2010全国消除淋巴丝虫病后监测工作方案

全国消除淋巴丝虫病后监测工作 为巩固我国消除丝虫病成果，加强消除丝虫病后的疫情 监测工作，根据《中华人民共和国传染病防治法》、《突发公 共卫生事件与传染病疫情监测信息报告管理办法》和《丝虫 病诊断（WS260－2006）》的有关，制定本方案。 一、监测目的 及时发现可能残存的和输入性传染源，防止丝虫病再度 传播。 二、监测内容与方法 （一）病例定义。 1．疑似病例：具有急性淋巴管炎、淋巴结炎、睾丸炎、 附睾炎、精索炎，或近2年内新出现的鞘膜积液、乳糜尿和 淋巴水肿等症状和体征，并排除细菌性、先天性、家族性、 外伤、手术、结核、肿瘤或其他病因的病例。 2．临床诊断病例：疑似病例且具有在国外丝虫病流行 区或国内原丝虫病流行区居住史，或兼有丝虫病血清学检测 结果阳性。 3．确诊病例：指血液检查微丝蚴阳性的病例。 （二）病例报告。 各级各类医疗机构、疾病预防控制（以下简称疾控）机 构及其执行职务的医护人员、检疫人员、疾控人员发现病例 后，应当填写传染病报告卡，在24小时内通过疾病监测信息 报告管理系统进行报告。暂不具备网络直报条件的单位应当 在诊断后24小时内向所在地县级疾控中心送（寄）出传染病 报告卡。县级疾控中心收到传染病报告卡后应当立即进行网 络直报。 （三）病例核实。 1．报告信息核实。省、设区的市、县级疾控机构在疾 病监测信息报告管理系统发现报告的丝虫病疑似病例、临床 诊断病例和确诊病例后，应当立即病人所在地县级疾控 机构与报告单位联系，对报告内容进行逐项核实，并填写个 案调查表（附件3），报送省级疾控机构。 2．标本采集与检测。由病例所在地县级疾控机构负责 进行血液标本采集。采集时间为每日21时至翌晨2时，连续3 天。每次采集的血液标本涂于2张玻片，制成厚血膜涂片（以 下简称血片），立即送（寄）到省级疾控机构。省级疾控机 构负责对血片进行染色和显微镜检查，并妥善保存血片，以 备抽查复核。 3．确认。省级疾控机构须在 24小时内将血液检查微丝 蚴阳性、疑似阳性病例的血片检查镜下照片及相关资料报送 中国疾控中心寄生虫病预防控制所，由该所负责组织专家进 行确认，并将确认的阳性结果在12小时内上报卫生部疾病预 防控制局。 4．病例订正。经省级以上疾控机构核实的所有报告病 例，由病例所在地县级疾控机构负责在疾病监测信息报告管 理系统中订正。血液检查微丝蚴阳性者，订正为确诊病例， 血液检查微丝蚴阴性者，在备注栏内注明“经镜检未发现微 丝蚴”。 三、病例调查与疫点处理 （一）病例调查。 1．个案调查。省级疾控机构发现血液检查微丝蚴阳性 或疑似阳性病例后，应当在48小时内对病例开展流行病学调 查，鉴别为本地感染病例或境外输入性病例，并将调查结果 及时上报中国疾控中心寄生虫病所。 2．人群调查。对确认为本地感染的微丝蚴阳性病例， 省级疾控机构须对其所居住的自然村（或生活小区）开展人 群调查，调查对象为2岁以上常住人口。可先用快速免疫色 谱试验（ICT）方法进行筛查，对阳性者进行血液检查微丝 蚴，或直接采用病原学检测方法进行检测。 对确认为境外输入的微丝蚴阳性病例，须对同批归国人 员进行血液检查微丝蚴。 此外，对一些地处偏远、交通不便、防治阶段工作相对 薄弱的历史重流行区，省级疾控机构可根据当地情况，不定 期开展人群调查，以发现可能残存的传染源。 （二）疫点处理。对人群调查中查出1例以上微丝蚴阳 性者的自然村，应当开展以下疫点处理措施。 1．病原治疗。对微丝蚴阳性者采用乙胺嗪（海群生） 进行治疗。每个病例需复治3个疗程，每一疗程需间隔半月 以上。