咬合干扰致大鼠咀嚼肌机械性痛觉敏感的动物行为学及中枢外周机制

咬合干扰致大鼠咀嚼肌机械性痛觉敏感的动物行为学及中枢外周机制 浙江大学 硕士学位咬合干扰致大鼠咀嚼肌机械性痛觉敏感的动物行为学及中枢外 周机制研究 姓名:俞燕芳 申请学位级别:硕士 专业:口腔临床医学 指导教师:谷志远傅开元 20050401—— ( 堂至奎兰堕圭兰壁丝苎 咬合干扰致大鼠咀嚼肌机械性痛觉敏感的 动物行为学及中枢外周机制研究 专 业, 口腔临床窖?硕士生, 俞燕芳 导 师, 谷志远教授 傅开元教授 中文摘要 咀嚼肌疼痛是颞下颌关节紊乱病(,,,)患者常见的症状，以往的临床实验研究发现咬合干扰是引起咀嚼肌疼痛的重要原因之一，但是这种疼痛产生的机制还不明了，且很少有人进行动物行为学方面的研究。本研究建立了大鼠单侧高骀韵咬合干扰模型，测量咬合干扰前后大鼠咬肌和颞肌对机械性刺激痛觉阈值的变化，研究咬合干扰后咬肌组织学和,物质(,,,,,,,;, ,，,,)表达的变化，进,步用半定量研究咬合干扰后伤害性刺激引起脑干和上部颈髓;—,,,和,,表达的变化，探讨咬合干扰致咀嚼肌痛觉敏感的外周中枢机制。 咬合干扰动物模型的建立:,,只,,,,,,,,,,,,,,(,,)雄性大鼠，分两组，实验组大鼠,只，大鼠左上颌第,后牙牙,面开髓封金属砷失活剂，实验组大鼠一周后牙缅洞型内放入一牙用固位钉(高出骀面,(,,,(,,,)，复合树脂粘接固定。对照组,只失活牙髓后不埋固位钉，树脂充填。在动物清醒和放松状态下，用,,,, ,,,,尼龙毛测量咬肌和颢肌的机械性痛觉敏感性，咬合干扰形成后,天，,天各处死一批动物，取咬肌和颞肌组织做,,免疫组化和,,染色，镜下观察。另取,,只大鼠，分两组，实验组大鼠,只，同上述方法建立咬合干扰 新江大学硕士学位论文模型，对照组大鼠,只，失活牙髓后不埋固位钉。咬合干扰形成后,,，每组大鼠取,只，在浅麻醉下对左侧咬肌区行机械性刺激，记录有疼痛反应次数，,小时后处死动物。另取每组大鼠,只，在深麻醉下对左侧咬肌区注射,,福尔马林液，,小时后处死动物。取大鼠脑干组织，横向连续冰冻切片，机械刺激组用,,,,漂染法做;—,,,、,,免疫组化，化学刺激组只行;—,,,免疫组化。 忻庖咦榛 糠治觯 恪 妫铮笙晕?迪轮苯蛹剖 螅薪 型枷蠓治觥?咬合干扰可以引起大鼠高牙锨,咬肌和颞肌机械性的痛觉敏感，咬合干扰后咬肌和颞肌组织学观察发现，有局部肌纤维的破坏，但没有观察到炎症性的变化。咬合干扰,天组，高牙台测咬肌,,局部表达增多。咬合干扰,天后大鼠浅麻醉下咬肌区给予机械性刺激，发现动物对机械刺激疼痛敏感性增加。,,,,,在脑干,,,,水平和颈髓;卜,水平有两个表达高峰。机械刺激和化学刺激，咬合干扰组动物在,,,,水平的,;,,,部位和;卜,水平颈髓背角，一?层咬合增高侧; ,,,,表达均明显比对照组高(,,,(,,)。机械性刺激，咬合增高侧,,表达在,,,,水平,;,,,部位咬合干扰组明显比对照组高(,,,(,,)，在颈髓,卜,水平咬合增高侧,,表达咬合干扰组比对照组增高不明显(,,,(,,,)。通过以上研究，得出以下结论:,(建立了大鼠单侧高黯的咬合干扰动物模型，进行动物行为学研究，可以导致 确切的咀嚼肌机械性痛觉敏感。,(咬合干扰致咀嚼肌痛觉敏感的的外周机制和咀嚼肌组织的局部损伤及外周 神经纤维末梢某些神经递质释放增多有关。