大鼠腹腔海水浸泡伤后胃黏膜、血浆中一氧化氮和前列腺素的变化

大鼠腹腔海水浸泡伤后胃黏膜、血浆中一氧化氮和前列腺素的变化 大鼠腹腔海水浸泡伤后胃黏膜、血浆中一氧化氮和前列腺素 的变化 作者:宋东华 朱雄伟 李兆申 【摘要】 目的:探讨大鼠腹部开放伤海水浸泡后短时间内胃黏膜 和血浆中一氧化氮和前列腺素的动态变化。方法:32只SD大鼠随机 分成正常对照组和腹腔浸泡伤1、2、3 h 4组～取相应大鼠的胃黏膜 和血浆～采用镉粒还原和比色法测定其中一氧化氮含量～采用放射免 疫法测定其中前列腺素含量。结果:与正常组大鼠相比～腹腔浸泡伤 大鼠胃黏膜和血浆中一氧化氮和前列腺素随着浸泡时间的延长而进 行性升高,P<0.05,～并在3 h时达最高。结论:海水浸泡伤可引 起大鼠胃黏膜和血浆中一氧化氮和前列腺素水平升高～提示一氧化氮 和前列腺素在海水浸泡伤引起的急性胃黏膜病变发生发展过程中可 能起重要作用。 【关键词】 腹部损伤〃海水〃胃黏膜〃一氧化氮〃前列腺素〃大 鼠～Sprage-Dawley 【ABSTRACT】 Objective: To explore the dynamic changes of nitric oxide and prostaglandine levels in gastric mucosa and plasma of rats with seawater immersion injury after open abdominal traumaMethods: Thirty-two Sprage-Dawley rats were randomly assigned into four groups: normal control group, celiac seawater-immersing trauma stress 1, 2, 3h groups. The contents of nitric oxide and prostaglandine in gastric mucosa and plasma of rats were detected by chemochromometric and immunoassay methods respectively. Results: Compared with normal control group, both the nitric oxide and prostaglandine levels in gastric mucosa and plasma of rats under celiac seawater-immersing trauma were progressively increased(P<0.05), especially in stress 3h group. Conclusion: Seawater immersing trauma is a harmful factor, it may cause the increasing levels of nitric oxide and prostaglandine in plasma and gastric mucosa, which may lead to acute gastric mucosal lesion in rats with open abdominal trauma after seawater immersion. 【KEY WORDS】 Abdominal injuries〃Seawater〃Gastric mucosa〃Nitric oxide〃Prostaglandine〃Rats 研究证实～腹腔海水浸泡伤后会引发急性胃黏膜病变,acute gastric mucosal lesion～AGML,～一旦合并大量出血～处理非常困 难～病死率高～严重威胁生命,1,。一氧化氮,nitric oxide～NO, 和前列腺素F1α,prostaglandine F1α～PGF1α,是扩血管物质～可增加胃黏膜血流量～对胃黏膜具有保护作用,2,。研究大鼠腹腔海水浸泡伤后胃黏膜中NO和PGF1α的变化～旨在为海水浸泡伤的综合救治提供新思路。 1 材料与方法 1.1 材料 1.1.1 动物分组和模型制作 SD大鼠,第二军医大学动物中心提供,32只～体质量200，300 g～清洁级～雌雄各半～随机分为4组:0 h组,对照组,～腹腔开放伤浸泡人工海水1、2、3 h组。模型制作参照文献[1]进行。为消除生物节律对实验结果的影响～均于上午8时开始实验。造模前禁食24 h～自由饮水～实验前1 h禁水。 1.1.2 实验仪器 台式低温高速冷冻离心机、DHG29070型电热恒温鼓风干燥箱、8222型恒温磁力搅拌器、UV-754型紫外-可见光光度计、XHF-1型高速组织匀浆器、震荡器。 1.2 主要试剂和标本采集 1.2.1 人工海水配置 根据国家海洋局第三研究所提供的配方配置～主要指标:渗透浓度,1 250.00〒11.52, mmol/L～pH=8.2～Na+浓度,630.00〒5.33, mmol/L～K+浓度,10.88〒0.68, mmol/L～Cl,浓度为,658.80〒5.25, mmol/L～温度,21〒2, ?。 