[doc] 洗板条件对HBV血清标志物ELISA法检测结果的影响

[doc] 洗板条件对HBV血清标志物ELISA法检测结果的影响 洗板条件对HBV血清标志物ELISA法检测 结果的影响 2004年第6卷第7期(总第88期)中囤社丕.综合版j 蛋白比较发现,妊高征组1?,VI.DL—C明显高于对照组, HDL—C明显低于非妊高征组,(P<O.o1).2组问其他各项 指标均无差异,见3. 表32组孕妇血脂及血脂蛋白的比较(n~I/L.?S) ※与善盘工两怔盟}t段P<0Ol GDM伴高脂血症组妊高征发生率为37.5%,而非高脂血 症组妊高征发生率仅为9.7%.!组比较差异有显着性(P< 0.o1). ?GDM孕妇妊娠期脂代谢动态变化研究.47例GDM组 在孕晚期进行了2次以上血脂测定,结果见表4. 表4GDM孕妇妊娠期脂代谢动态变化(m~l/L,』Y?S) 各项指标孕周TG1IlnL—cf,一C?J—c 1扶89?34343?l44寤585145168?039258?l071i109 第状3712?2I6389?I力6?tI::165O44261?078191t102 与第二淡比段P(005 GDM组经过治疗血脂水平无下降,反而升高(P< 0,05). 讨论 妊娠后,为了满足胎儿不断生长发育的需要,孕妇体内 多种脂类物质增加.同时妊娠期有多种激素参与机体糖代谢 调节,从而影响了血脂及脂蛋白的代谢.据报道,妊娠21 周后各项血脂及脂蛋白指标高于正常人参考范围,31周后随 着胎儿成熟,血脂及脂蛋白处于稳定的高鳆状态.显性糖尿 病病人未经妥善控制或未经治疗者常伴以高脂血症和高脂蛋 白血症,主要由于体内胰岛素绝对或相对缺乏,体内血糖代 谢,利用障碍,脂肪分解增加,血中游离脂肪酸及TG升高. 由于GDM发病主要在孕晚期,病情短,病情相对较轻,故 未引起临床重视,其对脂代谢影响国内未见报道,国外仅有 少数报道,但结沦又不统一本研究较详细观察了该组病人 孕晚期脂代谢的情况,显示GDM组孕晚期TG及VLDL—C平 均水平明显高于正常妊娠晚期水平,而且GDM组高脂血症 发生率明显高于正常孕妇组,GDM时也存在脂代谢紊 乱,所以GDM孕妇妊娠晚期应常规监测血脂及血脂蛋白的 变化. 最主要和最好的治疗方法为饮食控制,理想饮食控制是 既能提供维持妊娠的热能和营养,不会引起饥饿性酮体产 生,又能严格限制碳水化合物摄入以避免餐后高血糖,同时 能提供足够热量与合适的营养促使胎儿发育.大部分GDM 患者仅通过饮食控制血糖即可达到治疗目的.但是每日饮食 摄入量及碳水化合物,脂肪和蛋白质的比例应合理,非孕期 糖尿病患者由于常伴有高脂血症及动脉粥样硬化,目前多主 张限制饮食中脂肪的摄入,所以随着血糖的控制,脂代谢紊 乱常常也得以纠正.本文对GDM孕妇进行动态血脂测定发 现经饮食及胰岛素治疗后血糖均控制在正常范围,而血脂及 血脂蛋白平均水乎并未下降而呈现升高;其中少数患者改食 控制前血脂正常而饮食控制1个月后出现了高脂血症.可能 与孕期我们在进行饮食控制时仅重视限制碳水化合物摄入, 而忽视食物中脂肪含量.病人加餐常利用高蛋白及高脂肪的 食品,因此对GDM患者饮食指导时应结合患者的血脂及脂 蛋白水平.对于高脂血症患者.