孕妇、哺乳期妇女及有严重疾病患者应当缓治或免予 治疗。 班氏微丝蚴阳性者的治疗，成人总剂量为乙胺嗪4.2g， 每次0.2g，每天3次，连服7天为一疗程；儿童总剂量按70mg/kg 体重计算，每天3次，连服7天为一疗程。 马来微丝蚴阳性者的治疗，成人总剂量为乙胺嗪1.8g， 每次0.2g，每天3次，连服3天为一疗程；儿童总剂量按30mg/kg 体重计算，每天3次，连服3天为一疗程。 2．媒介调查与控制。对确认为本地感染的微丝蚴阳性 者，省级疾控机构负责组织对其所居住的自然村（或生活小 区）开展媒介调查与控制措施。传播季节，在人房捕捉致倦 库蚊/淡色库蚊1000只以上或中华按蚊/嗜人按蚊500只以上， 对所有蚊子进行解剖，检查蚊内是否感染幼丝虫，填写蚊媒 分类调查表(附件4)和蚊媒幼丝虫自然感染调查表（附件5）。 同时开展控制蚊媒孳生地、减少人蚊接触等相关灭蚊防蚊工 作。 对确认为输入性传染源的病例，省级疾控机构负责组织 对同批归国人员集中居住地开展媒介调查工作，如发现感染 幼丝虫的蚊虫，开展相应的灭蚊防蚊工作。 四、质量控制 （一）培训。中国疾控中心寄生虫病所每2年对省级疾 控机构丝虫病防治技术骨干培训1次，省级疾控机构每2年对 设区的市和县级参与丝虫病监测的工作人员轮训1次。 （二）督导。中国疾控中心寄生虫病所负责组织专家组 对当年有报告病例的省（区、市）进行检查督导，抽查省级 疾控机构保存的全部个案调查表和血片。省级疾控机构负责 对当年有报告病例的市、县的疾控机构进行督导，抽查全部 个案调查表和保留的血片。省级疾控机构对发现并报告确诊 病例的单位和个人予以表彰或奖励。 五、组织管理 卫生部负责全国消除丝虫病后监测工作的组织领导。 各级卫生行政部门负责本地区消除丝虫病后监测工作的组 织领导和协调。 中国疾控中心负责全国消除丝虫病后监测工作的组织 协调和技术指导。中国疾控中心寄生虫病所负责提供相应 的技术支持，包括组织专家组对血液检查微丝蚴阳性和疑 似阳性病例的核实确认，对监测工作的技术指导，对省级 专业人员开展培训，以及开展质量控制和资料汇总分析等。 省级疾控机构负责本省（区、市）消除丝虫病后监测工 作的具体实施，负责对辖区内报告的病例进行核实、资料收 集、汇总分析，负责对市（县）级的督导与培训。县级疾控 机构负责报告病例的血液标本采集和个案调查，并协助省级 疾控机构开展病例调查和疫点处理等相关工作。 各级各类医疗机构负责病例的报告和管理。 附件：1．病原学检测方法（厚血膜法） 2．血清学检测方法 3．丝虫病个案调查表 4．蚊媒分类调查表 5．蚊媒幼丝虫自然感染调查表 附件1 病原学检测方法 （厚血膜法） 一、血片制作 于晚9时至翌晨2时，以皮肤消毒剂消毒耳垂（或指端） 待干，用一次性采血针快速深刺，取血6大滴，约等于120μl， 涂于2张玻片，制成边缘整齐、厚薄均匀的椭圆形厚血膜（约 长3cm、宽1.5cm），平放于有盖的玻片盒内。 二、血片染色 将经自然干燥的血片放入清水中溶血5分钟～10分钟， 至血膜呈乳白色，取出晾干，用甲醇固定，染色。大规模普 查可用硼砂美蓝染色，鉴定虫种或保存标本宜用吉氏液或苏 木素染色。 （一）硼砂美蓝染色法。取美蓝2g，硼砂3g，置研钵内， 边研边加水，待溶解后冲洗入瓶中，加蒸馏水100ml 配成原 液，过滤后放置备用。染色时取原液5ml 加清水配成5％稀释 液，染3分钟～5分钟，使血膜呈天蓝色，然后用清水轻轻冲 洗。本法染色前可不必先溶血、固定。 （二）吉氏染色法。染液由吉氏粉0.5g，中性甘油25ml 及甲醇25ml 配成。