2010药典附录ⅨQ.农药残留量测定法

2010药典附录ⅨQ.农药残留量测定法 附录?,.农药残留量测定法 本法系用气相色谱法(附录? E)测定药材和饮片及制剂中部分有机氯、有机磷和拟除虫菊酯类农药，除另有规定外，按下列方法测定。 一、有机氯类农药残留量测定 色谱条件与系统适用性试验 弹性石英毛细管柱(30m×0.32mm×0.25μm) SE-54，63Ni-ECD电子捕获检测器。进样口温度230?;检测器温度300?。不分流进样。程序升温:初始100?，每分钟10?升至220?，每分钟8?升至250?，保持10分钟。理论板数按α 6-BHC峰计算应不低于1×10，两个相邻色谱峰的分离度应大于1.5。 对照品储备液制备 精密称取六六六 (BHC)[α-BHC，β-BHC，γ-BHC，δ-BHC),滴滴涕 (DDT)[ PP’-DDE，PP’-DDD，OP’-DDT，PP’-DDT]及五氯硝基苯 (PCNB)农药对照品适量，用石油醚(60,90?)分别制成每 1ml约含4,5μg的溶液，即得。 混合对照品储备液的制备 精密量取上述各对照品储备液0.5ml置10ml量瓶中,用石油醚(60,90?)稀释至刻度，即得。 混合对照品溶液的制备 精密量取上述混合对照品储备液，用石油醚(60,90?)制成每 1L含0μg、1μg、5μg、10μg、50μg、100μg、250μg的溶液，即得。 供试品溶液制备 药材和饮片 取供试品于60?干燥4小时，粉碎成细粉，取约2g，精密称定，置100ml具塞锥形瓶中，加水20ml浸泡过夜，精密加丙酮40ml，称定重量，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用丙酮补足减失的重量，再加氯化钠约6g及二氯甲烷30ml，称定重量，超声处理15分钟,再称定重量，用二氯甲烷补足减失的重量，静置(使分层)，将有机相迅速移入装有适量无水硫酸钠的100ml具塞锥形瓶中，放置4小时。精密量取35ml，于 40?水浴上减压浓缩至近干，加少量石油醚(60,90?)如前反复操作至二氯甲烷及丙酮除净，用石油醚(60,90?)溶解并转移至10ml具塞刻度离心管中,加石油醚(60,90?)至5ml。小心加入硫酸 1ml，振摇1分钟，离心(3000转,分)10分钟。精密量取上清液2ml置具刻度的浓缩瓶中，连接旋转蒸发器，40?下(或用氮气)将溶液浓缩至适量、精密稀释至 1ml，即得。 制剂 取供试品，研成细粉(蜜丸切碎，液体制剂直接量取)，精密称取适量(相当于药材和饮片2g)，以下按上述供试品溶液制备，即得供试品溶液。 测定法 分别精密吸取供试品溶液和与之相对应浓度的混合对照品溶液各1μl，分别连续进样3次，取3次平均值，按外标法计算供试品中9种农药残留量。 二、有机磷类农药残留量测定 色谱条件与系统适用性试验 弹性石英毛细管柱(30m×0.25mm×0.25μm)DB-17MS(或HP-5)，氮磷检测器(NPD)。进样口温度230?;检测器温度300?，不分流进样。程序升温:初始120?，每分钟10?升至220?，每分钟5?升至240?，保持2分钟，每分钟20?升至270?，保持0.5分钟。理论板数按敌敌畏峰计算不低于6000，两个相邻色谱峰的分离度应大于1.5。 对照品储备液制备 精密称取对硫磷、甲基对硫磷、乐果、氧化乐果、甲胺磷、久效磷、二嗪农、乙硫磷、马拉硫磷、杀扑磷、敌敌畏、乙酰甲胺磷农药对照品适量，用乙酸乙酯分别制成每1ml约含100ug的溶液，即得。 