hplc法测定心舒康胶囊中人参皂苷rg1、re的含量
HPLC法测定心舒康胶囊中人参皂苷Rg1、
Re的含量
【摘要】 目的:建立心舒康胶囊中人参皂苷Rg1和Re含量的测定方法。方法:应用高效液相色谱法(HPLC)~固定相:C18柱~流动相:乙腈-0.05%磷酸溶液(1:4),检测波长203nm~测定心舒康胶囊中人参皂苷Rg1、Re~的含量。结果:该方法测定人参皂苷Rg1、Re的线性范围为1.0-10.0μg~其加样回收率为95.3-100.4%~精密度?2%。结论:方法简便准确~可为心舒康胶囊的含量测定方法提供借鉴。
【关键词】 心舒康胶囊,人参皂苷Rg1、Re,高效液相色谱法
心舒康胶囊由三七、丹参、黄芪等中药组成~经科学方法提取有效成分精制而成~用于益气活血、补心脑~为我院治疗心血管疾病的经验方。其中三七(Radix et rhizoma
notoginseng)是我国名贵的中药材~其主要活性成分为多种皂苷~且具有多种显著的药理作用~含三七的复方制剂常以其作为指标成分进行含量测定。
采用高效液相色谱检测法对心舒康
胶囊中人参皂苷Rg1、Re进行了含量测定。在样品预处理中~采用大孔树脂吸附分离法直接对样品提取液进行净化处理~并采用C18柱~以乙腈-0.05%磷酸溶液(1:4)为流动相~检测波长203nm~可取得满意的结果。
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1.1 仪器 Waters 515
高效液相色谱仪~Waters Millennium32色谱工作站。转蒸发仪(上海青浦沪西仪器厂)~FQC 100超声波清洗机(无锡福尼达电子公司,频率为40KHZ)~SC202 1型电热恒温干燥箱(通州市沪通制药机械设备厂)~FA1004型十万分之一电子天平(上海精密科学仪器有限公司)~电热恒温水浴锅(上海医疗器械五厂)。
1.2 试药 人参皂苷Rg1和Re对照品(中国药品生物制品检定所)~心舒康胶囊(解放军102医院制剂室提供~批号:040513、041016、050431)~乙腈为Merck色谱纯~纯净水~其他试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 色谱及检测条件 色谱柱:C18柱,流动相:乙腈 0.05%磷酸溶液(1:4),流速:1ml/min,柱温:室温,在上述色谱条件下~人参皂苷Rg1和Re分离效果良好。
2.2 供试品溶液的制备 取本品装量差异项下的内容物~混匀~取约0.25g~精密称定~置索氏提取器中~精密加入甲醇30ml~置80?水浴上加热回流3h~残渣挥干~加水10ml使溶解~加石油醚(30-60?)提取2h~每次10ml~弃去醚液~水液通过D101大孔树脂柱(内径1.5cm,长15cm)~以水50ml洗脱~弃去水液~再用20%乙醇洗脱~弃去洗脱液~用80%乙醇洗脱~收集洗脱液70ml~蒸干~残渣用甲醇溶解并转移至10ml量瓶中~加甲醇至刻度~摇匀~滤过~取续滤液~即得。
2.3 对照品溶液的制备 取人参皂苷Rg1和Re对照品适量~精密称定~加甲醇分别制成每1ml含0.2mg的溶液~即得。
2.4 线性关系考察 分别精密吸取对照品液50、40、25、10、5μl进样~按上述色谱条件分别测定峰面积,以峰面积值为纵坐标~对照品进
样量为横坐标绘制
曲线~回归方程分别为:Rg1:lgY,6.20+1.28 lgX(r,0.9998)~Re:lgY,6.06+0.23 lgX(r,0.9998)~线性范围为1.0-10.0μg。
2.5 精密度试验 取对照品溶液适量连续进样5次,测得各峰面积,计算RSD,结果见
1。表1 精密度
2.6 稳定性试验 取同一样品供试品溶液~分别在0、2、4、6、8h进样测定~测定结果表明在8h内稳定~RSD?2.1%。
2.7 重现性试验 取同一样品(批号:041016)~按供凝血酶(上海试品溶液制备项操作~制备5份,按色谱条件测定含量。结果人参皂苷Rg1、人参皂苷Re的含量(mg/g)RSD分别为1.9924(1.6%)~0.7630(1.7%)(n,5)。
2.8 样品测定 取样品供试品溶液在上述色谱条件下测定~结果见表2、表3。表2人参皂苷Rg1样品测定结果表3 人参皂苷Re样品测定结果
2.9 加样回收率试验 精密称取己知含量的样品适量(批号:050431)~分高中低量加入一定量对照品~按供试品溶液制备项操作~制备溶液~测定~计算,结果见表4、表5。表4 人参皂苷Rg1加样回收率试验
3 讨论
心舒康胶囊中多为水溶性成分~而待测成分极性亦较大~如何除去其他成分对测定的干扰~是预处理中首要解决的问题。在含皂苷样品预处理中~多用正丁醇液萃取,1,及大孔树脂柱层析纯化,2-3,的方法~研究发现大孔树脂柱层析分离除去干扰成分的效果较好~而且具有样品用量少、操作步骤简单、快捷等优点。
参考药典方法,4,可以很好测定本品中人参皂苷Rg1、人参皂苷Re的含量~有利于很好的控制本品的质量。
【参考文献】
,1,吴广宣.野山参与园参中皂甙含量的对比分析,J,.药学通报,1988~23(7):397.
,2,唐第光.大孔树脂吸附法提取三七总苷工艺探讨,J,.中成药,1990~12(3):5.
,3,刘中秋~蔡 雄.大孔吸附树脂富集三七总皂苷工艺研究,J,.中国实验方剂学杂志~2001~7(3):4-6.
,4,国家药典委员会.《中国药典》1部,M,.北京:化学工业出版社~2005.7-8.
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