,(咬合干扰可以引起脑干和颈髓中枢神经元的敏化，是咬合干扰致咀嚼肌疼痛 的中枢机制之一。关键词:皎合干扰咀嚼肌机械性痛觉敏感脑干脊髓中枢神经元敏化免疫组化; ,,, ,物质一——一————一一 塑堡奎兰堡兰兰篁堡兰 ,,, ,,,,, ,, ,,,,,,,,,,,,,,,,,,,, , ,, ;,,,,,, ,,;,,,,,,, ,, ,,,,,,,,,,, ,,,;,,, ,,;,,,,;,, ,,,,,,,,,,,, ,,,,;,, ,, ,;;,,,,, ,,,,,, ,, ,,,, ,,,;,,,,,,:,,,,,,,,,,, ,,,, ,,,,,,,, ,,,,,,,:,, ,,,,,,, ,,,,;,,,:,,,,(,, ,,,,,,, ,,,,(,, ,,,,,,, ,,,,,,;, ,,,;,, ,,,, ,, ,,, ,, ,,, ,,,, ,,,？,,,, ,,,,,,,, ,, ,,, ,,,,,,,，,,, ,,,,,,,,,, ,;;,,,,, ,,,,,,,,,,;, ,,, ;,,,,,,,,, ,, ,, ,,, ,,,,,,,,, ,,;,,,(,,,,,, ,, ,,,,,,,,,, ,,, ,,,, ,,;,,,,,,,(，, ,,, ,,,,,，,, ,,,,,, ,,,,, ,, ,;;,,,,, ,,,,,,,,,, ,,,,,,,,,,,, ,,, ,,,, ,,,,,,,,, ,, ,,, ,,,,,,,, ,,, ,,, ;,,, ,,,,;,,,,;,, ,,,,,,,,,,,,,,, ,,, ,,,,,, ,,,, ,,,,,,,,,,,,(,,,,,,,,,; ,,, ,,,,,,,;, ,,,,,,,,,,,,;,,,,;,, ;,,,,,, ,, ,,, ,,,,,,,, ,,,;,,, ,,,, ,,,,,,,(,—,,, ,,,,,,,,,,;, , ,,,,,,,,,,,;,,, ,,,,,,,,, ,,, ,,,,, ;,,,;,, ;,,,,,, ,, ,,;,, ,,,,,,;,,, ,,,, ,,,, ,,,,,,,,,,,,， ,,, ,,,,, ,,,,,,,,, ,,,, ,,,,, ,,,, ,,,,,,, ,,,, ,,,,,,,—,,,,,, ,,,, ,,,,,,,;,,,(,,, ,;;,,,,, ,,,,,;, ,, ,,, , ,,,, ,,, ,,,,,, ,(,—, ,, ,, ,,,,,,, , ,;,,,,, ,,, ,,,, ;,,,,, ,,,;, ,,, ,,,,,, ,,, ,,,,,,,,,,, ,,, ,,,, ,,,,,,，,,, ,,,,, , ,,,,,,,, ,,,,,,,, ,,,, ,,,,,,,,,,;,,,,,, ,,,,, ,, ;,,,,,,(,,;,,,,;,, ,,,, ,,,,,,,, ,,,,,,,,,, ,, ,,, ,,,,, ,,,, ,,,,,,, ,,,,,,,,,，,, ,,,,,,,,,,, ,,,,,,,, ,,, ,,,,,,,,,,,,,, ,,, ,,,, ,,,,,,,,,(,,, ,,,,,,, ,,,, ,,,,,, ,, , ,,, , ,,,,(,,,,,,,, ,,,,,,, ,——一一 