【doc】苏云金杆菌内外毒素混合原粉对血液学及肝肾功能的影响

【doc】苏云金杆菌内外毒素混合原粉对血液学及肝肾功能的影响 苏云金杆菌内外毒素混合原粉对血液学及 肝肾功能的影响 l1一f午1f苇行蓠季友,所 苏云金杆菌内外毒素混合原粉对 血液学及肝肾功能的影响' 叶冬青谢蕾心周诗其王大菊操继跃— 中五学畜牧兽医系430070) 留z'1 A摘要取sD系大白鼠,将苏云金杆菌内外毒索混合原粉.. ..........墨,bw剂量混于饲 料中连续接毒6十月,对照组不给受试物.分别于接毒后第30,90,180d随机取样, 铡定红细胞数, 白细胞数,白细胞分类数,血红蛋白古量和血清谷丙转氨酶及尿素氟.结皋明t苏 云金杆菌内外 毒索混合原糟连续接毒6十月对实验动物血液学及肝肾功能均无明显影响. 关键词苏云金杆菌血清答丙转氨酶尿素氟 苏云金杆菌(柏柏脚)制剂已 大规模地用于生产,并广泛应用于防治农业, 林业,贮藏产品和环境卫生害虫.由于它具有 杀虫的特异性,毒力持久,对人类和脊椎动 物,植物无较大毒害,不杀伤害虫天敌,能克 服大量使用化学农药后农产品中化学农药残 留和害虫产生抗药性的弊病,所以在害虫的 防治中显示出很大的作用口].由此华中农业 大学土化系微生物室研制了苏云金杆菌内外 毒素混台制剂.它是由6一内毒素口"和B一 外毒素混合制成.已由河北省高邑县生物防 治厂生产,并用于田间试验.结果表明.内外 毒紊配合应用有协同作用.为评价其安全性, 作者对其亚慢性毒性进行了研究. 一 ,材料与方法 (--)材料 t.受试物苏云金杆菌内外毒素混合原 粉由华中农业大学土化系微生物室提供,效 价24476.96rv/~,批号19920102. 2.实验动物健康SD系大白鼠,由上 海西普尔一必凯实验动物有限公司提供. 3.饲料由武汉同济医科大学试验动物 中心提供. (二)方法 1.实验动物的分组与饲养选用健康 SD大白鼠120只,雌雄兼取,平均体重:雄鼠 13].70士6.4g,雌鼠]22.2士5.2g,随机分成 4个组,每组雌,雄各15只.各组大鼠雌雄分 笼喂养,自由饮水及采食. 2.染毒途径和期限染毒途径采用喂饲 法,染毒期限为6个月0]. 3.染毒剂量分3个剂量组和1个对照 组剂量组以3,0.30.03g/kgbw的苏云金 杆菌内外毒素混合原粉混于饲料中加工 成颗粒饲料饲喂,对照组用不加受试物的标 准饲料 4.观察试验期间每天观察大鼠的一般 状况,定期称量各组动物的采食量和体重.于 试验3O,90.180d各组分别随机取出10只. 采外周血检测红细胞数,白细胞数,白细胞分 类数,血红蛋白含量I断肢采血测定血清谷丙 转氨酶(赖氏法)和尿素氮(二乙酰一肟 法"].并测定心,肝,脾,肾脏器系数及进行 病理剖检和组织病理学检查. =,结果 试验结果见表1. ?车研究所用苏云垒杆菌内外毒鼍混台原粉由华中农业大学土化系林开春葛I教 授提供,谨表谢意. 121993年第lO期 I 嘲北袁韭科学 -(_【...Ve叫鞯昧制丑罂捌崔智坤..I(?...Vd】吲球制丑罂粤崔靛坤. 呻.一?.曲.._【..呻..帕啼._【一._【.._【呻.'_..0.._【一H.卜..上|z..啼一.N..啼_【啼 帕.Ho.帕?._【卜._【_【押*隧 . .啼曲.卜一西._【_【.西|罟H呻..'_.一.H..._【..?._【_【_【|z:...'_西.呻o.o.呻'__【| 上_【.?.呻H..'_卜卜.啼叶畸 |z?.0Ht0_【.西 0 0 .啼0.呻 ?.帕'_呻 西..= 西.啼'_._【 . .... ..0 ..一_【 . .0啼._l 卜._【..卜 呻._【呻.西 .. 0._【.西 ?_0_【 .0_【 ?.0_【 一.HN_【 : '【.一刊西. _【.0|0_【 ?.帕t'_呻 ..?.,呻 0.??.,_【 . .上.._【 ._【0 .. 0 0.0|z_【 啼._【西.啼一 . .1|z啼.呻 呻|z0.西 .H一 |0一 西西.一N.61'_.0啼0.呻啼.0啼0.H一0.卜_【.西 0 0 啼曲呻 .呻0.呻 _【..HH _g..呻H : ?,... ?.... 0|l0_【 . .