汽油、柴油理化性质及危险特性

全国植物分子育种研讨会摘要集农杆菌介导hsf8基因转化大豆的研究唐晓飞，刘丽君+，杨酷，高明杰，张雷，蒲国峰(黑龙江省农业科学院大豆研究所，哈尔滨150086)大豆是世界上重要的粮食、油料作物，目前中国大豆生产总量不能满足国内对大豆消费需求，其主要原因是大豆产量低。大豆单产水平的提高依赖于大豆品种对不良生长环境的抗性及对养分的有效利用。环境胁迫如干旱、土壤盐渍化和极端温度等严重影响了作物的生长和发育，降低了产量，其中以温度逆境的影响最大。所以培育具有抗逆性强的新品种，对全球的大豆生产将产生重要影响。热激转录因子(HSF)是一类在热应激反应中起重要作用的蛋白质，主要功能是在热休克基因的达过程中与相应热激元件结合，启动基因的转录过程，最终促进热休克蛋白(HSP)基因的表达。本研究是利用基因技术将一种与植物耐高温等逆境相关的hsf8基因连接到含有bar筛选标记基因的双子叶植物表达载体pCAMBIA3300上，以大豆子叶节作为受体，通过农杆菌介导法介导将hsf8基因导入品质性状优良的两个高产大豆新品系哈交5337和哈交5489中，最后获得转基因植株。通过hsf8基因在转基因植株中的高效表达，来实现和提高大豆靶基因HSP70等的表达水平，增强大豆对高温等逆境的耐受性，并为大豆抗逆新品种的选育提供种质资源。在开展大豆遗传转化过程中，探讨了农杆菌介导大豆子叶节转化体系的影响因素，优化了转化条件。其中，通过不同植物生长调节剂浓度条件下不定芽诱导培养基上分化率比较，以哈交5337和哈交5489为材料，了2种大豆种子萌发培养基，9种不定芽诱导培养基。确定哈交5337最适的萌发培养基与芽诱导培养基的组合：GIS7(萌发培养基中不添加6一BA，芽诱导培养基中添加1．7mg／L6一BA和0．1mg／LIBA)和G2S4(萌发培养基中添加1．Omg／L的6一BA，芽诱导培养基中添加1．1mg／L6一BA和0．1mg／LIBA)：确定哈交5489最适的萌发培养基与芽诱导培养基的组合：G1S4(萌发培养基中不添加6一BA，芽诱导培养基中添加1．Img／L6—BA和0．1mg／LIBA)和G2S4(萌发培养基中添加1．Omg／L6-BA，芽诱导培养基中添加1．1mg／L6一BA和0．1mg／LIBA)。在共培养后，采用延迟筛选的方法来提高选择效率。≥i：确定草胺磷筛选浓度为3．5mg／L。构建了含有目的基因JIs彤和bar筛选标记基因的植物表达载体pCAMBIA3300一HSF8，并以哈交5337和哈交5489为受体，采用农杆菌介导技术，获得转化质粒pCAMBIA3300-HSF8的转基因植株，其中Tt代PCR阳性植株17株。采用real-timePCR的方法对T-代抗性植株进行hsf8基因的转录水平的相对定量，确定9株较非转基因植株哈5337表达量明显提高。其中表达量较非转基因植株提高20倍以上的有3株，提高15倍以上的有3株，提高5倍以上的有2株。明显低于哈交5337的hsf8基因表达量的有3株。有1株明显低于哈交5489的hsf8基因表达量。关键词l大豆：农杆菌转化；热激转录因子8基因；’耐热性‘通讯作者，nkyssbd@126．COrn121