野马追对小鼠气管冲洗液中左氧氟沙星浓度的影响

野马追对小鼠气管冲洗液中左氧氟沙星浓度的影响 野马追对小鼠气管冲洗液中左氧氟沙星浓 度的影响 重庆医科大学2007年第32卷第l2期【JournalofChongqingMedicalUniversity2007.Vo1.32N0.12)一1311一 临床研究文章编号:0253—3626(2007)12—1311—03 野马追对小鼠气管冲洗液中左氧氟沙星浓度的影响 张斯汉,周远大,何海霞 (重庆医科大学附属第一医院临床药理研究室,重庆400016) 【摘要】目的:探讨野马追对小鼠气管冲洗液中左氧氟沙星浓度的影响.方法:50只小鼠随机分为空白,氯化铵,野马追大,中, 小剂量组,每组10只,分别给予生理盐水30ml/kg,氯化铵1.00g/kg,野马追大剂量64.45g(生药)/kg,中剂量32.73g(生药),I【g,小 剂量16.36g(生药)/kg后1h,各组动物腹腔注射左氧氟沙星0.07g/kg,2h后处死动物,收集小鼠气管冲洗液,高效液相色谱检测 其中左氧氟沙星浓度.结果:野马追大,中,小剂量组小鼠气管冲洗液中的左氧氟沙星浓度分别约为空白组小鼠的4.58,3.18, 1.86倍.结论:野马追能提高小鼠气管冲洗液中左氧氟沙星的浓度. 【关键词】野马追;左氧氟沙星;小鼠;气管;浓度 【中国图书分类法分类号】R969.2【文献标识码】B【收稿13期】2007—04—20 TheeffectofyemazhuiOnconcentrationofIevofloxacin inrinsesolutionofmicetracheae zHANGSihanet.al (ClinicalPharmacologyLaboratory,theFirstAffiliatedHospital,ChongqingMedicalUniv ersity) 【Abstract】Objective:Tostudytheeffectofyemazhuionconcentrationoflevofloxacininrinsesolutiono fmicetracheae. Methods:50micewererandomlydividedintoblankgroup,amchlorgroup,yemazhuilarge-dosegroup,yemazhuimiddle-dose group,yemazhuilow-dosegroup,eachgrouphad10mice.Afteradministrationofliquornatriichloridiisotonicus(NS)30 ml/10kg,amchlor1.00g/kg,yemazhuilargedose64.45g(curdedrug)/kg,yemazhuimiddledose32.73g(curdedrug)/kg,yemazhui lowdose16.36g(curdedrug)/kg.micewereintraperitonealinjectedlevofloxacinatdosageof0.07g/kg2hoursafteradministration. TheconcentrationoflevofloxacininexcretionofmicetracheaewasdetectedbyHPLC.Results:Comparionwithblankgroup, concentrationoflevofloxacininexcretionofmicetracheaeofyemazhuilarge-dosegroup,yemazhuimiddle—dosegroup,yemazhui low— dosegroupwas4.58times,3.18times,1.86timestheamoutofthat.Conclusion:Yemazhuicanenhanceconcentrationof levofloxacininrinsesolutionofmicetracheae. 【KeywordslYemazhu;Levofloxacin;Mice;Tunicamucosatracheae;Concentration 野马追是菊科泽兰属植物轮叶泽兰Eupatorium lindleyanumDC的全草,多年生草本植物,分布于华 东,华南,华北,东北及台湾等地,具有清热解毒,祛 痰定喘,降血压的功效,用于治疗慢性气管炎,支气 管炎,高血压病.野马追所含的有效成分包括:黄酮 类(Flavonoids),挥发油(Aetherolea),生物碱(Alka— loid)等Il】.左氧氟沙星是氟喹诺酮类广谱抗生素,主 要用于呼吸系统和泌尿生殖系统感染,其抗菌活性 具有浓度依赖性[21,本实验旨在探讨野马追是否能 提高左氧氟沙星在小鼠气管粘膜面的浓度,从而 对左氧氟沙星抑制气道感染有无促进作用. 作者介绍:张斯汉(1976一),男,在读硕士, 主要研究方向:临床药理学. 1材料和方法 1.1仪器 高效液相色谱,C—R7APLUS型,SHIMADZU公司生产. 色谱柱,GEMINI—Cl8柱(250mmX4.6mm,50m).酸度计 PHS一3C,上海精密科学仪器有限公司.快速混合器VXH一3 型,上海跃进医疗器械厂.离心机,B160A型医用低速离心 机,河北省安新县白洋离心机厂.电子天平,BP61型,德国 Sartorius公司. 