DNA—PKcs在云南宣威富源肺腺癌组织中的
达与分期及病理相关性探讨
DNA—PKcs在云南宣威富源肺腺癌组织中
的表达与分期及病理相关性探讨 云南医药20o9年第30卷第4期
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论着?
DNA—PKcs在云南宣威富源肺腺癌组织中的表达与分期及病理相关性探讨 黄梅芳',李文辉z,杨振峰t,罗贤勇
(1.曲靖市第一人民医院肿瘤科,云南曲靖6550o0;2.云南省肿瘤医院放射治疗中心,云南昆明650031)
摘要:目的探讨DNA—PKcs蛋白表达与云南宣威,富源肺腺癌分期及病理分化程度的关系,以期为判断预后,制定
合理治疗计划提供依据.方法采用免疫组化s—P法检测64例入选的云南宣威,富源肺腺癌组织中DNA—PKcs蛋白的表达
情况,并行统计学处理.结果DNA—PKcs的表达强弱与宣威,富源两地域无关,与临床早(Ia~?a)晚(??)分期
有关(P:0.0o6,<O.O1);与组织高,中,低分化程度有关(P=0.O18,<O.o5);同期还检测到20例肺腺癌组织中
DNA—PKcs的表达与其相对应的癌旁正常组织相比,差异有非常显着性(P=0.Oo76,<0.O1).结论在云南宣威,富源肺
腺癌组织中DNA—PKcs均呈阳性表达,且临床分期越晚,病理分化程度越低,其表达越强,预示DNA—PKcs可能成为云南
宣威,富源肺腺癌诊治和预后的一个生物标记物.
关键词:DNA依赖蛋白激酶;肺腺癌;免疫组化;病理
中图分类号:R734.2文献标识码:A文章编号:10o6_4141(2009)o4一O4|D7—04 Rek0lIsllipbeeenexpressi0n0fDNA—PKcsand8ta罢aIldpa?10l0gicalmd0fceudire撕0ninhmg
aden0carcino?m0ccugatXuallweiaIldFu)maIlC0岫es,YlulnaI1.HJvG-,LJ_e力u,yA
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zh朋g,e,aJ.(Dep州men,0f0nc0j0,erstPe叩Je『sH0spj脚DfQng,yu肋an6550o0,ch
Abs缸t:ObjecveT0inVestigatethere1ationshipbetweenexpressi0n0fDNA—PKcspr0teinandstang
systemandpat}lol0g)r0flungaden0carcinoma,andt0pmposetheguidelinefl0rdia罢osisandtreatment.ModsThe
expression0fDNA—PKcsin64caseswlungadenocarcinomawasdetenedbyimmun0hist0chemicaltechnique.
Resul乜Analyzingtheexpression0fDNA—PKcspmtein0flungaden0carcinomatissue,tllerewasnodiFerence
betweent|latinXuaJlweiandFuyuan;butobviousdirencesinstagesIa一?aand?a一?P=0.0o6),aIldin
path0lo百caland0fceUdi妇『erentiation(0.018);Wea1s0f0undtherewas0bviousdifjferencebetweenlung
adenocarcin0matissueaJ1dlungno珈altissue(0.0076).C0ncl岫i0nelatterclinicalstagingaJ1dtheloWer pat}lologicalgrandare,thehigherexpression0fDNAPKcsis肌eexpressi0n0fDNA—PKcsproteincanberegardedasa
tum0rmarkerandanindex0fpmgn0sisinlungadenocarcinoma0ccurTinginXuanweiandFu
)ruaJ1C0untiesinYunnan.
Keyw0r(1s:DNA—PKcspmtein;Lungaden0carcin0ma;Immunohist0chemistry;Pa山ol0gy
目前全世界范围内肺癌发病率均呈逐年上升
趋势.l973—1975年全国癌症调查表明云南宣威
肺癌死亡率居全国第二位,主要是农民肺癌,而
女性肺癌死亡率居世界第一.据l99O,l992年抽
样调查:宣威肺癌死亡率为23.14/lO万人口,在农
村地区是最高的.另一项调查研究表明【l:富源县
20022O04年肺癌粗发病率为54.52/lO万,是全国 平均水平的3.3倍,属国内肺癌发病率最高的地区 之一.富源与宣威相比邻,其肺癌发病与宣威相 似,特点是发病率高,以中青年及女性肺癌更突 出,病理类型以肺腺癌居多.
