重组人表皮细胞生长因子对供皮区创面的修复

重组人表皮细胞生长因子对供皮区创面的修复 重组人表皮细胞生长因子对供皮区创面的 修复 中国组织工程研究与临床埭复莉74孝碧52010—01—29出版 JournalofClinicalRehabilitativeTissueEng~eeringResearchJanuary29,2010VoL14,No. 5 重组人表皮细胞生长因子对供皮区创面的修复? 郭杏',美云,郭',熊灭,李越们,倒晓J Reparationofskindonorsitewoundusingrecombinanthumanepidermalgrowthfactor GuoXing', TanMei—yun,GuoLi', XiongAi.bing', LiYue.gang,HeXiao.chuan Abstract .DepartmentofBurns andPlasticSurgery, Departmentof Orthopaedios, AffilialedHospitalof LuzhouMedical College,Luzhou 646o00.Sichuan Province,China GuoXing?.Master, Attendingphysician, DepartmentofBurns andPlasticSurgery, Ailia1edHospitalof LuzhouMedicaI College,Luzhou 646000,Sichuan Province.China ax412@126com Correspondenceto: TanMei-yun,Doctor Attendingphysician, Departmentof Orthopaedics, AffiliatedHospitalof LuzhouMedical College.Luzhou 6460oO.Sichuan Province.China Received:2009-07—18 Accepted:2009-08-17 862 8ACKGROUND:Thetraditionaltreatmentforskindonorsitewoundwasfocusonanti-infectionandwoundprotection.whichtook alongtimeforhealing.StudiesdemonstratedIhatrecombinanthumanepidermalgrowthfactor(rhEGF)hasacceleratedeffecton epidermalregeneration. OBJECTIVE:ToobservetheeffectofrhEGFonwoundhealingofskindonorsite. METHODS:AtotaIof32casesneedswoundhealingbyskingraftingwerecollected.including18malesand14females.Tha32 skingraftdonorsitewoundswererandomlydividedintocontrolandtreatmentgroups.Inthetreatmentgroup.theabsorbent gauzewasspnnklesoakedwithrhEGF(15mIJramus,2000IU/mL)andcoveredthedonorsite ,twiceperday.Inthecontrel group,donorsitewascoveredbyphysiologicalsalinegauzeandwrappedwithdressing,twiceperday.After48houm. semi-exposedtherapywasperformed.Thehealingtimeofwounds.thesystemicandlocaladversereactionsofPatientsand bloodroutineexaminationandrenaIfunctiondetectionpriortoandaftertreatmentwereobserved. RESULTSANDCONCLUSION:ThehealingtimeofwoundintherhEGFtreatmentgroupwasshoderthanthatinthecOnlrOI groupwithsignificantdifferences(P<0.01).NoAdverseeventsorsideeffectswereobservedintherhEGFtreatmentgroup. rhEGFcansho~enwoundhealingtime,reducescarhyperplasia,andaccelerateepithelizationatthegraftdonor. GuoX,TanMY,GuoL,XiongAB,LiYG,HeXC.Reparationofskindonorsitewoundusingrecombinanthumanepidermalgrowth factor.ZhongguoZuzhiGongchengYanjiuyuLinchuangKangfu.2010;14(5):862-865. [://en.zglckf.com】 摘要 背景:传统的供皮区创面修复以抗感染,支持及保护创面为主,最终为自然愈合,时 间较长.研究表明,重组表皮生长因子 促进皮肤切割,烧伤等动物模型创面的愈合,加速表皮再生的速度. 目的:验证重组表皮生长因子对供皮区创面的修复效果. 方法:选择泸州医学院附属医院整形烧伤科需要自体植皮修复创面的患者共32例, 男18例,女14例.将32处新鲜供皮 区创面随机均分为对照组和治疗组.