不同组分透皮吸收促进剂增强黄腐酸钠软膏的透皮效应

2006年3月 第28卷 第3期 中 成 药 Chinese Traditional Patent Medicine March 2oo6 Vo1．28 No．3 似。其中丹参饮大剂量组愈合最佳，bFGF的表达明 显低于模型组，但仍高于正常。这可能与溃疡愈合 后期组织结构仍需改造有关。 Bel-2是重要的凋亡抑制基因，而 EGF、bFGF、 TGF等生长因子均可通过不同途径调控胃肠道黏膜 细胞凋亡⋯J。因此，我们推测，丹参饮可能通过凋 亡相关基因及生长因子途径来抑制胃黏膜细胞凋 亡，从而加速溃疡愈合、提高溃疡愈合质量。 参考文献 [2] [3] Okabe S，Roth J L．Pfeiffer C J．A method for experimental。 penetrating gastric and duodenal ulcer in rats[J]．Am J Digestive Diseases，l971。16：277， Hall P A，Coates P J，Ansari B．et a1．Regulation of cell number in the mammalian gastrointestinal tract：the importance of apopto— sis[J]．J Cell Sci。1994。107：3569． Spyridon L，Akira N，Hiromasa K．The development of the endo- thelin 1～induced gastric ulcer：time sequence analysis of mor- phologic changes[J]．1nt J Exp Pathol，1994，75：345—355． Que F G。Goreg G J．Cell death by apoptosis：basic concept and disease relevnce for the gastroenterologist[J]．Gastrornterology， 1996，1 10：1238—1243． Ohvai Z N。Milliman C L．Kommeyer S T．Bcl-2 heterodimerzes in vivo with a conserved homolong，Bax，that 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中图分类号：R285．6 文献标识码：A 文章编号：1001—1528(2006)03-0397-03 泥炭黄腐酸钠药浴，经北京市海淀医院临床观 察，对风湿性关节炎和类风湿性关节炎有显著疗效。 药浴受时间、地点的限制，我们将其进行了剂型改 革，制成软膏。实验证明，黄腐酸钠软膏具有消炎、 抑制大鼠足跖肿胀的作用⋯。为进一步探讨其透 皮吸收作用，本实验利用离体动物皮肤，考察了不同 组分透皮吸收促进剂对黄腐酸钠透皮吸收的影响， corn 0 确定了黄腐酸钠软膏中透皮吸收促进剂的最佳配 比。 1 仪器与药品 Shimadzu RF-540荧光分光光度计(日本岛津)； 改进Franz扩散池(自制)；超级恒温水浴(重庆实验 设备厂)；磁力搅拌器(杭州仪表电机厂)；超声波清 洗仪(无锡超声电子设备厂)；分析天平(上海天平 收稿日期：2005-07-16 基金项目：黑龙江省自然科学基金资助项目(D9516)。 作者简介：许 伟(1970～)．女，哈尔滨市人，副教授，医学硕士，从事药剂学与药理学教学，电话：0451-82610952。E-mail：xuwei0609@sohu 397 ]- 1J 1； 1J 刚 ” rl rl r； r【 维普资讯 http://www.cqvip.com 2006年 3月 第28卷 第3期 中 成 药 Chinese Traditional Patent Medicine March 20()6 V01．28 No．