肺癌的临床分期及病理分化在确定治疗计划 及疗效评估,判断预后等方面均有重要意义,尤 其是非小细胞肺癌(NscLC).近年来,利用分子 生物学检测各种肿瘤标志物和癌基因以辅助判断 预后,指导治疗成为肿瘤学研究热点,针对DNA 依赖蛋白激酶(DNA—PK)及其三个亚单位I2】与肿 瘤相关性研究
较多,且多数认为其表达不但 与肿瘤的病理类型,分期及侵袭度有关,还与肿 瘤的发展状况及阶段有关嘲.本文采用免疫组化 s—P法专门针对云南宣威,富源特殊的肺腺癌病 例,探寻癌组织中DNA—PKcs的表达与其临床分期 收稿日期:2009-o2—26
作者简介:黄梅芳(197O一)女,1994年毕业于昆明医学院,硕士研究生,副主任医师,
主要从事肿瘤的化疗及放射治疗.
E—Inairnfy8l@sin8枷
云南医药2oo9年第30卷第4期
及病理分化程度有无相关性,以期指导判断预后,件,计数
采用x检验.
为制定治疗计划提供依据.结果
材料与方法
一
,病例资料:收集我院2O03年l0月,2007 年2月病理确诊并手术切除的宣威,富源籍肺癌病 人共64例,其中男39例,女25例,年龄30—73岁, 中位年龄50-4?4.9岁.所有病例均有完整的临床
资料及完好的且足够做免疫组化的存档蜡块,全 部病例病理类型均为肺腺癌,其中高分化l6例,中 分化21例,低分化27例;I搠17例,Ib期5例,?a期 9例,?b期8例,?a期9例,?b期7例,?期9例. 二,主要试剂和方法:DNA—PKcs浓缩型单克 隆抗体(0.1ml/200ug,克隆号l8—2),s—P超敏试 剂盒(即用型,鼠/兔抗,编号Kit一9901),胰酶消 化试剂盒,DAB显色液等.采用免疫组化sP法检 测64例肺腺癌组织中DNA—PKcs的表达,显微镜下 观察,计数并记录,cM2000c北航医学病理图象 分析仪分析,数码摄影.
三,结果评定及统计学处理:镜下观察氧化 型DAB显色形成的黄色颗粒定位于细胞核上.根 据胞核是否染色及染色深浅,阳性细胞的数量, 每张切片选五个高倍视野取平均值,采用染色强 度+细胞染色阳性百分率进行综合评分.按着色 细胞染色强弱:O:黄色,1=棕黄色,2:棕褐
色;按阳性细胞计数百分率:0分<25%,1分25% ,
50%,2分50%,75%,3分>75%;最终分值为 0,1,2,3,4,5.数据处理使用l1.0sPSS统计软 ,
,DNA—PKcs在肺腺癌组织中的表达与各临 床指标的关系:结果显示,64例肺腺癌组织 DNA—PKcs均呈阳性表达,未见完全阴性表达的病 例见图1,图2.将其表达情况在病理亚型,分化 程度及AJcC分期中依据综合评分方式分组为:弱 表达组(0—2分),明显表达组(3—4分),强表达 组(5分),并行统计学处理见表1.
结果发现,DNA—PKcs的表达强弱与宣威,富 源两地域无关,与临床分期(按早期Ia一?a与晚 期?b一?相比)有关;在病理方面,DNA—PKcs的 表达与肺腺癌病理亚型有关,且按高,中,低分 化分组,组间亦显示有统计学意义(P<0.05).
实验中发现一男性,47岁,宣威籍,农民. 右肺上叶癌行右肺上叶切除术,术后病理检查为 细支气管肺泡癌(Ia,TN0M.),以高分化为主伴灶
PKcs表达呈浅黄,阳 性低分化.在高分化区DNA—
性细胞计数5%一20%(0分),属弱表达;而在同一 切片低分化区,DNA—PKcs表达呈棕黄,阳性细胞 计数达90%左右(5分),属强表达.见图3,图4. 二,DNA—PKcs在癌组织与癌旁正常组织的表 达情况:实验中发现,有20例肺腺癌组织可同时 找到与之相对应的癌旁正常组织,相同实验条件 下检测其DNA—PKcs的表达(见表2).结果发现, 癌组织中DNA—PKcs表达明显高于癌旁正常组织, 有非常显着性差异(P=0.o078)见图5,图6. SP×100SP×400
图1肺低分化腺癌组织DNA—PKcs呈强表达 SP×10()SP×400
图2肺高分化腺癌组织DNA—PKcs呈弱表达 SP×40SP×4o0
图3同一肺腺癌组织同一切片低分化区呈强表达 SP×4O0
图4高分化区呈弱表达
云南医药20HD9年第3O卷第4期
表1DNA—PKcs在肺腺癌病理,病理亚型,AJCC分期中的表达及意义
SP×4ooSP×400
图5癌旁正常组织图6肺腺癌组织
DNA—PKcs呈阴性表达DNA—PKcs呈阳性表达 讨论
