高效液相色谱法测定甘草酸二铵注射液中有关物质

高效液相色谱法测定甘草酸二铵注射液中有关物质 　　【论文关键词】  甘草酸二铵；注射液；有关物质；高效液相色谱法 　　【论文摘要】  目的  建立高效液相色谱检测甘草酸二铵注射液中有关物质。  方法  选用C18柱，0.01mol/L磷酸溶液[或磷酸盐缓冲溶液]—乙腈（62：38）；对其配比可用梯度法改变配比，使其理论塔板数不低于3000。流速1.0ml/min，进样量10ul。  结果  在该色谱条件下，甘草酸二铵注射液分离良好。结论  本法灵敏、准确、简便，可作为甘草酸二铵注射液有关物质的检测方法。 　　甘草酸二铵  是甘草有效成分的第三代提取物，具有较强的与皮质醇类似饿非特异性的抗炎、保护肝细胞膜及改善肝功能的作用，可减少肝细胞的水肿、坏死。本研究采用HPLC法1］［一，二］，建立了甘草酸二铵注射液中有关物质的测定方法。 　　1  实验 　　1.1 药品和试剂 　　仪器:SP8800型高效液相色谱仪（美国Spectra-physics公司）     色谱柱：Kromasil C18(250×4.6mm,5µm) 　　试剂:磷酸（纯）新乡市化学试剂厂; 乙腈(色谱纯)TEDIA company.INC USA； 盐酸（药用级）湖南尔康制药有限公司；  氢氧化钠（药用级） 湖南尔康制药有限公司；甘草酸二铵对照品 中国药品生物制品所；  供试品（自制，批号：080714），纯化水 自制。 　　2方法与结果： 　　2.1检测波长的选择：因紫外最大吸收波长为252nm，并根据其含量测定时选用的波长252nm，仍选此波长作为液相的检测波长。 　　2.2色谱条件：选用C18柱，0.01mol/L磷酸溶液[或磷酸盐缓冲溶液]—乙腈（62：38）；对其配比可用梯度法改变配比，使其塔板数不低于3000。流速1.0ml/min，进样量10ul。 　　3系统适用性试验：取本品5ml于25ml容量瓶中，加水至刻度，制成1mg/ml(或0.5mg/ml，以出峰情况定)的溶液，进样10ul，色谱图至主成分峰保留时间的3倍，实现主峰与杂质峰完全分离或达到基线分离，并且理论塔板数不低于3000。 　　结果：样品(批号：080714)的主峰与杂质能够完全分离，理论塔板数为9802；有关物质为4.8%。 　　4专属性试验： 　　4.1 酸破坏试验：取本品5ml于25ml容量瓶中，加1mol/L盐酸溶液5ml，放置2小时后，加1mol/L氢氧化钠溶液5ml中和，再加水至刻度，作为酸破坏溶液。 　　4.2 碱破坏试验：取本品5ml于25ml容量瓶中，加1mol/L氢氧化钠溶液5ml，放置2小时后，加盐酸溶液1mol/L 5ml中和，再加水至刻度，作为碱破坏溶液。 　　4.3 氧化破坏试验：取本品5ml于25ml容量瓶中，加30%双氧水溶液1ml，放置2小时后，置水浴80℃加热1小时除去剩余的双氧水，再加水至刻度，作为氧化破坏溶液。 　　4.4 高温破坏试验：取样品于110℃加热2小时后，精密量取5ml于25ml容量瓶中，再加水至刻度，作为高温破坏溶液。 　　4.5 光照破坏试验：取样品于紫外灯下365nm波长光照4小时后，精密量取5ml于25ml容量瓶中，再加水至刻度，作为光照破坏溶液。 　　取以上5种溶液，分别进样，记录色谱图至主成分峰保留时间的3倍。分析结果。要求：各杂质峰与主成份峰分离效果良好。