1.2.2 试剂 PGF1α放射免疫试剂盒,北京东亚免疫研究所,～镉粒,上海亭新工厂,～甘氨酸、亚硝酸盐,上海试剂一厂,～硫酸铜、N1奈乙胺盐酸盐,上海试剂三厂,～对氨基苯磺酸,上海山海科技研究所,～硫酸、硫酸锌,上海试剂二厂,。 1.2.3 血浆样品制备 取外周血2 mL～EDTM抗凝～离心后～取上清液～-20 ?贮存待测。 1.2.4 胃黏膜标本 玻璃片钝性刮取新鲜胃部受损黏膜组织～组织匀浆～离心后～取上清液～-20 ?贮存待测。 1.3 测定方法 NO用镉粒还原和比色法测定,3,～PGF1α用放射免疫方法测定。 1.4 统计学处理 采用SPSS 12.0统计软件包进行～实验数据以x〒s示～组间差异比较采用方差分析～P?0.05为差异有统计学意义。 2 结果 2.1 大鼠腹腔海水浸泡伤后血浆和胃黏膜中NO2-/NO3-的变化 与对照组相比～海水浸泡伤1、2及3 h组大鼠血浆和胃黏膜NO2-/NO3-的含量显著升高,P<0.01,～以海水浸泡伤3 h组升高 最明显,P<0.05～表1,。 2.2 大鼠腹腔海水浸泡伤后血浆和胃黏膜PGF1α的变化 与对照组相比～海水浸泡伤1、2及3 h组大鼠血浆和胃黏膜PGF1α的含量显著升高,P<0.05,～以海水浸泡伤3 h组升高最明显,P<0.05～见表1,。 3 讨论 在渡海登岛战事中～腹部开放伤是一种较为常见的伤型。腹腔海水浸泡可直接损伤组织细胞～引起机体多器官功能障碍综合征。AGML系机体在严重创伤、感染、休克等应激状态下～发生以胃黏膜损害为主的病理改变和上消化道出血为特征的临床病症。海水浸泡腹腔本身就是一种特殊的应激原和危重状态～可直接导致AGML的发生。AGML的发病机制涉及胃黏膜保护作用的削弱和损伤因子的增强。观察NO和PGF1α在海水浸泡伤后胃黏膜中含量的变化有重要意义。 NO是血管内皮细胞释放的一种血管舒张物质～NO对胃黏膜的保护作用已经被许多学者所证实,4,。研究表明～NO在多种实验条件下可维持胃黏膜完整性防止或减轻急性胃黏膜损伤的发生～对胃黏膜具有强大的保护作用～其胃黏膜保护作用几乎涉及黏膜防御机制的 各个方面。NO在基础释放量时具有维持胃黏膜血管张力、调节血流量的作用～所以在海水浸泡伤早期～机体通过自身反馈增加NO的含量～以加强扩血管作用～改善局部血流～使受损的胃黏膜细胞得以恢复～所以创伤早期NO含量的代偿性升高并非全部具有病理意义。因为在海水浸泡伤早期引起的应激作用下～合成的NO增多对胃黏膜可能只是起一定的保护作用。 前列腺素I2,prostaglandine I2～PGI2,是胃黏膜中含量最高的一型前列腺素～且代谢旺盛～生物活性强～具有强烈的细胞保护作用～内源性含量降低则可以造成胃黏膜损伤。近年研究也表明～胃黏膜可合成和释放大量的PGI2～并发现其与胃黏膜细胞的保护作用机制密切相关。PGI2生物半衰期仅2，3 min～很快变成稳定的血浆6-酮-PGF1α。因此～测定血浆PGF1α的含量能反映血浆PGI2的含量。PGF1α可通过抑制胃酸和组胺分泌、细胞保护作用而发挥保护胃黏膜作用,5,。本研究发现～血浆和胃黏膜PGF1α均较正常对照组明显升高～表明在腹腔海水浸泡伤时～PGF1α代偿性升高以对抗腹腔海水浸泡伤对胃黏膜的损害作用。本研究结果表明～NO和PGF1α作为胃黏膜保护性因子～在海水浸泡伤后应激性AGML中进行性升高～可能是机体的一种代偿性反应机制。 综上所述～腹腔海水浸泡伤是一种严重的应激状态～是一种特殊的损害因素。海水浸泡大鼠腹腔可引起应激性胃黏膜损伤～胃黏膜 和血浆中NO和PGF1α水平进行性升高～提示二者可能参与了海水浸 泡伤应激性AGML的发病过程。 【参考文献】 [1] 朱雄伟～王强～湛先保～等.开放性腹腔海水浸泡伤后大 鼠急性胃黏膜病变模型的建立[J].中国现代医学杂志～2004～14,21,: 45-47. [2] Nejadkey F, Nahavandi A, DehpourAR, et al. Role of nitric oxide in the gastro-protective effect of lithium[J]. Pathophysiology, 2006,13,2,:85-89. [3] 乐桥良～林克荣～张志坚.一氧化氮在潘拖拉唑对大鼠胃 粘膜损伤保护中的作用[J].第四军医大学学报～2005～26,23,: 2166-2168. [4] Liu YZ, Zhou Y, Li D, et al. Reduction of asymmetric dimethylarginine in the protective effects of rutaecarpine on gastric mucosal injury[J]. Can J Physiol Pharmacol, 2008,86,10,:675-681. [5] Wallace JL. Prostaglandins, NSAIDs, and gastric mucosal protection: why doesn’t the stomach digest itself[J]. Physiol Rev, 2008,88,4,:1547-1565.