塑坚查堂堡主堂垒丝壅,,,, ,,, ,,,, ,,,, ,,,,,,,,,,,, ,,,,,,,,,;,, ,,, ,,,,,,,;, , ,,,,,,,,,,,;,,,,;,,;,,,,,,(,,, ,,,,，,,,,,,, ,,,,,,, ,,,, ,,,,,,,?,,,,,, ,,,, ,,,, ,,,,,,, ,,,, ,,,,,,,,,，,,,,, ,,,, ,,,, ,,,, ,;;,,,,, ,,,,,,,,,,;, ,, ,,,,,，,,, ,,,,, ,,,,, ,,,,,,,,,,, ,, ;,,,,,,(, ,,,, ,,,,, ,;;,,,,, ,,,,,,,,,,;,，,,,, ,,,, ,, ,,;, ,,, ,, ,,,,,,,,, ,,,,,,,,,,,, ,,, ,,;,;,,,,,, ,,;,,,,;,, ,,,,,,,(,,, ,,,, ,,,,,,,,),,,,,,,,,,, ,, ,,, ,,,,,,,,,,, ,,,,,,,,(,,,, ,,,,,,,, ,,, ,,;,,,,, ,,, ,,, ,,, ,,,,,,,,,,, ,,,,,, , ,,,,, ,,,,,(,,,,,,, ,,,, ,,,, ,, ,,;, ,,,,, ,,,, ,,,, ,,,,,,,,,,,, ,,,,,;,;,,,,,, ;,,,,;,, ,,,,,,,,,,, ,,,,,,,,,,,),,,, ,,,,,,, ,, ,,, ,,,,,,,,,,,,,,,,,,,，, ,,,,, ,,,,,，,,, ,,,, ,,,, ,,,,,,(,,, ,,,,,,,,, ,,, ;,,,,;,, ,,,,,, ;,,,,,,,,, ,,,, ,一,, ,,,,,,, ,, ,一,, ;,,,,, ,, ,,,, ,,, ,,,,,,,(,,, ,,,,,, ,,,,,, ,,,,,,,,,,,,,,, ,, ,,,;,，,,,;,,,,, ;—,,, ,,;,, ,,,, ,, ,,,,,,,;,,,,,, ,,, ,,, ,,,,,,,,,, ,,,;,,,,, ,,,,,,,;, , ,,,,,,,,,;,,,,,, ,,,, ,,, ,,;,,,,;,, ,,,,,,,,,, ,,,,,,,(,,,,,,,,,,, ,,,,,,,,:,,;;,,,,,, , ,,,,,, ,,, ,,,,, ,, ,,,, ,,, ;,一, ,,,,, ,,, ,, ,,,,,,,;,,, ,,, ,—,,, ,,,,,,,,,, ,,,, ？,,,,,,,,, ,,,,, ,,;,,,;,,, ,,, ,,,,,,,,,,,;,,,,,, ,,,, ,,,,, ,,,,,,,,( ,;;,,,,, ,,,,,,,,,,;, ,,,,;,, ,,,;,, ,,;,,,,;,, ,,,,,,,,,,,, ,, ,,, ,,,,,,,,,,,,,,, ,, ,,,, ,,, ,,,,,,,, ,,, ,,, ,,,,,,,,,, ,,,;,,,(,, ,,,,,,,,,,,, ;,,,,,, ,,,,,,,,,,,,，,,, ,,,;,,—,,,,, ,,,,,,;,,,, ,,, ,,,,,(,,,,, ,,,, ,,,, ,,;,,,,,, ,,,,, ,,,,,