妥布霉素生产工艺

妥布霉素生产工艺 种子液-发酵液（138h）-吸附-解吸-一次浓缩-水解-脱色-二次浓缩-层析-三次浓缩-纯化-结晶-包装。 一、 吸附 目的：将发酵液中的单位吸附到732树脂上，除去部分杂质。 材料及设备：732树脂（蚌埠天星树脂有限公司、用量700L左右），工业盐酸（C≥9.85mol/L）、5%磷钨酸，发酵液圆筛（S=5.5m2,60目，Ф820*3000），酸化吸附桶（平盖锥底Ф3000*3600、26 m3），吸附液圆筛（S=5.5m2,60目，Ф750*2350），树脂槽（平底平盖、1800*900*1300），树脂抽压罐（立式封头Ф1400*1600），真空清水泵（IS-80-65-160）。 操作内容： 1 发酵液（发酵罐体积20m3）用圆筛将发酵液分离，并将清液收集到酸化桶中，用少量生活用水（1000-1500L）冲洗发酵罐，加入一定量生活用水（3000-5000L）使总体积稀释至24000±1000L，开启搅拌，用工业盐酸调PH至5.00-6.00。 2 根据前一天测定的发酵单位，依公式计算732树脂用量（732树脂用量=发酵液体积*估计发酵液单位/（40000µ/ml）），投入732树脂搅拌吸附8h后，用5%磷钨酸测定废水中5´-妥布单位（≤100µ/ml），取少量吸附后的过滤液于黑色滴定瓷板槽内，滴上几滴5%磷钨酸，稍稍振荡后慢慢倾出废液，如有白色块状物则吸附不完全，当块状物不再有或是很少时，则吸附完全或较为完全，可转入下一工序。如果超标，则需补加少量树脂至到废水中5´-妥布单位≤100µ/ml为止。 3 吸附完全后，用圆筛分离树脂于树脂槽，用生活用水漂洗树脂并抽入解吸柱中，反冲漂洗至出口液澄清。 二、解吸 目的：将妥布霉素从732树脂上解吸下来。 材料及设备：氨水（树脂体积的1.5-2.5倍、C：2.00±0.20 mol/L），解吸离交柱（Ф800*3000-1.5 m3、Ф700*3000），解吸液收集槽（平底平盖1600*2000*1800-5 m3），低峰收集罐（Ф600*1800），低峰配制桶（平底平盖Ф1200*2400），低峰高位桶（平底平盖Ф1300*2700）。 操作内容： 1 用纯化水正洗732柱后，用氨水进行解吸，解吸液前期收集入低峰罐，循环套用于下次解吸，当用磷钨酸测定出口有5´-妥布单位时收集一直到无。解吸流量：4000-6000ml/分。解吸完后取综合样测定5´-妥布单位（应≥10000µ/ml）。计算收率（应≥85%）。 2 732树脂再生（详见树脂再生章节） 三、一次浓缩 目的：浓缩解吸液，除去大部分氨水 材料及设备：一次浓缩器（F=5.5m2 2520*650*3150），氨水接收罐（Ф500*800），浓缩液接收罐（Ф500*800） 操作内容： 1 启动真空系统、冷凝系统。 2 当真空度≤-0.07MPa后，边进料边浓缩，控制T≤70℃，控制浓缩液体积为解吸液体积的0.4-0.6之间，一次浓缩液5´-妥布单位控制在25000-33000µ/ml之间。完后进入水解塔（并测单位），收率应≥92%。 四、水解 目的：将5´-妥布转变为妥布 材料及设备：氨水（化学纯、25-28%、用量：浓缩液体积的15-17%），水解罐（立式封头Ф1400*3580带夹套），水解高位桶(平盖锥低Ф1200*1800)。 操作内容： 1 T达到95℃开始计时，95-100℃之间保温4h后，夹套通水降到到常温，取样，TLC法判断水解是否完全，如不完全，再加适量氨水95-100℃之间保温1-2h。水解液妥布含量≥15000µ/ml，收率≥98%。 五、脱色 目的：水解液通过711树脂，脱色≤3#。 材料及设备：711脱色柱（蚌埠天星树脂有限公司、用量800-850L/柱、Ф700*3000），脱色液收集槽（平底平盖1600*2000*1800）。 操作肉容： 1 水解液通入711树脂柱，调节流量为1800-2200 ml/分，每4个小时测定流量，用磷钨酸测定有单位出来后收信，水解液上完后，纯化水顶至无单位。 2 脱色液收入脱色液收集槽，脱色液顔色≤3#。取样测定单位应≥10000µ/ml，收率≥90%。 3 711树脂再生（详见树脂再生章节） 六、二次浓缩 目的：浓缩脱色液，除去脱色液中大部分氨水。 材料及设备：稀盐酸（2.00±0.20 mol/L），二次浓缩器（F=5.5m2），氨水接收罐（Ф500*800），浓缩液接收罐（Ф500*800），层析上柱液中和桶（平盖锥底Ф1550*3000、Ф1400*2800），回收液中和桶（平盖锥底Ф1400*1800）。 操作内容： 1 启动真空系统、冷凝系统。 2 当真空度≤-0.07MPa后，边进料边浓缩，控制T≤70℃，控制浓缩液体积为解吸液体积的0.4-0.6之间。 3 浓缩液进入层析上柱液中和桶，搅拌下用盐酸调PH8.00±0.20，测单位应≥10000µ/ml，收率≥92%。 