应限制食物中多糖含量,如 此饮食控制后血糖控制仍不满意者,应及时加用胰岛素.许 多研究已显示妊高征患者伴有脂代谢异常,本文结果表明高 脂血症组妊高征发病率达37.5%.明显高于GDM未合并高 脂血症组,而且脂代谢紊乱在妊高征发生前已出现,反映 GDM时脂代谢紊乱有可能参与妊高征的发病.因此,对GDM 合并脂代谢紊乱者应加强监测,以便及时发现GDM并发妊 高征.由于目前例数尚少.故高脂血症对围产儿的影响有待 进一步研究 作蕾单位:276000【IJ东省临沂市沂水中心医院(徐雪云);临沂市肿 瘤医院(徐晓红) 洗板条件对HBV血清标志物ELISA法检测结果的影响 镣肆 酶联免疫吸附技术ELISA由于其快捷简便,特异性强, 灵敏度高等优点,现已广泛应用于临床.在实际应用其检测 HBV标志物时,大多时候只注意标本质量要求,而忽视了最 后洗板这一因素.在工作中,我们发现,不同洗涤方法对检 测结果判断存在同样的影响,为此,我们做了以下实验. 仪器及试剂DG5031型酶标仪,DEM?型洗板机,国内 某公司生产的HBV血清标志物HBsAg及HBsAb检测试剂盒, 按其提供有效期内使用,按操作说明书操作收集该公司配 套阳性及阴性对照血清,用时充分摇匀. 洗涤液A液:用该公司配套浓缩洗涤液,用时按要求稀 释.B液:未做任何处理的自来水. 方法:平行操作HBsAg及抗一HBs阳性及阴性血清’掘孔 各4份,加酶反应完毕后,分别用A液,B液给予机洗及手 工洗1份,加完终止液后,及时测吸光度OD值. 结果:(结果显示,HBsAg和抗HBs结果影响相同,在 此,只用HBs舨实验结果比较)用A液机洗和手工洗方法之 间结果无差异,B液机洗和手工洗方法之间结果也无差异, A液洗涤所得结果和B液洗涤所得结果比较,阳性对照血清 中固社犀匝?综合版 OD值之间经配对t检验,f=1.470,P>0.05,显示无差异, 阴性对照OD值之间经配对t检验t=2.731,P<0.01,显示 两者之间相差极显着. 讨论 从实验结果看出,无论是机洗或手工洗,对结果都无影 响.A液及B液之间阳性血清结果相差不显着,可能是由于 深颜色掩盖了两者之间的差异;在阴性血清结果之间相差极 显着,A液OD值0.042?0.012,B液OD值0.091?0.067,B 液洗涤所得结果OD值偏高.从中可知,用自来水洗涤反应 板,酶标仪检测时,阴性对照OD值偏高,使cutoff值偏高, 从而使阳性结果定量值偏低,处于临界值的标本就造成假阴 性.如果用目视法定性,对阳性结果无影响,但对阴性结 果,由于其颜色相对变深及存在个人的主观因素就会造成假 阳性,或者当标本结果处在临界值时,结果是慢性或者阴性 2004年第6卷第7期(总第88期) 就左右为难.在实际工作中,不同厂家的产品,2种洗涤液 洗板所得的结果影响程度又不一样,这给实验室的工作带来 混乱我们也发现,无论是竞争法还是夹心法,用自来水洗 扳其结果都有影响. 标本中混有红血球或洗板不彻底是影响ELISA法检测结 果的主要原因之一.很多单位往往忽视洗涤本身的影响,图 方便或者错误认为水龙头冲出的水冲洗干净.从多年的工作 中我们发现,在部分假阳性或假阴性结果都是由于以上因嚣 造成.常用的ELISA法洗涤液都是含有表面活性剂的PBS, 它既可保护HRP的活性又可使一些非特异必结合的物质冲洗 出来,避免非特异性背景颜色对结果判断的影响. 