上..'_.N_【 帕._【 呻.._【.呻 .刊.卜 一.曲.卜 00 啼_1呻... 西|,._【呻..呻呻..? 呻.呻N呻o_【瞬 时.啼呻.皇帕.呻0.啼_【 : 心|,..HN..H..呻_【 0.一呻.0:?.0.0 . .g.00.00.00 ._【|z_l.一.啼一?..._【 _【..啼一..HH.帕一..上..制西._【_【 啼啼._【H?.帕呻._【一曲.一心 啼.g?.61呻.帕_【.o?._【心|窨 .,.HH.._【_【._【.呻._【西.心 呻.啼_【.西..一N.呻_【曲 呻.0_【.NH 西.0H.帕_【 呻.帕_【 西.0|罟_【 .z呻_上 0啼.一_【 0.rI'_ 曲.0呻.0 0_【 ?.0.呻 呻.0.6上 帕.0_【 . 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(--)对血液学的影响 1.红细胞数试验90<I雌鼠0.03glks 组扳显着低于对照组(P<0.01),0.3glkg 组,3g/ks组与对照组相比均差异显着(P< 0.05)t0.3g/kg组与0.03slks及3slks组相 比差异扳显着(P<O.01).无剂量反应,与染 毒也无规律性变化 2.白细胞数试验30d雌鼠0.03slks 组扳显着低于对照组(P<0.01).3slks组与 对照组相比及0.3slks组与0.03slks组相 比差异显着(P<0.05).该制剂对白细胞数 的影响仅在试验30d雌鼠的各剂量组不同程 度的减少. 3.血红蛋白含量在试验180d雄鼠各 荆量组均板显着低于对照组(P<0.01). 0.3g/kS组与3slks组相比差异显着(P< 0.05).因试验180d的雄鼠长期慢性染毒,毒 素作用引起实验动物肠道组织损伤,营养物 质吸收障碍,加之食量逐渐减少,导致营养不 良,血红蛋白含量减少.是否有溶血作用[】, 有待以后进一步研究. d.白细胞分类数仅在试验30,180d进 行了检测. 嗜酸性白细胞:在试验30,180d雄,雌鼠 各剂量组均扳显着低于对照组(P<0-01). 这是嗜酸性白细胞对炎性中毒反应敏锐的结 果r. 嗜中性白细胞:试验30d雄鼠各剂量组 均扳显着高于对照组(P<O.01).此细胞在 中毒时最为活跃,数目也有变化口]. 淋巴细胞雌,雄鼠各剂量组虽无显着差 异,但各荆量组均为正常指标范围的高限值, 是免疫反应的结果. 以上血液学检测值虽然有些荆量组有扳 显着性差异,但均在正常值0".范围内变 化,这与喻子牛报道的也相符,所以该制荆对 血液学各项指标无明显影响. l4 (二)对肝肾功能的影响 1.谷丙转氨酶在试验180d雌鼠各剂 量组均极显着低于对照组.有些试验动物染 毒后,肝脏组织病理学有一定变化,且肝脏的 贮备代偿能力也会增强,在一般情况下,当大 量的肝组织细胞受到严重损害时,谷丙转氨 酶就会明显升高l但在本研究中尚未发现明 显升高,所以该制荆对肝功能无明显影响. 2.尿素氮雄鼠试验30d0.3slkg组及 试验90d3slks组,0.03slks组和雌鼠3slks 组,0.3slks组均与对照组相比差异投显着 (P<O.01).该制荆对以上剂量组尿素氮有 一 定影响,但在该正常值测定实际范围[" 内.大部分剂量组尿素氮测定值与对照组相 比无显着性差异,所以从整体看对肾功能无 明显影响.同样,当肾功能受到较重侵袭时, 排泄受到影响,尿素氮就升高. 本研究中谷丙转氮酶,尿素氮测定值与 丁正梁等报道的SD大鼠临床生物化学正常 值测定实际范围相符,所以该制剂对肝,肾功 能无明显影响 三,结论 苏云金杆菌内外毒素混合原粉对血液学 及肝,肾功能的影响是接毒30d雌鼠白细胞 和雄鼠嗜酸性白细胞数减少}雄鼠嗜中性白 细胞数增加}接毒9od雌鼠3S/ks,0.03g/ks 组细胞减少,0.3glks组增加l尿素氮雌鼠 3slkg组,0.3slkS组及雄鼠3slks组和 0_03s/ks组升高}接毒180d雄鼠血红蛋白含 量,嗜酸性白细胞.谷丙转氨酶均减少.而对 大部分剂量组无影响.在本实验条件下亚慢 性毒性研究结果表明:苏云金杆菌内外毒素 原粉对实验动物大鼠血液学及肝,肾功能指 标均无明显影响,其生理生化指标均在正常 变化的范围之内. 