治疗组将重组表皮生长因子药液(15mL/ 支,2000IU/mL)直接喷洒于单层内敷纱布上 直至浸透,然后覆盖到供皮区,2次/d;对照组将单层生理盐水纱布覆盖供皮区,外加 敷料包扎,2次/d.48h后,采用半 暴露疗法.主要观察从治疗开始至供皮区完全愈合所需要的时间,不良事件及副反 应,治疗前,后血常规及肝肾功能检测. 结果与结论:在重组表皮生长因子喷洒组较生理盐水喷洒组明显缩短创面愈合时间,两组间比较具有显着差异(<0.01). 重组表皮生长因子喷洒组未见明显的不良事件及副反应发生.提示经重组人表皮细胞生长因子处理后,能明显缩短创面的愈 合时间,减少了瘢痕的过度增生,在加速创面愈合及再上皮化中具有显着的促进作用. 关键词:重组人表皮细胞生长因子;供皮区创面;创面修复;组织移植;不良反应 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2010.05.024 郭杏,谭美云,郭力,熊爱兵,李越钢,何晓川.重组人表皮细胞生长因子对供皮区创面的修复[J].中国组织工程研究与临 床康复,2010,14(5):862—865【http:llwww.crter.org】 P0Box1200,Shenyang110004cn.zglckf,com 郭杏等重组A表&缅豫生长因子对擞『支白翻的磅复跫霞,c孤丐 0引言 皮肤缺失或皮肤损伤住创伤外科和烧伤 整形外科最为常见,及时有效地创面修复往 往是治疗成败的关键. 目前,人们已采用同种异体皮,异种皮 以及其它组织工程皮肤米覆盖创面1-ZJ,但由 于免疫排斥,传播疾等许多缺陷使其用 受到一一定的限制,常常被作为一种暂时性创 面覆盖物,并不能解决根本问题.因此,白 体皮肤移植仍然是临床I修复皮肤缺失或者 缺损的最常用的手段. 自体植皮手术最大的缺点就足取皮后遗 留的供皮区给患菁增加了新的创伤,而日.中 厚J支供皮区术后常常伴发感染,瘢痕增牛, 甚至创面不愈合等并发症.而临床I矢生往往 只重视受皮区创面的愈合情况,而忽略了供 皮区创面的修复问题. 传统的处理方法足在供J支区创面使用消毒 凡士林纱布加敷料包扎或半暴露待其自然愈 合.随着分子生物学技术的不断发展,种生 长因子在创伤修复中的作用己被逐渐认识.细 胞牛长凶子足一类能刺激靶细胞,促进分裂增 殖和各种损伤组织修复,增』Ju细胞外基质合成, 在创伤和大面积烧伤创面的修复中起重要作川f 的生物活性多肽】.目前,利用摹冈重组技术 人工合成的重组人衣皮细胞牛长凶 (recombinanthumanepidermalgrowth factor,rhEGF)成为促进创面修复的重要牛长 因予之一L4】.实验将探~rhEGFX,J'供皮创面 的愈合作用. 1和方法 :随机对照观察. 时间及地点:实验于2006—02/2008—12存 泸州医学院附属医院完成. 材料:选择同期泸州医学院附医院整 形烧伤科需要自体植J支修复创面的患者Uj32 例,年龄15,58岁,平均(36.2+-4.5)岁,另18 例,女14例.所有患者术前营养状况良好, 均不伴有糖尿痫. 供皮区部位:单侧大腿前外侧,均为鼓式 取皮机所取的中厚皮. 供皮区面积:约10cmx20cm. 分组:将32处新鲜供J支区创面随机均分为 |ssN1673-8225cN21—153RCODEN:ZLKHAH 两组:埘照绀和治疗绀.根据国务院《医疗 机构管理条例》规定[10】,患者刘'治疗知情同 意. 药品:重人表皮细胞牛K因子(商品名: 金冈肽),由圳牛元基因工程发展有限公 司提供. 方法:由同一人川鼓式取皮机耿巾厚J支, 创面局部压迫木见明显出血后:治疗组将 rhEGF药液(15mL-/支,2000IU/mL,喷雾型) 直接喷洒丁单层内敷纱布上直至浸透,然后覆 盖到供皮,外加敷料包扎,2次/d;对照组将 层牛理盐水纱布覆盖供J支区,外JJu敷料包扎, 2次/d.48h后,供坡区除外层敷料采用半暴 露疗法. 治疗,后进行血常规及肝肾功能检奇符1 次.供皮区完全愈合的为创面完全上皮化, 均由同一人评估. 主要观察指标:?从治疗开始供皮区 完全愈合所需要的时问.?身和创面局部 的副反应.?治疗前,后进行血常及肝肾 功能. 设计,实施,评估者:实验设计为第一作 和通讯作肯,T预实验为全部作者,评估为 第作者. 统计学:采刚X+-s表示,由第'作者用 计算机统计软件SPSS13.0进行统汁分析,统 计t方'法为独立样本f检验,P<0.05为差异有显 着l}牛意义. 2结果 2.1参与者数量分析实验纳入者32例(供 皮区创曲32处),分为2组,伞部进入结果分析. 按意向性处理分析. 2.2两组基线资料比较见表1. 表1两组摹线资料比较 Table1ComparisonOfbaselinedataintwo groups GrouprfMale/femaleAge(yr) Trealmenl168/836~5 Control16101637?4 GroupnDonorsiteArea(cm.) Treatment16Anterolateralthigh10x20 Control16Anterolateralthigh10x20 两组比较,性别年龄差异尢显着性意义. 2.3愈合时间治疗组愈合时『日J为(13.50+- .泸州医学院附属 医院整形烧伤外 科,四川省泸州市 646000;泸州医 学院附属医院骨 科,四川省泸州 646000 郭杏?,女 1977出生,四J1l 省宜宾市人,汉 族,1999年泸州 医学院毕业,硕 士.主治医师,主 要从事烧伤感染 和创面修复基础 与临床研究. gx412@126.com 通讯作者:谭美 云,博士,主治医 师,泸州医学院附 属医院骨科,四川 省泸州市 646000 中分娄号:R318 之献标识码:B 文章编号:1673—8225 (2010)05—00862-04 收稿日期:2009.07—18 修回日期:2009-08-17 (20090618009/W'z) 短厉一c一.