单细胞藻类的培养方法

单细胞藻类的培养方法 周德山1 胡希亮1 李茂才2 （1.连云港市海洋环境检测中心，江苏 连云港 222042；2.连云港市海洋与渔业局，江苏 连云港 222100） 单细胞藻类与我们的水产养殖息息相关，不 同的单细胞藻类品种及组成使养殖水体表现出不 同的颜色。单细胞藻类是鱼、虾、蟹、贝类等的直 接或间接饵料；水体中单细胞藻类的优劣决定了 鱼、虾、蟹、贝类等生态环境的好坏。在水体中培 养单细胞藻类有多种方法，笔者将其总结如下： 1 培养单细胞藻采用不同的接种方式 1 .1 在自然水域中直接培养单细胞藻 在目前 的大部分池塘养成及部分鱼、虾、蟹、贝类等育苗 过程中，直接利用自然淡水或海水培养单细胞藻。 经过滤的海水或淡水里有硅藻、绿藻等各种单细 胞藻；有轮虫、桡足类、枝角类等各种浮游动物；有 多种小型底栖动物等，利用繁殖自然水体里本身 就有的单细胞藻，促进浮游动物、底栖动物等基础 饵料生物的生长繁殖，是目前水产养殖过程中，较 为常见的基础饵料生物的培养方法。 自然繁殖单细胞藻的时间要根据生产需要而 定，其为鱼、虾、蟹、贝类等动物育苗开始后， 或者其苗种投放池塘后，育苗幼体或投放的苗种 要有适宜的生长发育环境，要有充足的生物饵料 吃。虾、蟹、鱼、贝类等的池塘养成，一般在放养苗 种半个月前，开始施肥繁殖单细胞藻，根据水色、 透明度调节施肥量及施肥次数，一般将水色调节 为黄色或黄褐色，透明度为 30 ～ 50cm。水色及透 明度不同，单细胞藻的品种组成及密度不同，不同 的养殖品种及同一品种的不同发育阶段，对水色 及透明度的要求不一样。在虾、蟹、鱼、贝类等的 养殖过程中，要始终保持水质的肥、活、嫩、爽，使 虾、蟹、鱼、贝类等水产养殖动物，生活在一个良好 的生态环境中。 1 .2 使用封闭或半封闭方式定向培养单细胞藻 在大部分的海产动物育苗及一些生态高效养成 过程中，使用封闭或半封闭的纯种单细胞藻的三 级培养。如近几年，河蟹土池育苗已兴起热潮，海 水的鱼类、贝类、虾类等各种土池育苗也已开始， 土池育苗的关键，就是在池塘里繁殖优质的充足 的单细胞藻，促使以单细胞藻作为饵料的各种浮 游动物、底栖动物等基础饵料生物的大量生长繁 殖。要想使池塘里的单细胞藻优质、稳产，目前最 好的培养方法就是采用封闭或半封闭式的单细胞 藻的三级培养，一级培养在单细胞藻的保种室里 进行，多采用 250 ～ 5 000mL的三角烧瓶培养单细 胞藻；二级培养采用塑料桶、塑料袋充气培养单细 胞藻；三级培养在土池里培养单细胞藻。常用的 单细胞藻品种有三角褐指藻、小球藻、扁藻、小硅 藻、骨条藻等。 1 .3 利用自然海水筛选培养生产性纯藻液 1 .3 . 1 藻种的来源及品种特点 在自然海水 12℃以下时，自然海水塘里原生动物少，单细胞藻 纯度大，在海水塘里选择生产需要的、品种比较单 一的藻液，进行筛选培养。通过这种方式筛选出 的单细胞藻对当地的水环境适应性强，抗污染，培 养技术容易掌握。这种培养方式是江苏沿海地区 虾蟹育苗过程中，海洋单细胞藻培养经常使用的 方式。 1 .3 .2 筛选培养生产性纯藻液的理论根据及方 法 根据所培养的单细胞藻的生活习性，设法形 成一个适宜海洋单细胞藻生长繁殖的水环境，快 速培养单细胞藻，形成了一个良好的而又复杂的 生态平衡系统，海洋单细胞藻作为优势种通过营 养竞争和空间竞争抑制其他有害微生物的生长繁 殖，当培养的藻液达到一定浓度时，某些微生物分 泌抗生素或细菌素达到一定浓度，杀死某些有害 微生物如一些原生动物等，以及微生物之间的寄 生作用，消灭病原微生物如纤毛虫、丝状菌等；利 用优势藻的拮抗作用，抑制优势单细胞藻中的其 他单细胞藻的生长繁殖。通过停气，清理下沉池 底的其它单细胞藻、受抑制单细胞藻、动物尸体。 -54- 《河北渔业》2005年第 5期（总第 143期） ○饵料肥料 这样反复 2 ～ 3次的接种、扩大培养、清理池底，就 能筛选出生产性的纯种单细胞藻藻液。