,,,,;, , ,,,,,,,,,;,,,,,, ,,,,, ,, ,,, ,,,,,,,,,,, ,,,, ,, ,,, ,,,,,,,, ,,,;,,,,,,,,,,,, ,;;,,,,, ,,,,,,,,,,;,(, ,,,, ,,,,, ,,;,,,,, ,,,,,,,,,,;, ,,, ,,,,,,,,,,,,,,,,,,, ,, ,;;,,,,, ,,,,,,,,,,;, ,,,,, ,,,,,,,,, ,,,,,,;,,,,,, ,, ,,;,,,,;,,,,,,,,,,,,, ,,,,, ,,,,, ,,,,,,,,,,(,,;,,,,;,, ,,,,;,,,,,, ,,,,,,, ,,, ,,;,;,,,,,,;,,,,;,, ,,,,,,, ,, ,,, ,,,,,,,,,,, ,,,,,,,, ,,,,;,, ,,;,,,,,,, ,,,,,,,, ,,,,,,,,,,,,,,, ,, ,,, ,,,,,,,,,, ,,;,,,, ,,,,; ,,,, ,, ,,,, ,,,,, ,,, ,, ,,,,,,, ，,，,,,,,, ;,,, ,,,,,, ,,,,,, ,,,, ,,;,,,, ,, ,,, ,,,,, ,,,;;,,,,, ,,,,,,,,,,;,(,,,(,,)(,,, ,,;,,,,;,, ,,,,,,,,,, ,,,,,,,，,, ,,,,,,,,,, ,, ,,, ,,,,,,,,,, ,,;,,,, ,,,,;,,,,,,,,,, ,,,, ,,, ,,;,,,,,, ,, ,,, ,,,,, ,,,;;,,,,, ,,,,,,,,,,;,(,,,(,,)( , 浙江大学硕士学位论文,,,,,, ,,,,, ,,,,,,;,，,, ,;,,,,,, ,,,,,,,,, ;,,;,,,,,,,: ,(,,, ,,,, ,,,,,,,, ,,,,,, ,,,,, ,,,,,,,,, ,,,, ,;;,,,,, ,,,,,,,,,,;, ;,,,, ,,,,;, ,,,,,;,,,,, ,,,;,, ,,,,( ,(,,, ,,,, ,,,,,,,,;, ,,,,;, ,,,,,,,—,,,,, ,,,;,, ,,,, ,, ;,,,,; ,,, ,,,,,,,,,, ,,,, ,,;,,,,,,, ,,, ,,,,;,,,,, ,,,, ;,,,,,,,,,,, ,,,;,, ,,,,,,(,(,,, ,,,,,,,,,,,,, ,, ,,,,,,, ,, ,,, ,,,,,,,,, ,,,, ,,, ,,,,,,,,, ,,,, ,, ,,, ,,,,,;,,,,, ,,,;,, ,,,, ,,,,;,, ,, ,;;,,,,, ,,,,,,(,,,,,,,:,;;,,,,, ,,,,,,,,,,;, ,,,,,;,,,,, ,,,;,,, ,,;,,,,;,, ,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,, ,,,,,, ;,,, ,,,,,,, ,,,,,, ,,,,,,,,,,,,, ，,,,,,,,,,,;,,,,,,,, ,—,,,,,,,,,,;, , , 浙江大学硕士学位论文 咬合干扰致大鼠咀嚼肌机械性痛觉敏感的 动物行为学及中枢外周机制研究 专 业, 口腔临床医学 硕士生, 俞燕芳 导 师, 谷志远教授 傅开元教授 前 言 咀嚼肌疼痛在颞下颌关节紊乱(,,,)患者中是一个重要症状，很多治疗方法可以缓解这种疼痛，其中牙自垫治疗是一个比较有效的方法，有报告说其有效率在,,,,,,,之间…。