血液分析仪及其临床应用

血液分析仪及其临床应用 广州医学院附属第二医院 吴晓蔓 功能特点：1.多参数分析；2.精确度高；3.操作简易速度快；4.标本用血量少；5.自动打印结果；6.具备质量控制功能；7.设置清洗功能；8.报警功能；9.筛选功能 一、原理 (一)细胞计数及体积测定原理 1. 阻抗型：血细胞通过→电阻变化→电脉冲信号 Coulter原理：血细胞是相对不良导体，当其悬浮于电解质溶液中通过检测微孔时，会改变微孔内外原来的恒定电阻，产生电脉冲。脉冲的大小：细胞体积；脉冲的数量：细胞数量 1.原理及组成 （1）检测原理： 基本结构：讯号发生器、放大器、甄别器、阈值调节器、检测计数系统、自动控制保保护系统和电源。 血细胞直方图： 血液分析仪在测定红细胞、白细胞和血小板的多种数据的同时，把它们体积的大小（横轴）、出现的相对频率（纵轴）以坐标曲线图示出来，形成血细胞体积分布直方图。 2.流式细胞术加光学检测原理：单个细胞通过检测区；前向散射光 （二）白细胞分类原理 1.电阻抗法白细胞直方图：两个明显分离的峰：左峰：小细胞群（淋巴细胞：35-90fl）,两峰之间：中间细胞群（中间细胞：90-160fl）的分布。右峰：大细胞群（粒细胞：160-450fl） 2 容量、电导、光散射白细胞分类法（VCS） 体积（volume）：电阻抗原理； 电导性（conductivity）：采用高频电磁探针测量细胞内部结构—细胞核、细胞质的比例、细胞内的化学成份； 光散射（scantter）：特别具有对细胞颗粒的构造和颗粒质量的区别能力，细胞粗颗粒的光散射要比细颗粒强。 3 阻抗与射频法 通过四个不同检测系统完成： （1）嗜酸性粒细胞检测系统：特殊的pH的溶血剂溶解或萎缩除嗜酸性粒细胞以外的所有细胞。 （2）嗜碱性粒细胞检测系统： （3）淋巴、单核、粒细胞的检测系统： 采用电阻抗与射频联合检测的方式。 电阻抗(DC) :细胞大小 射频(RF):核的大小及颗粒的多少。 两个不同的脉冲信号，以DC信号为横坐标，RF为纵坐标，把同一个细胞定位于二维的细胞散射图上。 (4）幼稚细胞检测系统： 原理：幼稚细胞膜上脂质较少。加入硫化氨基酸后，结合在幼稚细胞的硫化氨基酸较成熟细胞多，且对溶血剂有抵抗作用。当加入溶血剂后，成熟细胞被溶解，幼稚细胞不受破坏。 4.激光与细胞化学法(SCC) 1）过氧化物酶检测通道 Eos--很强的过氧化物酶活性；Neu--较强的过氧化物酶活性；Mon--较弱的过氧化物酶活性；Lym,Bas--无此酶 由于酶反应强度不同，以X轴为吸光率标记（酶反应强度），Y轴为光散射（细胞大小）。每个细胞产生的两个信号结合定位在细胞图上。 2）嗜碱性粒细胞/分叶核检测通道 5. 多角度偏振光散射法术 四个角度测定散射光的密度： ①0°：前角光散射粗略地测定细胞大小； ②10°：狭角光散射测细胞结构及其复杂性； ③90°：垂直光散射主要对细胞内部颗粒和细胞成份进行测量； ④90°：90°消偏振光散射（70°～110°） 从这四个角度同时对每个白细胞进行测量，将白细胞分为嗜酸粒细胞、中性粒细胞、嗜碱性粒细胞、淋巴细胞和单核细胞5种。 （三）红细胞测定原理 1.RBC.Hct：电阻抗法 2.Hb:比色法：HiCN SLS-Hb 3.MCV,MCH,MCHC,RDW：推算 （四）Plt测定原理 血小板体积分布直方图 2-20fl之间。