参考文献 1喻子牛主编.苏云金杆苗.北京,科学出版社. 1989.1,405 2中华人民共和国卫生部,农业部卫监发(91)第l7 (下转第31再) 1993年幂l0期 本病以肉用仔鸡(艾维因,AA鸡等)最 易痘.病鸡,带菌鸡及被致病性大肠杆菌污染 的种蛋为主要传染源.通过粪便不断向外排 菌.污染饲料,饮水,尘埃及用具等.在饲养过 程中.如果空栏时间太短.消毒不彻底,则隐 伏于鸡肠道,鼻腔,气囊或生殖道的致病性鸡 大肠杆菌会对健康鸡造成威胁.一旦发生"应擞.抵抗力降低就会造成新的传染源. 四,临床症状 肉用仔鸡一般28El龄开始发病,以35 , 40日龄多发.发病日龄一直可延伸到内鸡 出栏期.病鸡主要症状表现精神沉郁.部分病 鸡呼吸困难,食欲减退,有的病鸡出现腹泻. 出现呼吸道症状的病鸡.常伴有枝原体混合 感染.重症病例常卧地不起.病程一般为1周 左右.若发生腹泻则死亡率增大.本病一般 发病率为10,30.死亡率为80/,200/. 五,剖检病变 主要表现为心肌炎和心包积液.纤维素 性肝周炎.气管粘膜增厚,刮之有如稀泥样粘 液.气囊炎.气囊壁增厚混浊.并附有干酪样 渗出物.实质器官肿大,出血.腹膜发生炎症, 并有多量腹水.有的腹泻病鸡兼有肠炎病变. 六,诊断 通过病原的分离和鉴定,结合流行病学t 临床症状及剖检病变的特点.可确定诊断为 鸡致病性大肠肝菌病. 七,防治措施 1.种鸡隔离对有腹泻症状的种鸡.特 别是种用公鸡,要及时淘汰或严格隔离治疗. 2.种蛋挑选和消毒种蛋应来源于健康 的种鸡群,要剔除被粪便污染的蛋,裂纹蛋, 畸型蛋.种蛋入库前或入孵时分别用福尔马 林熏蒸消毒. 3.精心育雏保持育雏室的清洁卫生t 室内设置洁净垫料,饮水器和保温伞等.注意 防寒保暖和通风换气.给予足够的饲料和饮 水,提高雏鸡的低抗力. 4.采取"垒进垒出饲养每批肉鸡采用 "垒进垒出饲养.中途不得增加鸡只混群.每 批肉鸡出售后,空栏不得少于2周.空栏后的 鸡舍要彻底消毒.地面用清水冲洗干净.再用 l,2的烧碱液喷洒地面,最后对鸡舍甩 28ml/ma福尔马林熏蒸消毒24h.打开鸡舍门 窗,排出甲醛气体,再放入新鸡. 5.预防接种为了有效地控制鸡大肠杆 菌病,可采用鸡大肠杆菌油剂灭活苗作预防 接种.雏鸡10,14日龄皮下注射0.2ln1/只| 蛋鸡开产前2,3周皮下注射0.5ml/只.实 验证明:我省发生鸡大肠杆菌病的鸡场,使用 我们研制的鸡大肠杆菌油剂灭活苗后t本疯 得到控制.取得较好的经济效益. 6.治疗可选用氟哌酸稀释成60, 120mS/kg作饮水,可取得较好的效果. (上接第14页) 号.农药安全性毒理学评价程序.1991.12 3胡南医学院卫生学教研组编.卫生毒理实验方 法.北京,人民卫生出版社,1979.79~220 4武汉医学院第=附属医院检验科编.实用临床医 学检验.1980.275~274I338~340 5福州部队医院编.临床医学检验.上海,上海科学 技术出版社一1978.301~326 6徐涛,王荣廷编译.临床检验基础.北京;人民卫 生出版社,1988.72 7卢宗善主编.家畜及实验动物生理化参数.北京; 农业出版社,1983.44~52 8田岛嘉雄等着.王照南译.实验动物学概论.太 潮北农业科学 原.山西科学教育出版社,1987.140 9[苏]N.特拉赫金别尔格等编着.毒理实验中 实验动物各种指标的正常值.北京人民卫生出 版社,1984190 l0丁正粱等.上海实验动物科学.1986?6(3),155 , 158 11ThOFt~IX.WEandD.J.E?r.B|—?u自- Thuringiemisvaf.1?d?8crys~efId"?血l eff.e乜ofinsectandmammaUancelb抽vitro andvivo.J.CellSet.1983.60l181,188 12Thomas.BandD.J.胁.M酏hI蛐 of8ctionorb.~hurinsiemisvar.isrzwlensis insecticidal~-eridotoxin.F隧Letters.1983.184 31