凹孰杏.等重组人表皮级匏生长因子对供皮区劬面的修复 1.15)d,对照组愈合时间为(18.12+1.36)d,两组间比 较差异具有非常显着性意义(尸<0.01),见图1. 2.4不良反应治疗期间未发现全身不适及中毒症 状,创面未见感染,局部亦无过敏和过度增牛现象. rhEGF药液喷洒时有2例出现一过性剌痛.对照组有1例 术后5d出现局部积液,给予引流,引流液常规细菌 学检查,结果提示阴性. 2.5实验室检查结果肝肾功能和血常规检查住治疗 前后均未发现异常. 3讨论 重组人表皮细胞生长因子是促进创面修复的重要 基因工程药物之,一.表皮生长因子(EGF)是2O世纪60年 代发现的由53个氨基酸残基构成的单链多肽,与细胞表 面的表皮生长因子受体结合形成复合物,通过细胞内移 行,酪氦酸磷酸化,cAMP与cGMP的介导而发挥作用. 其主要作用机制包括:表皮细胞生长因了作为一个强有 力的趋化因了,能促进角质形成细胞,成纤维细胞和血 管内皮细胞等向受伤部位迁移;表皮细胞生长因予作为 有丝分裂原,可促进角质形成细胞,成纤维细胞和血管 内皮细胞等的增殖;表皮细胞生长因予能促进细胞外基 质(ECM)的分泌;表皮细胞生长因子与创面残存表皮T 细胞受体结合,诱导表皮干细胞增殖与分化[3,11-12】.利 用基因重组技术人工合成的重组人表皮细胞生长因子 具有与天然产物一一样的活性,能促进细胞增殖分化和组 织再生. 大量动物实验和临床应用均证实重组人表皮细胞 生长因子能有效地促进溃疡,烧伤,吸入性损伤等创面 的愈合【118].创面修复是…'个极其复杂的病理生理过 程,包括炎症反应,肉芽组织增生和再上皮化等主要过 程,且多种细胞生长因子参与其中19]o内源性表皮细胞生 长因子在受创组织修复中起到重要作用,但在创面局 部含量较低,为加快创面的愈合需要补充一定量的外源 性重组人表皮细胞生长因子. 实验结果表明,对取中厚皮后的供皮区创面,经外 源性重组人表皮细胞生长因子处理后,能明显缩短创面 的愈合时间,减少了局部组织的过度增生或者瘢痕肥 大,在加速创面愈合及再上皮化中具有显着的促进作 用.在药物的使用过程中并未发现全身不适及中毒症 状,创面局部亦无过敏和过度增生现象,仅有2例出现 一 过性刺痛,而且肝肾功能和血常规检查在治疗前后均 未发现异常,说明其临床应用安全性较高.因此实验证 明重组人表皮细胞生长因子列'供皮区创面的主动修复 具有较好的临床运用价值. 4参考文献 【1】ChengC,WangZJ.ZuzhiGongchengyuChongjiangWaike Zazhi2008,4(3):171.173 陈灿,王志军.皮肤组织工程研究的新进展[J].组织工程与重建外科 杂志,2008,4(3):171-173. 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PO,Box1200,Shenyan.. q110004cnzglckf,com 嚣杏等荤组久表受缅匏生长因f对供瘦区勃面的修复www.CRTER.org 【16] 【17】 YangCB.LiangLH,Xiaoeta1.ZhonghuaSunshangheXiufu Zazhi:Dianziban.2007:2(3):157—159. 阳纯兵,梁履华,肖勇,等.表皮细胞生长因子在吸人性损伤创面 修复中的促进作用[J].中华损伤和修复杂志:电子舨,2007, 2(3):157-159. MiuSK'PengB,YangYX.eta1.SichuanShengliKexueZazhi. 2007;29(31:107—108. 缪世坤,彭波,杨云霞,等.重组人表皮生长因子对大鼠皮肤烧伤 愈合的促进作用[J].四川生理科学l杂志,2007,29(3):107-1O8. 【18】 [19】 【20】 LeiHM.ZhongguoXiankaiYaowuYingyong.2008;2(16):81-82. 雷会民.上皮生长因子治疗烧伤后残余小面积创面56例疗效观察[J]. 中国现代药物应用,2008,2(16):81—82. HuntTK,HopfH,HussainZ.Physiologyofwoundhealing.Adv SkinWoundCare,2000;13(suppl21:6-11. 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Youwillseethatouroriginalfindingsare confirmed. 5我们附上依照审稿专家的意见修改的 原稿,其中修改部分用红色划线标注.Weare sendingtherevisedmanuscriptaccordingto thecommentsofthereviewers.Revised portionareunderlinedinred. 6.外审专家的意见对我们很有帮助,我们 已经按照这些意见对原稿做了修改.Wefound thereferee'scommentsmosthelpfuland haverevisedthemanuscript 7.很高兴得知审稿专家对文章的好评we arepleasedtonotethefavorablecomments ofreviewersintheiropeningsentence. 8.感谢你的来信.我很高兴稿件经修改后 可在XXX杂志发表.Thankyouforyourletter.I amverypleasedtolearnthatourmanuscript isacceptableforpublicationinCancer Researchwithmin0rrevision. 