21-30fl之间有少量大血小板，一般仪器以30fl为最大的分析界标。 （五）网织红细胞计数原理 （六）工作 以国内使用较多一种为例：该仪器配有二个小孔管，三个测试系统。 二 、血液分析仪的类型 全自动和半自动分析仪的区别： --血液在机外是否需要预稀释 半自动分析仪：需事先稀释；全自动分析仪：机内自动稀释 四、临床应用 （一）检测参数临床意义 1.红细胞参数 （1）MCV和RDW 红细胞体积分布宽度临床意义（red cell volume distribution width RDW） RDW为反映红细胞体积异质性的参数，表示方法为红细胞体积大小的变异系数（CV%）。增大时有临床意义。 1）鉴别缺铁性贫血和B-珠蛋白合成障碍性贫血： MCV RDW 缺铁性贫血 ↓ 　↑ B-珠蛋白合成障碍性贫血　↓　＿ 2)用于缺铁性贫血的诊断与疗效观察： 缺铁性贫血RDW增大；铁剂治疗有效时，RDW比给药前更大，以后逐渐降至正常水平。 原因:补铁后产生网织红细胞，及正常红细胞生成并释放入血与给药前的小红细胞并存，故RDW先增大，随着正常红细胞的增多和小红细胞的减少，RDW便逐渐降至参考范围 3)用于贫血的分类： MCV只能反映红细胞平均体积的大小，不能代表红细胞体积大小的异质性；RDW能较好地反映红细胞体积的异质性；MCV和RDW结合用于对贫血的分类将更为完善。 2　血小板参数 MPV的临床意义(结合PLT变化) 1)PLT与MPV ①骨髓造血功能损伤，MPV减少；②血小板破坏增多，MPV增大；③血小板分布异常，MPV正常。 2)MPV增大可作为骨髓造血功能恢复的较早期指征： 骨髓造血功能衰竭时，MPV与PLT同时持续下降；造血功能抑制越严重，MPV越小；当造血功能恢复时，MPV增大常先于PLT升高。 3）其他方面应用： ①MPV增大：见于骨髓纤维化、原发性血小板减少性紫瘢（ITP）、血栓性疾病及血栓前状态、脾切除、慢粒、巨大血小板综合征、镰刀细胞性贫血等。 ②MPV减小：见于脾亢、化疗后、再障、巨幼细胞性贫血等。 （二）红细胞直方图在贫血中应用 可鉴别贫血类型 1.小细胞性贫血 轻型β—血红蛋白合成障碍；缺铁性贫血；铁粒幼细胞性贫血 轻型β—血红蛋白合成障碍（轻型β—珠蛋白生成障碍性贫血）：峰左移，峰底变窄，典型的小细胞均一性贫血。 缺铁性贫血治疗前：波峰左移，峰底变宽，显示小细胞不均一性。 缺铁性贫血治疗后：双峰形 铁粒幼细胞性贫血：呈典型的“双峰形”性改变。在缺铁性贫血经治疗有效时，也可出现类似的图形，但峰底要更宽些。 叶酸缺乏引起的巨幼细胞性贫血治疗前--波峰右移，峰底增宽，显示明显的大细胞不均一性 叶酸缺乏引起的巨幼细胞性贫血治疗后--双峰形。 （三）血小板直方图的临床应用 2-20fl之间。21-30fl之间有少量大血小板，一般仪器以30fl为最大的分析界标。 血小板体积增大:明显的拖尾现象。小红细胞或红细胞碎片干扰:尾部抬高。 （四）白细胞直方图的临床应用 估计血液群体的变化,但无特异性 末梢血淋巴细胞增多，急淋，急非淋白血病:中间细胞明显增高，直方图上只见一个峰，无法分辨，必须推片染色检查. 反映某些人为或病理变化干扰，如有核RBC或大血小板出现。 白血病 中性粒细胞减少症