 0 合格 阳性对照 0. 4505 030703 lt 0. 01 0. 7433 140. 0 合格 6 lt 0. 01 0. 3239 71. 9 12 lt 0. 01 0. 4875 108. 2 3 讨论 24 lt 0. 01 0. 6451 143. 2 由表 2 结果可见，鱼腥草注射液 6、 24 倍稀 12、 3. 1 从表 2 结果可知， 12、 倍稀释液外加内毒 6、 24 释液外加内毒素回收率均在有效范围 50 200 素回 收 率 均 在 50 200 内， 倍 的 最 接 近 .