氟苯尼考纳米乳的制备

药 理 论 文 班级:12生技普 姓名:杨贵宾 学号:262012111057 氟苯尼考纳米乳的制备 简介:氟苯尼考有很多的实用价值,但还存在一个难以解决的课题,那就是难溶于水、利用率低,不能充分发挥它的药效,这个问题一直没有很好的解决。为了制备出高效低毒稳定的 氟苯尼考纳米乳,采用单因素筛选,通过相图优化制备工艺制备纳米乳,并对氟苯尼考纳米 乳的稳定性、形态和粒径分布、含量等指标进行考察。结果显示,以吐温-80、甘油、乙 酸乙酯和氟苯尼考为原料制备的氟苯尼考纳米乳品质较好,其最佳质量比为6∶3∶1,粒 径为5~70nm,经高速离心、留样观察,外观和含量未发生明显变化,但对光不稳定 关键词:氟苯尼考;纳米乳;制备 氟苯尼考,又称氟甲砜霉素,具有抗菌谱广、吸收良好、体内分布广、安全高效、不易 产生耐药性等特点,对敏感菌所致的畜禽细菌性疾病治疗效果显著,该药主要应用于水产 养殖业,主要用于治疗由敏感菌引起的猪、牛、鸡和鱼的细菌性疾病,生产的剂型有水针剂、 溶液剂和散剂等。纳米乳也称微乳,粒径一般为1~100nm,是由油相、水相、面 活性剂和助表面活性剂按适当比例形成的一种稳定透明、低黏度的乳剂。只要四相的组成适 当,即可形成均匀透明或略显乳光的液体,为热力学稳定体系。纳米乳具有以下优点:物 理稳定性好,可很大程度提高药物的稳定性及难溶性药物在水中的溶解性;粒径小且均匀, 可以提高药物的分散度,促进药物在体内的吸收;可提高药物的生物利用度;制备工艺简 便,易于保存。本试验拟将氟苯尼考制成一种纳米乳,并对其理化性质及体外药效进行考 察,以期为氟苯尼考纳米乳在兽医临床的应用提供理论依据。 1材料与方法 1.1材料 1.1.1试剂:Tween-80;无水乙醇;丙二醇;甘油;蓖麻油;液体石蜡;乙 酸乙酯;苏丹红;亚甲蓝;氟苯尼考品 1.1.2仪器:超声波清洗器;电热恒温干燥箱;低速台式离心机;高速台式离心机;恒 温水浴锅;电子天平;电子显微镜;冰箱 1.2方法 1.2.1氟苯尼考纳米乳的制备根据空白纳米乳制备试验,得出最佳纳米乳体系为吐 温-80/甘油/乙酸乙酯/蒸馏水。将定量的氟苯尼考放入烧杯中,用适量的N,N-二 甲基酰胺使其完全溶解。按吐温-80与甘油质量比为2∶1的比例称取处方量,将混合 表面活性剂、油相以9∶1、7∶3、6∶4的质量比混合均匀,搅拌同时缓慢滴加蒸馏 水。在滴加蒸馏水过程中,会出现黏度较大、浑浊的状态,继续滴定,当体系呈透明液体时,加水量。 1.2.2氟苯尼考纳米乳类型的鉴别纳米乳的鉴别方法采用离心法和染色法。本试验采取染色法:取相同体积的纳米乳2份,分别同时加入2滴苏丹红Ⅲ染料和亚甲蓝染料溶液,静止放置,观察2种染料(红色和蓝色)在纳米乳中扩散速度的快慢以及外观的变化。苏丹红Ⅲ为油溶性染料,易在油相中扩散;亚甲基蓝为水溶性染料,易在水溶液中扩散;如蓝色的扩散速度大于红色的扩散速度,则为O/W型纳米乳;反之为W/O型纳米乳;两者一样快,则为双连续型。 1.2.3氟苯尼考纳米乳的含量测定标准曲线的绘制:精密称取氟苯尼考标准品,加水配制成100mg/L的标准液,然后用蒸馏水分别稀释成1、5、10、15、20、30、40、50mg/L的溶液,用蒸馏水作为对照,用紫外分光光度计测量其在254 nm最大吸收波长处的吸光度。