1.2受试药物和试剂 野马追浓缩液,江苏安格集团提供,批号,20050320,经 重庆市中药研究所重新提取后使用.左氧氟沙星,结晶粉末, 上海友盛化工科技有限公司生产,批号990408.加替沙星, 河南康泰制药集团,批号040925.二氯甲烷和甲醇为色谱 一 1312一重庆医科大学21107年第32卷第12期 (JoumalofChongqingMedicalUniversity2007.Vo1.32No.12) 纯,其余试剂均为分析纯.纯化水由重庆医科大学附属医院 制剂室提供. 1.3动物 健康合格一级昆明种小鼠60只,18,22g,雌雄各半,由 重庆医科大学动物实验中心提供,合格证号SCXK(渝) 20020001.禁水不禁食12h备用. 1.4色谱条件 色谱柱GEMINI—Cl8柱,250mmX46mm,50m.流动相[31 为0.01mol/ml磷酸二氢钾一甲醇一三乙胺(65:34.8:0.2),用 磷酸调pH值到3.0,体积流量1.2ml/min.检测波长292mm. 柱温30?,进样量50l. 1.5样品制备 18,22g昆明种小鼠60只,随机分5组,每组10只(剩余 10只制备空白灌洗液).参照文献[41,生理盐水组,氯化胺组, 野马追大,中,小剂量组分别ig生理盐水30ml/kg,氯化铵 1.00g/kg,野马追浓缩液65.45g/kg,32.73g/kg,16.36g/kg(为其 LD的1/5,1/10,1/20).根据相关文献121,各组在给药1h后 ip0.365%的左氧氟沙星溶液0.073g/kg,2h后处死小鼠.剪 取气管,用lml蒸馏水冲洗,收集冲洗液并/Jt]_-氯甲烷4ml 萃取,同时加内标加替沙星100l(5gCm1),快速混匀 lmin,然后置3500r/min离心5min,静置分层.取二氯甲烷层 清液,50?水浴中氮气吹干,流动相复溶100l备用. 1.6方法学考察 1.6.1色谱行为见图1. 1.6.2曲线制备精密称取左氧氟沙星标准对照品若 干,加甲醇制成浓度分别为1.56,3.13,6.25,12.50,25.00, 50.00g/ml的溶液,各进样50l.按上述色谱条件测定峰面 积,以所取左氧氟沙星溶液浓度为横坐标,以左氧氟沙星和 内标(加替沙星)峰面积之比为纵坐标,求得标准曲线: Y--0.482,1X一0.1461,r=0.9998,表明左氧氟沙星在 0.16,50.00gCml范围内有良好的线性关系. 1.6.3精密度和回收率精密称取左氧氟沙星标准品若干, A 1一左氧氟沙星2一加替沙星 A一空白灌洗液B一左氧氟沙星+加替沙星(水中)C一实验组 图1野马追对小鼠气管冲洗液中左氧氟沙星浓度的影响(色谱图) 加人空白气管冲洗液,按1.5项下相关操作,配成高,中,低3 个浓度,每个浓度各进5针.测定其Et间,日内差见精密度及 回收率见表1. 2结果 按上述方法所测得的左氧氟沙星在小鼠气管 冲洗液中的浓度见表2. 表1精密度和回收率(n=5J 重庆医科大学2007年第32卷第12期 (JoumalofChongqingMedicalUniversity2O07.Vo1.32N0.12)一1313一 与生理盐水组比较,<0.05,<0.01.野 马追大,中,小剂量组小鼠气管中的左氧氟沙星浓 度分别约为空白组小鼠的4.58,3.18,1.86倍.野马 追大,中,小剂量组之间也有显着性差异. 3讨论 近年来,随着野马追产品在临床的广泛使用, 人们对其各方面展开了全面和深入的研究,但较多 的是在药效学方面.有文献研究了野马追镇咳,祛 痰,平喘,抗炎,抗菌的作用;研究了其一般药理学 作用嘲;有文献指出野马追对豚鼠离体平滑肌有松 弛作用【6】.但在野马追和其它药物的相互作用方面 研究较少,本实验探讨野马追对临床常用抗生素左 氧氟沙星代谢的作用,主要研究了野马追对左氧氟 沙星在小鼠气管分布的影响.左氧氟沙星是氧氟沙 星的左旋体,具有广谱抗菌活性,对革兰氏阳性和 阴性菌及其它微生物都有作用,能同时抑制细菌的 DNA解螺旋酶和拓扑异构酶而抑制细菌繁殖[21,在呼 吸系统疾病中有广泛的用途.根据实验结果,野马 追能显着提高小鼠气管冲洗液中左氧氟沙星的浓 度,且有量效关系;其作用明显强于氯化铵.据相关 文献【4】,两者在促进小鼠气管酚红分泌的实验中,氯 化铵的效果要强于野马追,故可能两者促进左氧氟 沙星在小鼠气管中的分布和促进酚红分泌的机制 是不同的.原因可能是因为氯化铵促进酚红在小鼠 气管的分泌是通过增强腺体的分泌,酚红在体内主 要与白蛋白结合,通过此种方式分泌到气管中;而 左氧氟沙星是小分子物质,且蛋白结合率低,透过 生物膜的方式主要是自由扩散,在气管粘膜的分布 主要依赖局部血流.野马追可能通过扩张气管局部 血管,促进左氧氟沙星向气管粘膜顺浓度梯度扩散. 野马追促进左氧氟沙星在小鼠气管中分布的机制 研究还有待进一步探讨. 参考文献 【l】江苏新医学院.《中药学大辞典》(下册)【M】.上海:上海科学技术 出版社,1999.2130(4365). 【2】KatherineF,Croom,CarenL.Goa.Levofloxacin—AreviewofIts UseintheTreatmentofBacterierInfectionsintheUnitedStates[J]. 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