先置染粉于研钵内，加少量甘油充分研磨， 边研边加，至甘油加完为止，然后移入带玻璃塞的100ml 玻 塞瓶内，用甲醇小量多次洗涤甘油染液移入瓶内，盖紧瓶盖， 充分摇匀，置于55℃—60℃温箱内24小时或室温下3天—5 天，即为原液，放置愈久染色效果愈佳，临用时稀释。将溶 血后已干的血片用甲醇固定约1分钟，然后滴加10％染液（原 液加清水稀释配成）染色45分钟，用蒸馏水轻轻冲洗。 （三）德氏苏木素染色法。染液由 A 液即铵明矾饱和液 （铵明钒20g、蒸馏水100ml）、B 液（苏木素结晶1g 加纯酒 精10ml）、C 液（甘油25ml 加甲醇25ml）配成。将 B 液逐滴 加入 A 液中，倒入一不盖紧的容器内，置于空气流通处，经 2周至1个月使其充分氧化，过滤后加入 C 液，密封备用。血 片溶血、固定步骤同前。用上述染液染色10分钟～20分钟， 用0.05％—0.1％稀盐酸脱色片刻，流水冲洗至血膜呈蓝色。 三、血片镜检 将染色的血片在低倍显微镜下顺序逐个视野检查微丝 蚴并计数，根据微丝蚴的大小、体态、折光性、有无鞘膜、 表皮是否光滑及内部结构等特征，予以确定。在高倍镜下观 察微丝蚴的体核及头端空隙、神经环、排泄细胞、排泄孔、 肛孔、尾核等结构，以鉴别班氏和马来微丝蚴。必要时用油 镜作进一步鉴别。 四、班氏与马来微丝蚴形态鉴别要点 特 征 班氏微丝蚴 马来微丝蚴 长度（μm） 244～296（平均260） 177～230（平均220） 宽度（μm） 5.3～7.0 5.0～6.0 体态 柔和，弯曲自然，无小弯 僵直，大弯上有小弯 头端空隙（长宽比） 较短(1：1) 较长（2：1） 体核 圆形，排列整齐，各核分开，清晰可数 卵圆形，大小不等，排列紧 密，常相互重叠，不易分清 尾核 无 2个 附件2 血清学检测方法 一、快速免疫色谱试验（ICT）检测班氏丝虫抗原 （一）试剂盒内容物（置4℃可保存6个月）：含测试卡和100µl 刻度毛细管。 （二）血样：全血100µl。 （三）操作步骤。 1.打开测试卡,移去并丢弃粘胶衬里,确保卡的右手边缘 粘胶是暴露的。 2.利用毛细管的虹吸作用，从耳垂或手指取血，使毛细 管内血量吸至100µl 刻度线。 3.将100µl 全血从毛细管加到测试卡粉红色和白色垫的 顶部。注意每一滴血完全吸收后再加第2滴。如毛细管内的 血滴出不畅，可将管尖轻按垫子。 4.等垫子的粉红色部分完全浸透血清（约需30秒～1分 钟）后关闭测试卡。如在1分钟～2分钟垫子的粉红色部分仍 未能浸透血清，应加1滴试剂。用力压紧测试卡视窗右边区 域，并开始计时。 （四）结果判断标准。 关闭测试卡2分钟后，通过测试卡视窗读结果。若在视窗 内见到2条线（对照线和测试线），则结果为阳性；如只有对 照线显示，则结果为阴性。如是弱阳性血样，可延长显示时 间至关闭测试卡15分钟时再做，以确定结果。如果对照 线不显示，则测试无效，应当重新进行测试。读卡时间最长 限在15分钟，长时间放置，阴性多会变成阳性。 注：ICT 测试卡不适用于检测马来丝虫病。 二、ELISA 检测丝虫特异 IgG4抗体试验 （一）试剂盒内容物（置4℃可保存6个月）：含丝虫抗原包 被板、抗人 IgG4酶结合物、洗涤剂干粉、底物稀释液、底物 干粉、反应终止液、阴性对照、阳性对照。 （二）血样（血清或滤纸血） 1.血清：采集受检者的静脉血或末梢血，离心后收集血 清。在低温下运送，4℃保存，–20℃可长期保存。 2.滤纸血：以洁净滤纸沾取自然流出的一滴耳垂或手指 血（约20µl），血斑直径应在1.1 cm～1.2cm，厚薄均匀。