3 仪器厂)；黄腐酸钠(由黑龙江省桦川泥炭提取精制 而得)；黄腐酸钠对照品(中国腐植酸协会提供)；氮 酮(北京东立精细化工厂)；薄荷油(北京化学试剂 厂)；丙二醇(北京化学试剂厂)。 2 方法和结果 2．1 荧光分析条件的选择 黄腐酸钠对照品溶液，在荧光分光光度计上扫 描(入射和发射狭缝均为10 nm)，结果黄腐酸钠的 激发和发射波长分别为320 nm及420 nm 。 2．2 曲线的制备 精密吸取 2 mg／mL的黄腐酸钠对照品溶液 1．0，2 0，5．0，10．0，20．0，30．0，40．0 L，用生理盐 水定容至 10 mL量瓶中，摇匀，以生理盐水作空白对 照，测定荧光强度，以测得的荧光强度为 l，，以各对 照品溶液的浓度为 ，得回归方程为 Y=0．2054+ 7．0631X，r=0．9992，在0．2～8 mL范围内，荧光 强度与浓度有良好的线性关系，平均回收率为 99．50％ ，RSD为 1．33％(n=5)。 2．3 皮肤的制备 2．3．1 离体皮肤的制备 取体重(200±20)g大鼠 (黑龙江中医药大学实验动物中心)，将大鼠背部脱 毛，冲洗干净，饲养 1日，处死，剪下脱毛处皮肤，剥 离皮下脂肪及粘液组织，选取完整皮肤，用生理盐水 洗净，浸于生理盐水中，4℃冰箱短期保存，备用。 2．3．2 皮肤预处理 将上述离体皮肤冲洗干净，用 棉花吸干表面水分，在纱布上滴加透皮吸收促进剂， 使之浸润到整个大鼠皮肤表面，使皮肤完全润湿，保 持 12 h，将皮肤冲洗干净，备用。 2．4 装置和方法 采用改进Franz扩散装置 ，将鼠皮置于扩散 室与接受室之间，扩散液为 10 L黄腐酸钠浓药 液，接受液为生理盐水，水浴温度(37±1)℃，接受 室体积为11．2 mL，扩散面积为4．52 elI1 。分别在 1，3，5，7，9 h取样，用新鲜生理盐水更换全部接受 液。取出的样品经0．45 m微孔滤膜过滤，以空白 皮肤接受液为对照，在荧光分光光度计上测定420 nm波长处各时间间隔内接受液的荧光强度，将荧光 强度值代人标准曲线方程计算浓度，并按 Q= ∑(C，·V ／s )计算累积渗透量Q，以累积渗透量 Q 对时间t回归。 2．4．1 透皮吸收促进剂单用促吸效果考察 按前 述皮肤预处理方法，将离体大鼠皮肤分别用氮酮、丙 二醇、薄荷油透皮吸收促进剂预处理，将预处理的皮 肤和未用透皮吸收促进剂预处理的空白皮肤分别固 定于Franz扩散装置上，按上述装置和方法进行测 定(表 1)(表中所列 Q值均为 3次测定的平均值， 以下同)。实验结果表明，透皮吸收促进剂单独使 用对黄腐酸钠的促渗效果为：氮酮 >薄荷油 >丙二 醇 >无促进剂。使用透皮吸收促进剂和不使用透皮 吸收促进剂比较有显著差异(氮酮、薄荷油，P< 0．01；丙二醇，P<0．05)。 2．4．2 透皮吸收促进剂之间的相互作用 按前述 皮肤预处理方法，将离体大鼠皮肤分别用氮酮一丙二 醇(1：1)、氮酮一丙二醇(1：1)、丙二醇一薄荷油(1：1) (均为体积比，以下同)混合促进剂预处理，按上述 装置和方法进行测定(表2)。实验结果表明，几种 透皮吸收促进剂之间的相互作用，其促渗效果以氮 酮与丙二醇配伍为佳，比单用时促渗效果好，所以选 择氮酮与丙二醇配伍。 2．4．3 透皮吸收促进剂的最佳配比 按前述皮肤 预处理方法，将离体大鼠皮肤分别用氮酮与丙二醇 1：l，1：2，1：3，1：4混合促进剂预处理，按上述装 Table 1 The effect of different enhancers on the permeation of FA through rat skin in vitro(，l=3) Table 2 The effect of the interaction on enhancer$on the perm eation of FA through rat skin in vitro( =3) 398 维普资讯 http://www.cqvip.com 2006年3月 第28卷 第3期 中成 药 Chinese Traditional Patent Medieine Mar(~h 2()o6 Vo1．