七、层析 目的：通过151树脂，使妥布与其他组份分离，收集单一妥布 材料及设备：一级氨水（C：0.10±0.01 mol/L ），二级氨水（C：0.15±0.01 mol/L ），三级氨水（C：0.30±0.01 mol/L ），四级氨水（C：0.45-0.50 mol/L ），五级氨水（C：2.0 mol/L ），151树脂(蚌埠天星树脂有限公司)，层析上柱液高位桶（Ф1200*800），层析柱（Ф408*6000、Ф500*7000），层析液收集槽（800*1800*1000），单一妥布收集槽（Ф1200*2000），上柱液输送泵（25FSB20），锤度仪。 操作内容： 1 根据151层析柱的吸附能力（0.6亿单位/L）计算上柱液用量，上柱，调节流量1200-1400 ml/分，上样完后，用纯化水洗≥20h（一般是一天），水洗流量不变。 2 水洗完后上一级氨水，流量Q：1200-1400 ml/分，每4h测一次流量，当阿泊拉组分下完后上二级氨水层析。Q：1200-1400 ml/分，每4h测一次流量，当Kb和妥布混合液开始出现后开始分段收集，并上三级氨水，Q：450-550 ml/分，每2h测一次流量，当出现单一妥布后，上四级氨水，一直到收集完毕，全过程用TLC方法进行控制。单一妥布液单位应≥15000µ/ml，收率≥68%。交叉液回收重新上柱分离。单一妥布经锤度检测后分段收集，2以下的生产后销往国内，2以上的生产后销往国外。     3 D151树脂再生（详见树脂再生章节） 八、三次浓缩 目的：单一妥布浓缩，除去大部分氨水。 材料及设备：三次浓缩器（F=5.5m2），氨水接收罐（Ф500*800），浓缩液接收罐（Ф500*800），中和罐（立式K型反应罐Ф1300*1975）。 操作内容： 1 启动真空系统、冷凝系统。 2 当真空度≤-0.07MPa后，边进料边浓缩，控制T≤70℃，控制浓缩液体积为解吸液体积的0.4-0.6之间。完后单位应≥30000µ/ml，收率≥92%。 九、纯化 目的：将三次浓缩的妥布和需要进行再次纯化结晶的二次结晶潮晶深液进行纯化，除去阅分杂质。 材料及设备：122树脂(蚌埠天星树脂有限公司)，151树脂(蚌埠天星树脂有限公司)，盐酸（2.00±0.20 mol/L），氨水（C：1.00±0.10 mol/L ），中和液高位桶（Ф1600*900）精制上柱液高位桶（Ф1200*800），1 mol/L氨水高位桶（Ф1200*800），精制脱色柱（Ф408*3000），精制纯化柱（Ф500*3000、Ф360*3000），脱色液抽压罐（Ф600*800），精制周转罐（Ф500*800），解吸液抽压罐（Ф1000*1200）。 操作内容: 1 盐酸调节物料PH至5.00-5.50之间 2 通入122柱脱色，流量Q：2000-3000 ml/分，每2h测一次Q，完后，接收液用氨水调节PH至8.00±0.20，进入D151柱子Q2000-3000 ml/分，每2h测一次Q，吸附完后，用纯化水洗至出口液PH≤8.5。 3 用氨水解吸，Q2000-3000 ml/分，每2h测一次Q，收集妥布，解吸液颜色≤2#，最后压入解吸液贮桶，计算体积并测单位应≥30000µ/ml，收率≥88%。 4 122、D151树脂再生（详见树脂再生章节） 十、树脂再生 稀盐酸  （用量：待处理树脂的3-4倍，C：2.00±0.20 mol/L） 氢氧化钠（用量：待处理树脂的3-4倍，C：1.00±0.10 mol/L） 氨水    （用量：待处理树脂的3-4倍，C：2.00±0.20 mol/L） 再生时的流量Q：每分钟树脂体积的1/20-1/50控制，各种溶剂靠液位差进入 1 D151树脂再生：每次使用完后进生再生，使用两次后进行翻柱 使用完后，用纯化水顶出其中的氨水，使出口液PH≤9.0，通盐酸处理，并浸泡4h，用纯化水洗至出口液PH≥6.0，再通氨水并浸泡4h，最后用纯化水洗至出口液PH≤8.5备用。 2 732、711树脂再生：732每月再生一次，711每次使用后再生 使用完后，用纯化水顶出其中的氨水，使出口液PH≤9.0，通盐酸处理，并浸泡4h，用纯化水洗至出口液PH≥6.0，再通氢氧化钠并浸泡4h，最后用纯化水洗至出口液PH≤8.5备用。 3 122树脂再生：每次使用完后再生 使用完后，用纯化水洗涤，使出口液PH≥6.0，再通氢氧化钠并浸泡4h，用纯化水洗至出口液PH≤8.5，通盐酸处理，并浸泡4h，用纯化水洗至出口液PH≥6.0 TLC检测 硅胶GF254薄层板（0.4mm），展开剂：乙醇：丁酮：氨水=1：1：1。茚三酮显色剂（0.1%） 效价检测：生物检测法，枯草芽孢杆菌 发酵过程化测： 1、 总糖测定 2、 还原糖测定 3、 氨基氮测定 4、 PH 5、 菌浓度测定 文档已经阅读完毕，请返回上一页！