板蓝根解藜芦毒的实验

机能实验学 创新性#实验# 板蓝根对小鼠心肺系统的影响及对藜芦毒的解毒作用的探究 专业班级：精卫1101班 组    员：黄雨轩  赵立刚 吴悔    吴慕尧 2013年5月30日 一 研究背景与思想 板蓝根，又称靛青根、蓝靛根，是一种中药材。为十字花科植物菘蓝和草大青的根或爵床科植物马蓝的根茎。其主要含靛蓝，靛玉红，蒽醌类、β-谷甾醇，γ-谷甾醇以及多种氨基酸，还含黑芥子甙，靛甙。具有清热解毒、凉血消肿、利咽之功效。被人广泛用于对流行疾病的防治。近年来，板蓝根作为传统中药，在临床上的应用变得越来越广泛，最新研究表明，板蓝根水浸湿和活性提取物对肝炎病毒，甲型流感病毒，乙型流感病毒等均具有抑制作用，其对甲型流感病毒的直接作用，治疗作用和预防作用，有效率分别为100%，60%，67%效果显著。其体外抗病毒筛选也基本证实其确切疗效，尽管，近期发现发现临床上有过量服用板蓝根会对少年儿童造成消化系统和造血系统的损害的报道。但板蓝根在“非典时期”以及H1N1病毒流行展现出来的“神奇”功效，仍让国外专家对其抗病毒机制产生浓厚的研究兴趣。在09年的美国抗病毒性流感峰会上，板蓝根成为首个获美国国立卫生研究院资助的中药研究项目。 藜芦，百合科藜芦属植物，又名山葱，有毒。其有毒成分为藜芦碱，藜芦苇碱等多种生物碱，毒理作用与乌头碱相似，主要作用于运动神经感觉神经及迷走神经，对中枢神经及横纹肌有先兴奋后麻痹的作用。成人口服藜芦须根70mg即发生中毒。藜芦中毒，出现恶心，呕吐，抑制心肌的兴奋传导，可出现传导阻滞。由于其1%-5%水浸液对蚊、蝇、蚤、虱等昆虫有强烈的毒杀作用。广泛用于农业防治和杀虫剂的生产。国外产绿藜芦（美国及加拿大），白藜芦（欧洲）根茎中的原藜芦碱A和B等还具有降压作用，并应用于高血压的治疗。 有事实说明，用板蓝根与藜芦同服（各2.0g/kg），能解藜芦毒，降低死亡率；若藜芦中毒后再用之，则无效；这是不是反映板蓝根和藜芦有着互相中和的作用以及板蓝根对神经兴奋传导起到调节作用？另外，板蓝根中的主要成分之一靛玉红，是一种临床上用于治疗慢性粒细胞白血病的物质，某些患者在长期用药后会出现胸闷，气促，心脏扩大、肺动脉增宽、心电图显示电轴右偏、肺型P波、肺动脉高压等不良反应，停药后即消失。那么板蓝根作为我们生活中使用最为普遍的一种药物究竟对我们的身体由其是心肺系统会造成什么影响？它又是如何发挥解毒作用？藜芦和板蓝根同时或分开服用会对我们身体会造成何种影响？面对这些问题，我们将以小鼠作为实验对象，从呼吸功能，心脏功能，神经传导三个方面逐个探讨其影响情况，为进一步研究板蓝根对人体的治疗机制找寻方向。 二．研究目的和主要研究内容 研究目的 （1） 测定不同剂量的板蓝根对小鼠心脏，呼吸功能及神经传导的影响。 （2） 探究板蓝根对藜芦毒性的解读毒方法及机制 （3） 熟悉动物模型制作及心肺功能及神经传导功能的评定方法 主要研究内容 （1） 将不同浓度的板蓝根口服给小鼠，随后观察小鼠的心脏功能变化，呼吸功能变化以及对神经传导的影响 （2） 测定单独服用板蓝根，单独服用藜芦，以及同时服用藜芦和板蓝根的小鼠，心脏，呼吸功能以及神经传导的变化。观察板蓝根的解毒效应 三  实验与步骤 1 实验小鼠的筛选 购进20-30只体重差异不超过0.05KG的小鼠，环境喂养2D，进行滚轮测试，选取成绩靠前的10只小鼠，补充性喂养3D，使其恢复正常生活状态。并随即分成2组，每组5只备用。 2 测定不同剂量的板蓝根对于小鼠的影响。 将一定剂量的板蓝根冲剂与水混合，调成16.0mg/ml板蓝根溶液，取一定量的板蓝根溶液，用倍比稀释法，将其4次稀释，留样备用。实验前对小鼠空腹处理2小时，取一组小鼠，分成ABCDE5个小组，A B C D组按体重0.02ml/g依次注射等量的，浓度依次降低的板蓝根溶液，E组注射与其等量的生理盐水溶液。2分钟后用BL-410观察每组的心率，呼吸频率，深度及其迷走神经动作电位传导的速率。 3 测定板蓝根与藜芦对小鼠的影响。 取上实验中制成的2.0mg/ml板蓝根溶液，另制备1.0mg/L藜芦碱溶液，备用，取出剩余1组小鼠，分成ABCDE 5个小组，A组根据体重注射与实验剂量相符的生理盐水，B组按体重0.02ml/g注射板蓝根溶液，C组按体重0.01ml/g注射制备好的藜芦碱溶液，D组同时注射B C中剂量的板蓝根溶液及藜芦碱溶液，E组先按体重比例注射藜芦碱溶液，2分钟后，再注射按体重比例的板蓝根溶液。ABCD4组在注射的2分钟后，观察心率，呼吸频率，深度及迷走神经动作电位传导速率的变化，E组注射藜芦碱后的2分钟和注射板蓝根溶液的两分钟后各自观察一次指标变化。 4 数据的处理与分析 采用BL-410生理实验系统纪录上述的各项指标，测出正常的小鼠心率，绘出正常的小鼠呼吸频率图，及其神经双相AP刺激图。与各实验组进行比较。 四 实验的创新性和可行性 （1）板蓝根在我们生活里非常广泛，但我们对它药理作用不太了解，通过本实验可以知道板蓝根对人体心脏，呼吸功能及神经传导的影响。 （2）藜芦是最常用的杀虫剂，如何避免藜芦中毒以及中毒后如何救治，这与我们每个人都息息相关。 （3）板蓝根解藜芦毒是一个很少有人知道的方法，如果证实可行，将应用于更多的临床。 （4）实验对象为小鼠，非常容易获取的操作也比较简便的实验对象。在实验设计中充分体现了随机对照重复的基本原则，比如实验对象的的随机选择与随机分组，体现了随机性。 （5）本实验中所采用的技术手段都十分成熟，如BL-410生理实验系统。 参考文献 1.《 机能实验学 》罗自强、管茶香、陈小平、邓恭华、许建平 2.《 生理学 》第七版 朱大年、吴博威、樊小力。人民卫生出版社 3.《关于板蓝根和藜芦以及板蓝根解藜芦毒的介绍》 百度百科