安坎速对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响

安坎速对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响 安坎速对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影 响 2009年8月第11卷第4期 August.2009.Vo1.11,No.4 湖北中医学院 JournalofHubeiUniversityofChineseMedicine 安坎速对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响 朱玲萍,巴元明,李航森 (1.湖北中医学院2006级硕士研究生,湖北武汉430061;2.湖北省中医院,湖北武汉430061) 摘要:目的观察安坎速对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力的影响.方法取体重18,22g昆明小鼠5O只,随机分为 生理盐水组,环磷酰胺组和安坎速低,中,高剂量组.治疗2周后腹腔注射5%鸡红细胞悬液,8—12h后处死动物,抽出 腹腔洗液,油镜下计数玻片巨噬细胞,计算吞噬指数和吞噬百分率.结果安坎速低,中,高剂量组与生理盐水组及环磷 酰胺组比较,吞噬指数,吞噬百分率均显着性升高(尸<0.01),而环磷酰胺组与生理盐水比较,吞噬指数,吞噬百分率两 项指标略有降低,但无统计学意义(P>O.05).结论安坎速能显着性提升小鼠腹腔巨噬细胞吞噬指数和吞噬百分率, 提示其可促进机体免疫状态. 关键词:安坎速;腹腔巨噬细胞;吞噬能力 中图分类号:R285.5文献标识码:A文章编号:1008-987XI2009)04—0011—02 TheinfluencesofAnkansuontheswallowfunctionofthe peritonealmacrophageofmice ZHULin—ping,BAYuan—ming,LIHang—sen (1.HubeiUniversityofChineseMedicine,Wuhan,Hubei430061; 2.HubeiHospitalofTraditionalChineseMedicine,Wuhan,Hubei430061) AbstractObjectiveToobservetheimpactofAnkansuonthephagocytosisofperitonealmacmphageinmice.Methods50Kunming mice,weighingfrom18to22g,wererandomlydividedintonormalsalinecontrolgroup,cyelophosphamidegroup,andAnkansugroups(sub— groups 鹊:lowdose,middledoseandhighdose).Aftertwoweekstreatmentallmicewereintraperitoneallyadministratedwith5%suspension ofchickenredbloodcell(CRBC).Thenthemiceweresacrificedafter8— 12hoursandextractedabdominallotion.Numberofmacrophages wascountedunderoillens,andthephagocyticindexandphagocyticpercentagewerecalculated.ResultComparingwithothergroups,the phagocyticindexandphagocyticpercentageinlow,middleandhighdoseAnkansugroupsincreasedsignificantly(P<0.01).Thephagocytic indexandphagocyticpercentageincyclophosphamidegroupwerelowerthannomlalsalinegroup,whilenostatisticalsignificancewasobserved (P>0.05).ConclusionAnkansucansignificantlyenhancephagocyticindexandphagocyticpercentageofperitonealmacrophageinmice, whichimpliesthatitCanpromotebodyimmunity. KeywordsAnkansu;peritonealmacrophage;phagocyticactivity 中医对疾病的治疗着眼于整体论治,标本兼顾,更重视调动 人体自身的抗病能力,即调节机体内环境,增强机体免疫功能. 补益中药可促进机体免疫功能….本研究观察安坎速对机体免 疫功能的影响. 1材料与方法 1.1动物 健康昆明小鼠,体重18—22g,雌雄各半(由华中科技大学同 济医学院动物中心提供);公鸡(市购). 