丁基黄原酸测定方法

丁基黄原酸测定方法 岛津UV-2550 紫外可见分光光度计 1L分液漏斗，10ml比色管，振荡器，天平 铜试剂(百灵威)， 盐酸经胺(国药试剂北京公司)，环己烷(TEDIA)，去离子水 100mg/L丁基黄原酸钾(日本东京化成)贮备液: 称取0.0278g丁基黄原酸钾, 滴入3滴400g/L NaOH ，定容至250ml。 10 mg/L丁基黄原酸标准使用液:取贮备液稀释10倍，现用现配。 pH5.2 醋酸-醋酸钠缓冲液:称取44.8g醋酸钠, 加冰醋酸12g, 用蒸馏水溶解稀释至1L 1.4 mmol/L铜溶液:称取0.2238g无水硫酸铜(百灵威)用蒸馏水溶解稀释至1L 标准曲线的绘制 取8个分液漏斗，分别向其中加入1.25g盐酸羟胺和500ml纯水，混均使盐酸羟胺完全溶解，依次向各个分液漏斗中加入体积为0、0.1、0.25、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0ml的丁基黄原酸标准使用液，其中含丁基黄原酸的质量分别是0、1.0、2.5、5.0、10.0、20.0、30.0、40.0,g。混匀后立即依次加入5ml缓冲溶液，5ml硫酸铜溶液，10ml环己烷，震摇放气后，置于振荡器上机械振摇4min，取下静置，待水相无明显气泡，两相明显分层时弃去水层，有机相用10ml pH5.2的缓冲溶液洗涤，充分振荡30s后弃去水层再重复操作一次。用滤纸吸干分液漏斗下管口的水分，将有机相放入装有适量DDTC和一滴水的10ml比色管中，剧烈振荡使混合均匀，这时需保证有少量DDTC未溶解。放置15min后以环己烷做参比，于436nm下测定吸光度值，计算样品中丁基黄原酸的含量。 相关注意事项: 初次做这个实验室时，最好两个人一起做，而且要熟知每一步。 对于标曲而言，可以更改一下顺序，先加完硫酸铜溶液，震荡混匀后， 再加入标准溶液，而且加了标准溶液后，马上加环己烷。如果按正常顺序的话，加标液后最好在2min内将后续试剂加完，以免吸光度损失使灵敏度降低。这样实验成功率大很多，其实这个实验很大程度上在于熟练度，标曲是容易做到两个9的，关键在于做实际样品，可能一检出就超标。 分液漏斗一定要清洗干净，最好选用超纯水， 盐酸羟胺要用新开瓶的(我们用的是北京国药集团的)，用后盖好放入冰箱冷藏保存。 洗涤时采用配置的pH5.2的缓冲溶液洗涤两次， DDTC加入量约为50-70mg，初次做可以用天平称一下。 做标曲时，可不加脱脂棉，分尽水相后，用滤纸伸入分液漏斗下管底部吸干残存的水分即可，如果用的是10mm比色皿，不需要10mL的环己烷全用，可以在分离水的时候，稍稍多放一点溶剂于废液瓶中，保证有机相中没有水，免得放脱脂棉麻烦。 萃取反应时间严格控制在4min。