回收率测定:取氟苯尼考对照品适量(B),加入已知测定含量(A)的同一批样品,按照方法配置待测溶液,将测定的吸光度带入标准曲线方程计算出测得值(C)。根据回收率公式,计算得出回收率(%),回收率=(C-A)/B×10 0%。精密度测定:配制3个不同质量浓度的氟苯尼考纳米乳溶液,以空白纳米乳稀释液为对照,用紫外分光光度计于1d内0、2、4、6、8、10h测定氟苯尼考纳米乳中氟苯尼考的含量,计算日内精密度;连续7d测定氟苯尼考纳米乳中氟苯尼考的含量,计算日间精密度。氟苯尼考纳米乳中氟苯尼考含量测定:精密称取3份氟苯尼考纳米乳制剂适量置10mL量瓶中,加蒸馏水定容后,以空白纳米乳稀释液为对照,由标准曲线计算氟苯尼考纳米乳制剂中氟苯尼考的含量。 1.2.4氟苯尼考纳米乳包封率的测定将制得的氟苯尼考纳米乳液取3份,每份0.2 mL,加无水乙醇稀释至10mL,紫外分光光度法测定得到C0,取同一纳米乳液约5 mL,13000r/min,离心30min,取上清夜0.2mL,加无乙醇,稀释至10mL,紫外分光光度法测定得到C1。包封率=(系统中的总药量-液体介质中未包封的药量)/系统中的总药量×100%,并规定包封率不得小于80%[12]。 1.2.5氟苯尼考纳米乳的理化性质氟苯尼考纳米乳的外观、溶液颜色与澄清度检测:外观,直接观察。溶液颜色与澄清度根据《中国药典》(2005年版)Ⅱ部附录I XA溶液颜色与IXB澄清度检查法进行检查。形态学观察:采用透射电镜研究纳米乳的形态。选取空白纳米乳和氟苯尼考纳米乳,用去离子水稀释,取1滴稀释液将其滴在覆有支持膜的铜网上,静止10min后,再滴加质量分数为3%的磷钨酸溶液于铜网上负染5min, 自然挥干,在透射电子显微镜下观察,拍照。粒径分布:测定时,以聚苯乙烯球形小珠(2 20±6)nm作为外标,光散射测定角度为90°。在样品池中加入氟苯尼考纳米乳至3/4处(用水稀释至计数速率在50~200Kcps范围内),将样品池插入样品槽中,盖上激光粒度分布测定仪的仓盖,以测定其粒径分布。 1.2.6氟苯尼考纳米乳稳定性试验高速离心试验:将氟苯尼考纳米乳置于离心管中,放入高速离心机中,13000r/min离心15min,观察是否有沉淀、浑浊、分层等现象发生。若澄清透明,用水稀释,看是否仍保持澄清透明态。光稳定性试验:取3批氟苯尼考纳米乳,每批3份装入5mL安瓿瓶内,于(4500±500)lx下放置10d,于第0、5和10天定时取样,对其外观变化、p H及含量进行检测。热稳定性试验:取氟苯尼考纳米乳3批,每批3份,在冰箱-4℃、室温25℃和恒温箱60℃、相对湿度(60±5)%条件下放置9个月。每3个月取样1次,分别于0、3、6、9个月,对其外观变化、p H及含量等进行检测。 2结果与分析 氟苯尼考纳米乳的制备经观察,混合表面活性剂与油相质量比为9∶1时能形成均质、透明的具淡蓝色乳光的氟苯尼考纳米乳,当混合表面活性剂与油相质量比为7∶3和6∶4时所制得的氟苯尼考纳米乳为乳白色的浑浊液,故以9∶1为其最佳的处方配比