按照常规 的单细胞藻培养方法，对生产性纯藻液进行接种、 施肥、扩大培养等。 2 培养单细胞藻使用不同的肥料 2 .1 使用肥料的种类 目前，在水产养殖中，经 常使用肥料繁殖单细胞藻，肥料的品种有有机肥、 无机肥、最新研制的复合肥料等。 2 .1 . 1 有机肥 经常使用的有机肥有粪肥、绿 肥、混合堆肥等。有机肥肥效持久，但有机耗氧量 多，条件致病微生物含量高，使用之前必须进行发 酵腐熟。要繁殖单细胞藻一般要施足基肥，然后 根据水质肥瘦、养殖生物的生长活动情况、天气情 况等进行追肥。 2 .1 .1 .1 粪肥 将动物粪便充分发酵腐熟，根据 养殖需要在育苗或放养动物苗种前 15d，将一定 量的发酵粪便堆放在池的四角，或将发酵粪便滤 掉残渣后，用其汁液泼洒。 2 .1 .1 .2 绿肥 根据养殖需要在育苗或放养动 物苗种前 15d，将一定量的无毒、无刺激、易腐烂 的新鲜嫩草堆放在池的四角，全部浸没在水中，用 泥土等压紧。 2 .1 .1 .3 混合堆肥 在发酵池里，将嫩草与动物 粪便交替层层堆叠，层与层之间洒堆肥量的 10% ～ 15%的生石灰，用土密封。以其发酵汁液作为 基肥或追肥。 2 . 1 .2 无机肥 品种有氮肥、磷肥、钙肥等。氮 肥为硫酸氨、氯化氨、尿素等；磷肥为过磷酸钙、磷 酸二氢钠等；钙肥为生石灰等；还有黄海水产研究 所研制的含有铁、锰、锌、铜、钴等多种微量元素的 复合肥等。在海洋单细胞藻的封闭或半封闭培养 期间，还经常使用硅肥（硅酸钠等）、铁肥（柠檬酸 铁等）。 2 .1 .3 新型复合肥料 品种很多，如“肥水素” “肥水王”“科学专用鱼 A型肥”，“科学专用鱼 B 型肥”等。 2 .2 使用肥料的方法 在水产养殖中，肥料有时 单一使用，但大部分时间是几种肥料搭配使用，以 有机肥料和无机肥料相互搭配使用比较多见，有 机肥多作为基肥使用，无机肥多作为追肥使用；池 塘里多使用有机肥，在水产动物育苗期间，繁殖单 细胞藻多使用无机肥等。 3 培养单细胞藻因养殖品种而异 不同的养殖品种及其不同的发育阶段，对单 细胞藻的品种及数量要求不同，我们要根据鱼、 虾、蟹、贝类等的不同需要，培养特定的单细胞藻 品种或以一定的方式培养单细胞藻。如泥蚶育苗 初期饵料为扁藻，中后期使用扁藻、角毛藻、金藻， 补充饵料为小球藻等；刺参幼体的饵料有盐藻、角 毛藻、叉鞭金藻、等鞭金藻等；海水小球藻含有鱼 类所需要的必需氨基酸及不饱和脂肪酸比其他单 细胞藻高，常被作为轮虫、桡足类、枝角类等的强 化培育饵料。在鲫鱼、鲤鱼等杂食性鱼类高产高 效养殖中，在鱼苗投放池塘前，施发酵腐熟的家畜 肥做基肥繁殖单细胞藻，其原因是这些鱼是杂食 性，施发酵腐熟的家畜肥不仅可以繁殖单细胞藻， 也可以作为补充饵料被鱼食用；鳙鱼以单细胞藻 作为主要食物，规格越大，其对单细胞藻的需求量 越大，我们要采取相应的措施，尽可能地满足鳙鱼 各个生长发育阶段对单细胞藻的需要。 参 考 文 献 ［1］张海滨，等 . 微藻异常培养技术的研究进展 . 海洋湖沼通报， 2000（3）：57 ～ 59. ［2］蒋霞敏 . 单细胞藻浓速保藏及应用技术的初步试验 . 全国海 水养殖技术讨论论文集，1990. ［3］华汝成 . 单细胞藻类的培养与利用 . 北京：农业出版社，1981： 38 ～ 51，241 ～ 395. ［4］李晓霞，等 . 单细胞藻类培养应注意的问题 . 齐鲁渔业， 2001，18（5）：35. ［5］厦门水产学院 . 海洋浮游生物学 . 北京：农业出版社，1981：8 ～ 16. ［6］黄海水产研究所 . 海洋水产资源调查手则 . 上海：上海科学 技术出版社，1981：217 ～ 243. （收稿日期：2005 - 06 - 23） -64- 《河北渔业》2005年第 5期（总第 143期） ○饵料肥料