这使我们推钡,咬合干扰和咀嚼肌疼痛有密切关系。临床上咬合干扰和不良的咀嚼习惯均可以引起咀嚼肌疼痛”?,。“…。虽然已有学者通过不同的方法建立了咬合干扰的动物模型”,?“„“”，并研究了咬合干扰形成后咀嚼肌组织学”?,”和肌电图的变化”?…?，但是很少有人做过动物行为学方面的研究，我们不知道以往的咬合干扰动物模型可否引起确切的咀嚼肌疼痛以及这种疼痛持续的时间。本实验建立了大鼠单侧高牙自的咬合干扰动物模型，进行动物行为学的研究，观察单侧高鞘的皎合干扰动物模型可否引起咀嚼肌疼痛以及疼痛产生和持续的时间。 咬合干扰所致咀嚼肌疼痛的机制还不明了，可能包括中枢和外周机制。;—,,,是一种原癌基因，,,,,,表达的增加说明在特定的条件下神经元的活动发生了变化，神经兴奋迅速诱导;—,,,表达…,，因此;—,,,蛋白可以作为伤害性刺激下神经细胞活动的标记物。,物质(,,,,,,,;, ,，,,)属于速激肽家族， , 浙江大学硕士学位论文是哺乳类动中枢神经系统中的重要神经递质，有研究显示外周组织损伤引起的持续性伤害性刺激可以引起痛觉过敏，而初级感觉神经元中枢突,,的释放是这种痛觉过敏的重要机制之一“,”?…。本实验观察咬合干扰后咀嚼肌局部组织学和,,表达的变化，探讨疼 痛的外周机制。对咬合干扰大鼠咬肌区施予机械刺激和化学刺激，检测疼痛的初级传入中枢脑干和上部颈髓内;,,,,和,,表达的变化，探讨咬合干扰引起咀嚼肌疼痛的中枢机制。 浙江大学硕士学位论文 主要试剂及仪器,, ,,,,,,,,—,,试剂盒 美国,,,,,公司抗,,抗体 ,,,,, ,,,,抗; ,,,抗体 ,,,,, ,,,,,,, ,,,,尼龙毛 ,,,,,,,,, ,,(，,,,粘接树脂,,,,,—,,,, ,,, ,,, ,,,,;,, ,,(，,,,,,,粉剂包 北京中山生物技术有限公司,,,, 北京中山生物技术有限公司,,,,,,,一,,, 北京中山生物技术有限公司多聚赖氨酸 北京中山生物技术有限公司,,,粉 北京中山生物技术有限公司孵育盒 福州迈新公司定时器 福州迈新公司,,,,光学显微镜 ,,,,,,,，(,,,,,,,,石蜡切片机 德国,,,,,,,『,?一,,,,型恒温磁力搅拌器 上海志威电器有限公司,,,一,,,,,型电热恒温鼓风干燥箱 上海精宏实验设备有限公司 浙江大学硕士学位论文 第一部分 咬合干扰致大鼠咀嚼肌机械性痛觉敏感 的动物 ,,,,,,,—,,,行为学及痞痛的外周机制研究 材料与方法,( 实验动物 ,,,(,—,)雄性大鼠，,,,—,,,,，实验动物在,,,,，自然昼夜交替条件下自由进食进水。,( 咬合干扰动物模型的建立 大鼠腹腔注射,,,的乌拉坦麻醉(,,,,,，,(,,,,,)，麻醉起效后左上颁第一磨牙牙台面开髓(,,,号球钻)清理髓室，欧于，封金属砷失活剂，氧化锌丁香油糊剂暂封。一周后，大鼠腹腔注射,,,的乌拉坦麻醉下，咬合干扰组大鼠上颌第一磨牙黯面洞型内放入,长为,,,的牙用固位钉(高出牙?