作者单位:524025广东省湛江海洋大学校医院 小针头穿刺淋巴结转移癌的细胞学200例 王侠 淋巴结细胞学检查,对诊断转移癌具有很重要的临床价 值,肿瘤原发部位症状不明显,而在肿大的淋巴结内找到恶 性细胞.近年来,本科对200例淋巴结肿大着采取小针头穿 刺,进行细胞学分析,并经病理及临床验证,结果满意,现 总结如下. 本组200例均属淋巴结肿大的门诊及住院病人,其中颈 部88例,锁骨上22例,颌下19例,腋下34例,腹股沟17 例,男124例,女76例,年龄29—80岁之间,平均54.5岁. 材料:采用2030lT1l空针1具,79号针头,玻片数 张,西德显微镜l台,瑞氏染液.方法:穿刺前应观察肿物 外形,大小,质地软硬,活动度,是否凸凹不平,深部是否 粘连,常规消毒,固定肿物,用2030ml空针及7—9号针 头刺入肿物,抽动注射器至2030rid处,使之产生负雎,朝 肿物不同方向穿刺数次见有组织吸出即行退针,迅速推成薄 片数张,瑞氏染色. 结果:鳞癌94例,腺癌88例,未分化癌l0例,恶性黑 色素瘤8例,经病理及临床验证,完全一致172例,(占 86%),基本,致23例(占11.5%),错误诊断2例(占 1%),漏诊1例(占0.5%),未能诊断2例(占1%),诊断 正确率97.5%. 细胞学图像:?转移性鳞癌:多散在分布,也可三五成 群,大小不等,形态多样,核大而圆或畸形,浆丰富而不规 则,可见到梭形,纤维形,蝌蚪形,船形癌细胞.?转移性 腺癌:癌细胞形态常与原发肿瘤基本相似,可保持其柱状排 列特点,可呈滤泡状,腺管样癌细胞团,边界一般不清,融 合成片,胞浆多而丰富,常含有空泡,核大而圆,有异形 性,核仁大而明显,具有一大(核大),二黑(核染色质增 多变粗),三挤(细胞失去极性,无的重叠堆集),四不 规则(核有凹陷,折叠,切迹,伪足,芽胚等畸形怪状). ?转移性未分化癌:在淋巴结穿刺中较少见,癌细胞体积 小,胞浆少,边界不清,密集成团,核大小形态一致,偏 心,圆形,核仁少见,核与核之间排列紧密,常因挤压而成 镶嵌状.癌细胞大小及核浆比例与淋巴瘤相似,但癌细胞之 间仍存在特征性粘附力,染色质增多,易出现核回缩性退 化.?转移性变性黑色素瘤:可显示不同的细胞类型,细胞 可大可小,圆形或梭形,有畸形怪状的单核或多核巨细胞 细胞可成团或完全分离,核仁大而清晰,有的胞浆可见两端 突起,弯曲如波状,有黑色素颗粒者容易诊断,而无色索性 黑色素瘤诊断比较困难,必须与原发部位对照才能做出,本 组数例患者原发部位在腰部,背部,会阴部,头顶部等,均 有恶变的色素痣,并找到典型的黑色素瘤细胞,说明其为远 端转移. 讨论 转移癌在淋巴结所有细胞学诊断中比较容易,由于正常 淋巴结没有任何上皮细胞,它们在淋巴结内的存在是转移癌 的特殊病症,淋巴结转移癌可分为鳞癌,腺癌,未分化癌, 恶性黑色素瘤4种,此外也可有其他类型恶性肿瘤,循淋巴 管或血行播散转移至淋巴结,如纤维肉瘤,骨肉瘤,白血病 等,各具有自己的形态特点,与原灶细胞很相似,在熟练掌 握各组织细胞学特点后方可辨认. 本组未能做出诊断2例,1例抽出少许白色黏稠物,涂 片细胞成分较少,仅见少数无结构物,病理证实为转移癌,