9.为此,我们进行了一系列进一步的实 验.结果见炙5的总结.由此我们得出结论内在 的因素起不到什么作用.Wehavetherefore completedafurtherseriesofexperiments,the resultofwhicharesummarizedinTable5. Fromthisweconcludethatintrinsicfactor doesnotaccount 10.我们删除了对文章不重要的段落.We deletedtherelevantpassagesincetheyare notessentialtothecontentsofthepaper 11.我觉得外审专家对于,0o(的评论有些 误解.Ifeelthatthereviewer'scomments concerningFigures1and2resultfrOma misinterpretationofthedata 12.如果在我们的系统中有非蛋白抑制 剂,我们就会将其设为控制组.Wewouldhave includeanon-proteininhibitorinoursystem, asacontrol,ifonehadbeenavailable. 13.我们希望保留表4,在结果部分新加入 的一段话帮助解释了其存在的意义.Weprefer toretaintheuseofTable4forreasonsthatit shouldbeclearfrOmthenewparagraph insertedattheendoftheResultssection 14尽量审稿专家并不认为有必要测量细 胞的温度,我们却不这样认为.Although reviewerdoesnotconsideritisimportantto measuretheternperatureofthecells,we consideritessentia1. 15.页眉标题已改为""Therunningtitle hasbeenchangedtollf7_ 16.在材料与方法段中已包括了xxx的细 |SSN1673-8225cN21—153RcoDEN:ZLKHAH 节.TheMaterialsandMethodssectionnow includesdetailsformeasuringuptakeof isotopeandassayinghexokinase. 17原稿中对于xxx的描述不正确,现已纠 正.很感谢外审专家的指正.Theconcentration ofHATmedia(page12paragraph2)was incorrectlystatedintheoriginalmanuscript. Thishasbeenrectified.Theauthorsare gratefultotherefereesforpointingouttheir error. 18.依照两位外审专家的建议,现增添了 对于XXX的讨论Assuggestedbyboth referees,adiscussionofthepossibilityof laseractiononchromosomehasbeen included(page16,paragraph2). 19.较原来的图片,我们在新的一组图片 中增加了对比例尺的定义.Weincludedanew setofphotographswithbetterdefinitionthan thoseoriginallysubmittedandtowhicha scalehasbeenadded. 2O.根据外审专家的意见,我们已重新绘 制了图3和4.Followingthesuggestionofthe referees,wehaveredrawFigure3and4. 21.我在炙章的正文和参考文献中增加了 对投稿后发表的另外两篇文章的引用.这两篇 文章是:1_wofurtherpapers,publishedsince ouroriginalsubmission,havebeenaddedto thetextandReferencesection.Theseare: 22.很感谢外审专家的宝贵意见,希望修 改后的文章更公平的,完整地了我们的研 究工作.我们相信修-i:r~的稿件可以达到出版 要求.WeshouldIiketothanktherefereesfor theirhelpfulcommentsandhopethatwehave nowproducedamorebalanceandbe~er accountofourworkWetrustthattherevised manuscriptisacceptableforpublication. 23.我非常感谢您和外审专家对于文章修 改方面给予的帮助.希望修后稿件可以在责刊 发表Igreatlyappreciatebothyourhelpand tha1oftherefereesconcerningimprovement tothispaper.Ihopethattherevised manuscriptisnowsuitableforpublication. 24.很感掰您和外审专家对于稿件修改方 面的建议.Ishouldliketoexpressmy appreciationtoyouandtherefereesfor suggestinghowtoimproveourpaper- 25.很抱歉由于额外新做实验而导致返修 稿件时间上的延误Iapologizeforthedelayin revisingthemanuscript.Thiswasduetoour doinganadditionalexperiment,assuggested byreferees. 865