1.2药物 安坎速口服液(药物配方取自于张仲景的半夏泻心汤,由湖 作者简介:朱玲萍(1970一),女,湖北省中医院主治医师. 北省中医院制剂室制备);环磷酰胺(4mg/mL,上海华联制药有 限公司产品,批号:050826). 1.3试剂与仪器 阿氏溶液,2%碘酊,75%酒精,松柏油,生理盐水,5%鸡红细 胞悬液,4%姬姆萨一瑞氏染液(均由湖北省中医院检验中心提 供).DS一1型电子称(武汉自动化仪器仪厂),LG10—3医用 离心机(北京医用离心机厂),HW一2型恒温孵箱(重庆医疗机 械厂),HB一2型生物显微镜(日本株式会社),SN695B型Y测量 仪(上海日环光电仪器有限公司). ? l2?湖北中医学院2009年第l1卷第4期 1.45%鸡红细胞悬液(CP~C)制备 鸡翼下静脉无菌采血,置于三角烧瓶中,加入相当于血液量5倍 的阿氏液,摇匀,4~C冰箱贮存.使用时生理盐水洗涤3次,1500r/rain 分离红细胞2次,2000r/rain分离1次,每次5nfin,至红细胞压积恒 定.然后按此压积量,用生理盐水配成2%-5%(v/v)浓度. 1.5动物分组及给药方法 小鼠随机分为生理盐水组,环磷酰胺组和安坎速低,中,高 剂量组,每组lO只.环磷酰胺腹腔注射0.2mL/(O.04g/mL),每 3天1次;安坎速灌胃0.5mL(低,中,高剂量组分别含生药 0.25g/mE,0.5g/mL,lg/mL),每天1次;生理盐水组予等容积生 理盐水灌胃,每天1次,共两周. 1.6取材与指标检测 末次给药后2h,各组小鼠腹腔注射5%鸡红细胞lmL,8— 12h后动物脱颈椎处死,仰位固定于鼠板.剪开腹部皮肤,经腹 腔注入生理盐水2mL,转动固定板lmin,然后抽出腹腔洗液 lmL,滴涂于干净载玻片上,每片0.2mL,每鼠2片,放在垫有湿 纱布的搪瓷盒中,置37%孵箱中温育30rain后取出玻片,投入生 理盐水中漂洗,以除去未贴片的细胞,凉干处理,以丙酮一甲醇 液1:1固定5min,再用4%姬姆萨一瑞氏染液染色3min后用 蒸馏水漂洗,晾干.在油镜下每片计数巨噬细胞200个,按下式 计算吞噬指数和吞噬百分率. 吞噬指数=(被吞噬的鸡红细胞总数/200个吞噬细胞)/2 吞噬百分率=(吞噬鸡红细胞的巨噬细胞总数/2oo个吞噬细胞) ×100%. 1.7统计学方法 实验数据以均数?差(?s)表示,两组间比较采用t检 验,多组问比较用单因素方差分析. 2结果 安坎速低,中,高剂量组与生理盐水组比较,吞噬指数,吞噬 百分率均显着性升高(P<0.01);与环磷酰胺组比较,吞噬指数, 吞噬百分率也均显着性升高(P<0.O1);而环磷酰胺组与生理盐 水组比较,吞噬指数,吞噬百分率两项指标略有降低,但无统计 学意义(P>0.05),结果见表1. 表1对小鼠腹腔吞噬细胞吞噬功能的影响(牙?s) 与生理盐水组及环磷酰胺组比较,十P<O.Ol. 4讨论 中医治病是有其独特的规律的,这一规律就是"辨证治疗" 或"随症治疗",是根据人体患病后所反映出的症状,用适应症状 的药物治疗的一种调节机能的治疗法.庞祝如将其归纳为 三点:一是非特殊性,即几乎所有疾病都可适用;二是注意于患 者的生理机转的促进,而不直接注意于病原和症状的消灭;三是 整体性,即照顾到患者整体的生理机转,根据全身证候而采取相 适应的综合疗法.它的内容原理是根据机体抗病的生理机转的 反射性现象,给予相应的扶助和调节,使机体的生理机能战胜病 因的侵害,而恢复其正常状态.冯世纶H将其定义为:于患病人 体一般的规律反应的基础上,而适应整体,讲求疾病的通治方 法.最能体现中医这种治疗规律的,就是张仲景的《伤寒杂病 论》.本实验所用安坎速为张仲景的半夏泻心汤原方,从方药组 成及用量可知,方以驱邪为主,兼顾扶正.方中人参,甘草,大枣 甘温益气补其虚,半夏,干姜辛散开结散寒,与人参,甘草,大枣 配伍升补清阳,黄连,黄芩苦降清热以泄其浊阴.纵观全方一方 面用辛开苦降,寒温并投以祛"客邪",另一方面用甘温调补以扶 正,同时正复方能邪祛,也是驱除"客邪"之前提. 现代研究表明:在免疫反应过程中巨噬细胞具有吞噬与分 解异物,杀死及消化病原体,杀伤肿瘤细胞的作用以及在免疫应 答中的作用】.巨噬细胞表面有膜受体可引起一系列代谢及功 能的变化,对于细胞的吞饮,吞噬,识别,趋化,运动,分裂,生长 及免疫反应等活动均起着关键的作用.本实验用现代医学的手 段观察安坎速对机体免疫功能的影响,结果显示,安坎速具有显 着性提升小鼠腹腔巨噬细胞吞噬指数和吞噬百分率的功效,且 与药物呈剂量依赖关系.提示安坎速能促进机体的免疫状态, 印证了中医理论的指导性原则. 参考文献: [1]马振亚.中药方剂免疫药理研究[M].西安:陕西科学技术出版社, 1986:96. [2]花宝金,鲍艳举.半夏泻心汤治肿瘤体悟[J].中医杂志,2007,48 (1):20. [3]庞祝如.从《伤寒论》体会中医的治疗规律[J].中医杂志,1956(4): 179—181. [4]冯世纶,张长恩.中国汤液经方[M】.北京:人民军医出版社,2005: 32—33. [5]陈爱葵,龙晓凤,张树地,等.冬虫夏草精粉对小白鼠免疫功能的影 响研究[J].中医药学刊,2004,22(9):1757. (收稿日期:2009—03—12编辑:林飞)