面,(,,,(,,,,) (附图,)，复合树脂粘接固定(,,,,,,,,,, ,,,，,,, ,,,,;,, ,,(，,,,)。对照组大鼠上颌第一磨牙失活牙髓后不埋固位钉，树脂充填。,( 实验 实验一:,只,—,雄性大鼠，每天上午,,:,,(,,:,,测量咀嚼肌的机械痛觉敏感性，持续,周，,天时每只大鼠按上述方法全麻下开髓、封砷失活牙髓。此实验为了了解咀嚼肌机械痛觉敏感性的正常基准值并观察牙髓失活是否会引起疆嚼肌枧械痛觉敏感性的交化。 实验二:,,只,—,雄性大鼠，随机平均分成两组，实验组动物,只，按上述方法建立咬合干扰动物模型，对照组动物,只。皎合干扰形成前,天至咬合干扰后,天每天测量咬肌和颡肌的机械性痛觉敏感性。每组大鼠各取,只分别在咬合干扰后,天，,天时处死。取所有动物的两侧咬肌组织，做,,染色及,,免疫组化。 浙江大学硕士学位论文,( 咬肌和颞肌机械性痛觉敏感性的测量 ,,, ,曾报道用,,, ,,,,尼龙毛刺激口颌面部皮肤来测量大鼠的机械性伤害性痛觉阈值【”,。本实验参考这种测量方法:动物安静、放松状态下轻靠在测量者手心，颞肌的测量点在眼耳连线中点，向下,,,,为咬肌的测量点(附图,)。,,, ,,,,尼龙毛根据尼龙毛直径的大小有一系列从,，,大标号(,,,,,,,,, ,,(,,,)，可以给组织施加不同的压力。我们从标号为,(,,的尼龙毛开始，若无反应，换,(,,，若再无反应，换,(,,号。每支尼龙毛连续刺激五次，中间间隔几秒钟，动物有缩头、抬腿、避开，发出声音等视为阳性反应。记录动物阳性反应次数和尼龙毛的标号，根据疼痛分值表计算疼痛反应分值(如表,示)。若用,(,,的尼龙毛刺激,次全有反应记为最高分,分，若,(,,的尼龙毛刺激,次都无反应记为最低分,分。用配对,检验进行统计学。,( 咬肌组织学和,,免疫组化染色 腹 腔注射,,,的乌拉坦深度麻醉，,(,,磷酸盐缓冲液,,,(,,,(,),,,,,冲洗后,,多聚甲醛固定液,,,,,心内灌注，组织固定。随后取双侧咬肌组织放入同一固定液再固定,小时。咬肌组织横向截断为两段，石蜡包埋，从咬肌中线即断端开始切片，切片厚度,,,。做常规,,染色和,,免疫组化(兔抗一,,，,:,,,，,,(,,,,)。,,免疫组化采用,,,,法，步骤如下: (,) 石蜡切片经二甲苯脱蜡、梯度酒精水化后，,(,,,,,,(,,,(,)洗,? ×,次，,,?×,次; (,) ,,的正常羊血清作用,小时: (,) 兔多克隆抗,,抗体(,:,,,溶于,,的羊血清，,,,,, ,,,, ,,, ,,;) ,?过夜，,(,,,,,,洗,?, ,次，,,?×,次; (,) ,,的正常羊血清作用,,分钟; (,) 试剂,:生物素标记的第二抗体(,:,,,在正常羊血清中)反应 ,,分钟，,(,,,,,,洗,?×,次，,,?×,次: (,) 试剂,:链霉菌抗生物素蛋白(过氧化酶(,:,,,溶于,(,,,,,,) 作用,,分钟，,(,,,,,,洗,?,,次，,,?×,次; 浙江大学硕士学位论文 (,),,,(,,,,,,,，,,(,,,,,,的过氧化氢，溶于,,,,,(,,,,,,) 显色,,分钟，,(,,,,,,洗,?,,次，,,?×,次; (,) 苏木素复染,,秒，自来水洗; (,) 梯度酒精脱水，二甲苯透明，中性树脂封片，镜下观察。 咬肌区,,主要在肌纤维间的结缔组织表达。