自 然干燥后密封置4℃保存（可保存约6个月）。 （三）操作步骤。 1.将每袋洗涤剂干粉用500ml 蒸馏水溶解作反应板洗涤 液和样品稀释液用。血清样本按1：40稀释，滤纸血样本按 直径1.1cm 圆片加400µl 样本稀释液，37℃浸泡2小时（或4℃ 过夜）稀释处理。 2.取已稀释的样本100µl 加入反应板孔内，同时设阴性、 阳性对照（阴、阳性对照已稀释，直接加入100µl）及空白对 照（加100µl 样本稀释液）各1孔，37℃反应90分钟后甩去孔 内液体，用洗涤液加满各孔，静置30秒后甩去，共洗5次， 最后一次拍干。 3.除空白对照孔外每孔加抗人 IgG4酶结合物2滴，37℃ 反应90分钟后甩干孔内液体。同上洗涤。 4.将底物干粉完全溶解于底物稀释液中（底物溶解后4℃ 避光可保存1周），各孔加入底物溶液2滴，37 30℃ 分钟后加1 滴终止液终止反应，混匀，观察结果。 （四）结果判断标准 1.肉眼观察：当阴性对照孔无色或显微黄色，阳性对照 孔呈明显黄色时，试验有效。待检样品孔颜色呈明显深于阴 性对照的黄色即判为阳性。 2.仪器检测：应用酶标仪以空白对照孔调零，在波长 405nm 处读取各孔 OD 值。以样本 OD≥阴性对照 OD 值的 2.1倍为阳性，若阴性对照 OD 值不足0.07，按0.07计算。 注：IgG4抗体试验适用于检测班氏丝虫和马来丝虫病。 附件3 丝虫病个案调查表 一、一般情况 姓名： ；性别： ；出生年月： 年 月。 固定电话： ；手机： 。 现住址： 省 市 县（市、区） 乡（镇/街道） 行政村（居委 会） 自然村。 原居住地： 省 市 县（市、区） 乡（镇/街道） 行政 村（居 委会） 自然村。 原居住地是否有丝虫病的流行？是=1，不是=2，不清楚=3。 近年服务单位： ；单位电话： ；联系人： 。 曾去过的国家或地区： ，1.外出时间： 年 月 日 至 年 月 日。2.外出 时间： 年 月 日 至 年 月 日。 二、是否做过微丝蚴检查： 查过=1，未查过=2，记不清=3。 如果查过:最后一次的检查时间是: 年 月。 检查的结果是:阳性=1，阴性=2，记不清=3。 三、是否服用过乙胺嗪：服过=1,未服过=2,记不清=3。 四、近一年中，是否有以下症状或体征（可多选）: 急性淋巴管/淋巴结炎=1，淋巴水肿/象皮肿=2，乳糜尿=3，鞘膜积液=4，无=5。 五、此次病原学检查时间： 年 月 日 。 病原学检查结果：班氏丝虫=1，马来丝虫=2；阴性=3。 微丝蚴密度： 条/120µl。 调查人： 调查时间： 年 月 日 附件4 蚊媒分类调查表 省 县(市、区) 乡（镇/街道） 行政村（居委会） 自然村 捕蚊日期 中华按蚊 （只） 嗜人按蚊 （只） 淡色库蚊 （只） 致倦库蚊 （只） 其他蚊种 （只） 捕蚊者 日期: 年 月 日 鉴定者 日期: 年 月 日 附件5 蚊媒幼丝虫自然感染调查表 省 县(市、区) 乡（镇/街道） 行政村（居委会） 自然 村 阳性蚊幼丝虫解剖结果 中华按蚊 嗜人按蚊 淡色库蚊 致倦库蚊 阳 性 蚊 序 号 捕 蚊 日 期 腊 肠 期 条 数 感 染 前 期 条 数 感 染 期 条 数 腊 肠 期 条 数 感 染 前 期 条 数 感 染 期 条 数 腊 肠 期 条 数 感 染 前 期 条 数 感 染 期 条 数 腊 肠 期 条 数 感 染 前 期 条 数 感 染 期 条 数 备 注 1 2 3 4 5 6 7 8 … 捕蚊者 日期: 年 月 日 鉴定者 日期: 年 月 日 解剖者 日期: 年 月 日 镜检者 日期: 年 月 日 张骞健康客 blog