混合对照品储备液的制备 精密量取上述各对照品储备液1ml，置20ml棕色量瓶中,加乙酸乙酯稀释至刻度，即得。 混合对照品溶液的制备 精密量取上述混合对照品储备液，用乙酸乙酯制成每 1mL含0.1μg、0.5μg、1μg、2μg、5μg的溶液，即得。 供试品溶液制备 药材和饮片 取供试品粉末(过二号筛)约5g，精密称定，加无水硫酸钠5g，加入乙酸乙酯50~100ml，冰浴超声处理3分钟，放置，取上层液滤过，药渣加乙酸乙酯30~50ml，冰浴超声处理2分钟，放置，滤过，合并两次滤液，用少量乙酸乙酯洗涤滤纸及残渣，与上述滤液合并。取滤液于40?以下减压浓缩至近干，用乙酸乙酯转移至5ml量瓶中，并稀释至刻度，精密量取1ml，置活性炭小柱,120~400目，0.25g,内径0.9cm(如Supelclean ENVI-carb SPE Tubes,3ml活性炭小柱)，乙酸乙酯5ml预洗,，置多功能真空样品处理器上，用正己烷-乙酸乙酯(1:1)混合液5ml洗脱，收集洗脱液，置氮吹仪上浓缩至近干，精密加入乙酸乙酯1ml使溶解，即得。 测定法 分别精密吸取供试品溶液和与之相对应浓度的混合对照品溶液各1μl，分别连续进样3次，取3次平均值，按外标法计算供试品中12种农药残留量。 三、拟除虫菊酯类农药残留量测定 色铺条件与系统适用性试验 弹性石英毛细管柱(30m*0.32mm*0.25um)SE-54(或 DB-5)，63Ni-ECD电子捕获检测器。进样口温度270?，检测器温度330?。分流 比20:1;5:1(或根据仪器设置选择最佳的分流比)。程序升温:初始160?， 保持1分钟，每分钟10?升至278?，保持0.5分钟，每分钟1?升至290?，保持5分钟。理论板数按溴氰菊酯峰计算应不低于1*10〈5〉，两个相邻色谱峰的分离度应大于1.5。 对照品贮备液的制备 精密称取氯氰菊酯、氰戊菊酯及溴氰菊酯农药对照品 适量，用石油醚(60~90?)分别制成每1ml约含20~25ug的溶液，即得。 混合对照品储备液的制备 精密量取上述各 对照品储备液1ml，置10ml量瓶中， 用石油醚(60~90?)稀释至刻度，摇匀，即得。 混合对照品溶液的制备 精密量取上述混合对照品贮备液，用石油醚(60~90?)稀释制成每1L分别含0ug、4ug、8ug、40ug、200ug的溶液，即得。 供试品溶液的制备 药材和饮片 取供试品于60?干燥4小时，粉碎成细粉(过五号筛)，取约1~2g,精密称定，置100ml具塞锥形瓶中，加石油醚(60~90?)-丙酮( 4:1)混合溶液30ml，超声处理15分钟，滤过，药渣再重复上述操作2次后，合并 滤液。滤液加入适量无水硫酸钠脱水后，于40~45?减压浓缩至近干，用少量石油醚(60~90?)反复操作至丙酮除净，残渣加适量石油醚(60~90?)溶解，置 混合小柱,从下至上依次为无水硫酸钠2g、弗罗里硅土4g、微晶纤维素1g、氧 化铝1g、无水硫酸钠2g、用石油醚(60~90?)-乙醚(4:1)混合溶液20ml预洗,上，用石油醚(60~90?)-乙醚(4:1)混合溶液90ml洗脱，收集洗脱液，于40~45 ?减压浓缩至近干，再用石油醚(60~90?)3~4ml重复 操作至乙醚除净，用石油醚(60~90?)溶解转移至5ml量瓶中，并稀释至刻度，即得。 测定法 分别精密吸取供试品溶液和与之相对应浓度的混合对照品溶液各1ul，分别连续进样3次，取3次平均值，按外标法计算供试品中3种拟除虫菊酯农药残留量。