28 No，3 置和方法进行测定(表3)。结果当氮酮和丙二醇的 配比为1：3时，促渗效果最好，其渗透速率[232．60 em ／h]为不加透皮吸收促进剂[20．37 Ixg／cm ／ h]的11倍。 2．4．4 软膏中透皮吸收促进剂的最佳浓度考察 按黄腐酸钠软膏的制备⋯工艺方法制备含氮酮 0％、1％、2％、3％、5％的黄腐酸钠软膏(含l：3配比 的丙二醇)和空白软膏基质，按1 em 涂布25 mg，均 匀涂抹在已脱毛的离体大鼠皮肤上 ，固定在Franz 扩散池上，以空白基质接受液为空白对照，按上述装 置和方法进行测定(表4)。实验结果表明，氮酮比 例为2％时渗透速率最大，为 137．88 g／m ／h。另 外，比较氮酮浓度 2％和0％的两组可以看出，含 2％氮酮和6％丙二醇的软膏与不加透皮吸收促进 剂的软膏比较，前者透皮速率是后者的6．5倍。 Table 3 The effect of different proportion of Azone and 1 ， 2-PG on the permeation of FA through rat(，l=3) Table 4 The effect of Azone concentrations on the permeation of FA through rat skin in vitro(，l=3) 3 过论 3．1 添加适宜的透皮吸收促进剂是迄今研究最多 和应用最普遍的经皮渗透促进方法。文献报道，极 性分子可以经由角质层细胞间水合区渗透，非极性 分子可能经由细胞间脂质区渗透。黄腐酸钠是一种 极性较强的药物，在角质层的扩散是其主要限速步 骤。本实验对常用的3种经皮吸收促进剂进行筛 选。氮酮能改善角质层的通透性，尤其有助于增加 亲水性化合物的渗透性 。丙二醇能渗入角质层 并在其中形成积蓄，增加药物在角质层中的溶解性 质和分配性质 。本实验也证明了使用透皮吸收 促进剂和不使用透皮吸收促进剂比较有显著差异。 3．2 一般认为，氮酮极性小，水溶解度低，与丙二醇 这种极性溶剂合用时，可以互为补充，有效地促进药 物渗透 。一方面，丙二醇可以增加氮酮到达脂质 双分子层的数量，其本身又可渗入皮肤溶解 o【一角蛋 白并与之形成氢键结合，从而减少药物与角蛋白的 结合，减少药物扩散阻力；另一方面，氮酮也可使丙 二醇更多的进入角质层细胞，同时丙二醇又可延长 氮酮在角质层的滞留时问，从而延长它们的促渗时 间 。实验结果也证明了氮酮与丙二醇合用时药 物的透皮速率高于二者单独应用。另外，氮酮与丙 二醇对药物的透皮促进作用只有在最佳浓度时才发 挥最佳的促进作用 。实验结果也证明了2％氮酮 和6％丙二醇配伍使用，促进效果最佳，可使黄腐酸 钠软膏发挥最佳疗效 ，为今后进一步的药理实验和 临床研究奠定基础。 致谢 在论文完成过程 中，黑龙江中医药大学药学院的多位 老师给予了悉心指导。在此一并表示感谢! 参考文献： [I] 许 伟，王桂秋，王艳红，等．黄腐酸钠软膏的动物药代动力学 研究[J J．中成药，2003。25(1)：l4．16． [2] 许 伟，朱黎霞．荧光分光光度法测定黄腐酸钠软膏中黄腐酸 钠的体外透皮吸收[J]．黑龙江中医药，2002，(5)：50-5I． [3] 丁承瑛，陆莉萍，王祥发．促进剂对双氯芬酸贴片的透皮释放 作用[J]．中国医院药学杂志。1998，I8(5)：216． [4] 许景峰，等．羟乙桂胺透皮吸收的渗透量及血浆浓度的HPIE 分析[J]．中国药学杂志 1993，28(4)：224-226． [5] 粱秉文．经皮给药制剂．第一版[M]．北京：中国医药科技出版 社．1992：145． [6] Sheth NV，et a1．Int， nrm，1986，28：201． [7] Hoelgaard A．et a1．J 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