DNA—PK是DNA非同源末端重组过程的关键 酶,广泛存在于哺乳动物细胞内,由一个催化亚 单位(DNA—PKcs)和两个与DNA末端相结合的调节 亚单位异构二聚体(Ku70,Ku80)组成f21.它除了在 DNA双链断裂(DsBs)修复中起重要作用外,还可 通过磷酸化多种蛋白质底物,广泛参与DNA转录 和细胞凋亡等过程.在本组试验中,DNA—PKcs 的表达强弱与性别无关,与肿瘤临床分期及病理 分化程度有关,表现为随肿瘤分化程度降低,临 床分期越晚,其DNA—PKcs的表达越强;在病理亚 型方面,其DNA—PKcs的表达表现为细支气管肺泡 癌高于其它肺腺癌,且均高于肺腺鳞癌,这与余 少平等同采用免疫组化sP法检测l13例NsLcc组织 中DNA—PKcs的表达顺序依次为细支气管肺泡癌> 腺癌>腺鳞癌>鳞癌相符.实验中还发现一患者 同一切片上高分化区呈弱表达,低分化区呈强表 达,这与我们整体的研究结果相一致,也与Hol— gersson等I8J报道的恶性淋巴瘤患者DNA—PK表达的 高低与淋巴瘤的恶性程度呈正相关相符;在观察 到的20例肺腺癌组织中DNA—PKcs表达明显高于其 相对应癌旁正常组织,且表达率为100%,差异有 非常显着性(P<0.01).这与隋建丽等嗍报道的14例 ,NscLc癌组织中DNA—PKcs的表达水平明显高于 癌旁正常组织相一致,但表达率明显高于其报道 的89.38%.也与MolL等【呶寸乳腺癌,胰腺癌,肝癌 等癌组织与其正常组织中DNA—PKcs的表达研究提
示明显高于正常组织相符.
综上所述:DNA—PKcs的表达与云南宣威,富
源肺腺癌组织的病理亚型及分化程度,临床分期
均有关,表现为分期越晚,分化程度越低其
DNA—PKcs的表达越强;且明显高于癌旁正常组 织,这一结论可望指导此两地肺腺癌的治疗及预
后判断,也进一步证实了有学者提出的DNA—PKcs 可能成为NSCLC一个生物标记物这一推论]. [参考文献]
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胰岛素与葡萄糖对ICR小鼠早期胚胎体外培养的影响
彭信刊,周红林,孟丽燕,马兰,苏莹,杜玲
(昆明医学院第二附属医院妇科,云南昆明65OlO1)
摘要:目的探讨胰岛素与葡萄糖对lcR小鼠早期胚胎体外发育的影响.方法同时添加胰岛素+葡萄糖的czB培养
液对ICR小鼠胚胎进行体外培养,观察囊胚发育率,孵化胚率和囊胚细胞数的变化,并研究两者最佳的浓度搭配.结果
在czB培养液中同时加入葡萄糖与胰岛素可促进小鼠l一细胞胚胎体外培养,且
0.O5g?ml胰岛素与5mmo卜I『葡萄糖添
加组囊胚率,孵化胚率和囊胚细胞数均显着高于其他各浓度添加组.结论联合添加
胰岛素和葡萄糖的培养液对小鼠胚胎体
外发育具有促进作用,且胰岛素浓度为0.05咖l,葡萄糖浓度为5mmo儿时促进作
用最大.
关键词:胰岛素;葡萄糖;小鼠;胚胎;体外发育
中图分类号:Q813.7文献标识码:A文章编号:10o6—4141(20o9)o4一o4l0—05
rI1leiIlnuence0finsuhn趴(1glucoseontlledevelop?
ent0fm0usepreimplalltneIIIbryosinvi.E?G
xin—kan,zHoUHong—hng,MENGb—
yan,eta1.(Dept.o{Gyneco1ogy,TheSecondAmliatedHospitalofKunming MedicalC0l1e昏e.Kunming65olo1,China)
Abs垃
act:Objec,reT0evaluatetheinnuence0finsulinanduc0seonthedevelopmentofmouse
preimplantati0nembry0inVitr0.MetllodsOne—
cellmouseembryos,collectedflr0mutenenushing,were cuhutedf0r120hoursintheCzBmediasupplementedwithinsulinanducoseatdiFerentc0nce
ntrations.Therate
0fdeveIopmenttoblastocystandthecellnumber0feachblastocvstweredetemined.ResultsI
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c0ncentmtion0f0.05ng/lmlandglucoseattheconeentrationof5mmol/Icausedasigncantinc
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blastocyst,hatchedblastocystandtheceUnumberofbl习
Lstocyst.C0nclusionInsulinanducosecanpmm0tet|le inVitr0devel0pment0fmousepreimplantationembryo. Keywords:Insulin;Glucose;Mouse;Embryo;Developinginvitr0 收稿日期:2oo9—04一o3
作者简介:彭信刊(1983~)女,2oo9年毕业于昆明医学院,妇产科学硕士研究生,从事
生殖内分泌方面的研究.