【doc】血,尿中阿普唑仑的薄层色谱检测研究

【doc】血,尿中阿普唑仑的薄层色谱检测研究 血,尿中阿普唑仑的薄层色谱检测研究 西医学院(JShanxiMedCol[)1996Vol27No.4 b26上 血,尿中阿普唑仑的薄层色谱检测研究 ?』f,t4-0@ 尺乎 蔓主..型.季责明.贺娟 (.山而医科大学法医学系太原030001.IIJ西省心血管病研究所山西平陆县人民医院) ,^摘要建立r血清和尿中阿普唑它的薄层色谱扫描定性定量检测方法t经染毒家免血, 尿中和中毒患者 的阿普唑它的检测,旺明该方法是阿谱唑仑巾毒?速诊断的可靠方法 苎竺壁垒堕苎,蔓垦妞谩孳中圉号Dgl92 阿普唑仑(alprazolam),又名佳静安 定,佳乐安定,甲基三唑安定等,是一种 三唑苯二氮苎类安定药,近年来临床应用 越来越广.临床服药自杀的病例呈上升趋 势.本文从临床中毒病人快速诊断实际出 发,建立了血清,尿中阿普唑仑的薄层色 谱扫描定性定量检测方法,并用于阿普唑 仑中毒的快速分析. 1材料和方法 1.1试剂和药品阿普唑仑片剂0.4 rag/片(太原振兴制药厂),阿普唑仑纯品 由本室从片剂中提取纯化,其余试剂为分 析纯.阿谱唑仑溶液;0735g/L乙醇 溶液. 12仪器和薄层色谱条件CS?930薄层 色谱扫描仪,氢灯(日本岛津);紫外灯: 波长为254nm和365am.薄层板:GF254 10cm×10cm×0.25cm(青岛海洋化工 厂),临用前120C活化20min.展开剂:正 庚烷:氯仿;乙酸乙酯;乙醇(5;2:2: 2),上行展开5,7cm.检测条件:CS930 薄层扫描仪,氢灯;光谱扫描:2O0,370 am,NormaI和Difference扫描方式, 吸光度:色谱扫描:=225nm.一350 nm,SX一7,锯齿形扫描,记录峰面积. 1,3提取方法血清或尿液2ml,加无 水碳酸钠0.5g,乙醚二氯甲烷(3:2)6 mI,振荡15min,静置1h,3000r/min 离心5min,分出有机层,残渣再用4ml乙 醚一二氯甲烷提取1次,合并两次萃取液, 40C水浴挥干.20l氯仿定容,l0点 样,按前述方法展开,扫描检测. 1.4动物实验家免5只,按成人每日最 大用量100倍剂量换算.,21mg/kg灌胃 给药后4h断头取血,尿,按上述方法检测 阿普唑仑含量. 1,5中毒患者标本采集静脉血5ml, 尿jOm【和洗胃液100,200ml立即送 检. 2结果 2.1薄层层析及扫描阿谱唑仑薄层层 析RF值为0.31,光谱扫描:阿普唑仑在 200,370am之间有两个特征吸收峰,最 大吸收波长225am和245nm,色谱扫描 显示阿普唑仑可与代谢物及其他常见苯二 氮董类药物相分离. 2.2薄层扫描响应曲线和扫描精密度 阿普唑仑标准溶液05,l,2,4,6,8, l0I点于薄层板上按上述条件展开,扫 描.斑点扫描面积积分值(y)与斑苣内药 山西医学院(JShanxiMedCoil)1996Vo1.27No.4 物含量()之间线性响应关系良好,直线 回归方程为y一28602.9X4-4570.2,r一 衰1阿普唑仑的扫描精密度 0.995,P<O.05(,).斑点内不同剂量阿 谱唑仑的板内扫描精密度见表1. 2.3工作曲线和提取回收率每种空白 检材6份,各分别加入阿普唑仑标准溶液 1,2,4,6,8,101,按前述方法提取检 测,建立每种检材内阿普唑仑的提取检测 工作曲线.血,尿中最小检出浓度为0.367 5mg/L,线性范围为0.3675,7.35mg/ L.线性回归方程为血:Y=5.937×10X 一 0.1531,r一0.996;尿:Y一4.258×10 一 0.1043,r一0.997,式中y为检材中 阿普唑仑含量(mg/L),X为斑点扫描面 积积分值.空白血清添加2.205g,4.41 g和7.35g阿普唑仑的提取回收率(z 土'一5)为96.7?2.4,98.1土3.1% 和95.3土3.1;空白尿添加2.205ug, 4.41g和7.35g阿普唑仑的提取回收 率士;一5)98.4土2.7,9j.2土2.3 和96.7土2.8. 2.4动物实验结果5只家兔染毒后4b )为 血清和尿中阿普唑仑检测含量(土 4.0土1.3和8.6土2.4mg/L. 2.5中毒病人检测结果5例昏迷病人 血和尿中检出阿普唑仑,检材提取物RF 值和光谱扫描图均为阿普唑仑一致.5例 中毒患者血清中阿普仑唑浓度为0.027 mg/L,0-014mg/L,0-029mg/L,0-019 mg/L和0.022mg/L,z土为0.022土 0.006mg/L. 3讨论 3.1提取和薄层色谱本文建立的血清 和尿中阿普唑仑的提取和薄层色谱定性定 量检测方法与已气相或液相色谱 法相比,具有提取回收率高,提取溶 剂毒性小,操作简便快速,定性准确,不 破坏斑点内药物的特点,更适合于临床阿 普唑仑中毒患者的快速毒物分析诊断无 薄层扫描仪的基层单位可用值定性, 通过斑点显色后颜色的强弱或斑点在紫外 灯下荧光淬灭的程度可目测半定量,特别 适合基层医院开展. 3.2动物实验和中毒病人检测动物实 验结果表明家兔染毒4h时,其尿中阿普 唑仑浓度高于血清中浓度,提示尿也是极 好定性检材.中毒病人血清中阿普唑仑检 测结果提示阿普唑仑中毒血清浓度在 0.01mg/L以上,但因例数较少,还需进 一 步积累资料. 参考文献 1周自永,王世榉.新编常用药物手册.北京: 盒盾出版杜,1992:64 2冯翠玲,刘荫棠,罗毅.安眠镇静药物的固相 萃取法和气相色谱法研究.全国第二届毒物 分析学术交流会论文集.北京:开明出版社, 1993:47,59 3文丽荣.Rp—HPLC法同时测定血浆中阿普唑 仑和多虑平.药物分析杂志,1994;14(1)3 McCormickSR.Quantificationora[prazolam inserumofplasmabyliqidchromatography. Clinchem,1984;30(1O){1652 [1996—03—06收稿]