每个组织片在相同放大倍 数下随机取三个视野，记数,,表达处，用,,,,,,(,进行,检验。 结 朵,( 牙髓失活前咬肌的机械痛觉反应 牙髓失活前,天，连续每天测量咬肌的机械痛觉敏感正常基准值，我们发现，在第,、,天，动物对机械性刺激比较敏感，第,天以后这种敏感性消失动物的反应趋于稳定(图,)。这说明动物需要,,,天时间去适应这种机械性刺激。,( 牙髓失活前后后咬肌的机械痛觉反应比较 比较杀髓后第,天和杀髓前,天咬肌的机械性痛觉敏感性，结果显示开髓和牙髓失活对咬肌机械性痛觉敏感性无明显影响(,,,(,,)。(图,),( 咬合干扰可导致咬肌和颞肌机械性的痛觉敏感 咬合干扰形成后第,天开始，实验组动物高骀侧咬肌对机械性刺激的痛觉敏感性增高，这种敏感性的增高在,,,天时达到最高蜂并维持,天时问(图,)。部分实验组动物的对照侧咬肌对机械性刺激的痛觉敏感性也有,定程度增高 (图,)。咬合干扰后颞肌只有高牙台铡表现为对机械刺激的痛觉敏感性增加，这种痛觉敏感产生的和持续的时间和咬肌的基本一致。,(咬合干扰后咬肌局部组织学及,,表达的变化 咬合干扰后高骀侧和对侧咬肌组织学未见明显的变化，也未见炎症细胞的 浸润。,,主要在肌纤维束之间的结缔组织内表达，咬合干扰组高张侧咬肌,, 表达的区域和强度都有所增加，并可以观察到肌纤维的损伤，,,的表达较常出 浙江大学硕士学位论文现于肌纤维损伤部位和小血管周围(附图,)。我们对,,的表达区域进行直接计数，发现咬合干扰后,天，高黯侧咬肌,,表达明显增高(图,)，咬合干扰后,天，高牙鲍,咬肌,,的表达基本回复到正常水平。 表,咀嚼肌对机械性刺激反应的疼痛分值计算表 ,,, ,,,,尼龙毛标号 阳性反应次数 疼痛分值 ,(,, , , ,，,, , ,(, ,(,, , ,(, ,(,, , ,，, ,(,, , ,(, ,。,, ,，, ,,,, ,(, ,(,, ,?, ,(, ,(,, , ,(, ,(,, , ,(, ,(,, , ,(, ,(,, , ,,, ,(,, , ,(, ,(,, , ,(, ,(,, , ,(, ,(,, , ,(, , 浙江大学硕士 学位论文图,测定咬肌对机械性刺激反应的正常基准值，第,，,天动物对机械刺激的敏感性较高，如图纵轴为疼痛分值平均值，进行单因素,,,,,检验，左侧,,, ,,,,，,,,(,,，右侧,,, ,】,, ,,,，,,。图,牙髓失活前后咬肌对机械性刺激的痛觉敏感性比较。进行配对,检验，左侧,:?,,,，,,,,，,,,,(,,(右侧,,,,(,,,,，,,,，,,。牙髓失活前后咬肌对机械刺激性痛觉敏感性无统计学差异。 浙江大学硕士学位论文图,咬合干扰引起高黯测咬肌的机械性痛觉敏感，咬合干扰后机械性痛觉敏感性的增高在,,,天时达到最高峰并维持,天时间，进行,检验,,,(,, , ,(, ,(, : ， ，,，。„,… ,(, ,(, , , „,, ， ,。 下,, 上矿 甲 ,“,,?口,【砖口,,啦,(，,【,, (上,。 —,(, ,(, ,,,,图,咬合干扰引起对照侧咬肌的机攘性痛觉敏感，咬合干扰形成后第,天出现且达到最高值。,检验，,,,(,, , 祈江大学硕士学位论文 一 ,—， , ,,, ,,…, ,, , ,』 ,口,。,, , ,, , ,, , ,, ,, , , ,。， ,(。卓 , , , , ”. ,, (,,