HPLC法测定蒙成药布仁他拉哈胡椒碱的含量

HPLC法测定蒙成药布仁他拉哈胡椒碱的含量 HPLC法测定蒙成药布仁他拉哈胡椒碱的 含量 中国药事2011年第25卷第3期287 HPLC法测定蒙成药布仁他拉哈胡椒碱的含量 吴学军,孟和(内蒙古通辽市传染病医院,通辽028000;内蒙古通辽市药品检验所) 摘要:目的建立蒙成药布仁他拉哈含量测定方法.方法采用HPLC法测定胡椒碱的 含量,色谱柱为 DiamonsilC18柱,流动相为甲醇一水(75:25),检测波长为343nm.结果胡椒碱在 0.03206~0.3206~g 范围内呈良好的线性关系(r—O.9999),平均加样回收率为97.72,RSD为1.089/6.结 论该方法具有 简便,快速,准确等特点,可用于本品的质量控制. 关键词:HPLC;布仁他拉哈;胡椒碱;含量 中图分类号:R291.208;R927.2文献标识码:A文章编号:1002—7777(2011)03—0287 —02 DeterminationofPeperineinBurentalahabyHPLC WuXu~unandMengHe(HospitalforInfectiousDiseasesofTongliaoCity,InnerMongoliaAutonomousRegion, Tongliao028000;InstituteforDrugcontrolofTongliaoCity,InnerMongoliaAutonomousRegion) ABSr】 CT:obiectiveAHPLCmethodwasestablishedfordeterminationofpeperineinBurentalaha, preparedMongoliatraditionalmedicine.MethodsADiamonsilC18columnwasused.Themobilephase wasmethanol— water(75:25).Thedetectionwavelengthwas343nm.ResultsThelinearrangewaswithin 0.03206~0.3206~g,r=O.9999.Theaveragerecoveryratewas97.72andRSDwas1.089/6.C onclusion ThemethodiSsimple.rapidandaccurate.ItcanbeusedforthequalityeontrolofBurentalaha. KEYWORDS:HPIC;Burentalaha;piperine;determination 布仁他拉哈是由土木香,红花,栀子,荜茇, 木香,北寒水石和石榴七味药组成的复方制剂.功 能主治为祛"宝日"病,主治"宝日"病引起的嗳 气吐酸,胃痛及背作痛.本文采用高效液相色谱法 对方中荜茇的主要成分胡椒碱Ll]进行检测,经过 方法学考察,本法简便,快速,准确,可用于本品 的质量控制. 1仪器与试药 LC-10A高效液相色谱仪(日本岛津公司), SP【)-M1OAVP型检测器,CLASS-VP色谱工作 站.TP-300超声波清洗机.胡椒碱对照品(批号: 0775—200203,供含量测定用,中国药品生物制品 检定所).布仁他拉哈(内蒙古通辽市蒙医研究所, 批号:20080317,20090611,20090612).甲醇为 色谱纯,水为高纯水,其它试剂为纯. 2方法与结果 2.1色谱条件 色谱柱:DiamonsilC18(4.6mm×250mm, 5/~m),流动相:甲醇一水(75:25),流速: 1.0mL?min-,柱温:30?,检测波长:343nm, 进样量:10肚L.理论板数:按胡椒碱峰计算应不 低于5000.分离度:4.6. 2.2对照品溶液的制备 精密称取胡椒碱对照品适量,置100mL棕色 量瓶中,加无水乙醇溶解并稀释至刻度,摇匀,制 成0.1781mg?mL的对照品贮备液.精密量取 3mL置50mL棕色量瓶中,加无水乙醇溶解并稀释 至刻度,摇匀,即得. 2.3供试品溶液的制备 取本品约0.5g,精密称定,置100mL棕色量 瓶中,加无水乙醇约70mL,超声处理(功率: 120W,频率:40kHz)30min,放冷,加无水乙醇 至刻度,摇匀,滤过,取续滤液,即得. 2.4阴性对照溶液的制备 作者简介:吴学军,本科;研究方向:民族药品及中药制剂;Tel: 288中国药事201i年第25卷第3期 按处方比例并以相同工艺制备缺荜茇的阴性对照 样品,按供试品溶液制备方法制成阴性对照溶液. 2.5阴性对照试验 精密吸取对照品溶液,供试品溶液,阴性对照 溶液各10tzL,分别注入液相色谱仪中,结果:阴 性对照溶液色谱中在与胡椒碱对照品以及供试品色 谱图相对应的保留时间处无色谱峰出现.见图1. 02468'O12,41618tlmin mlfl U4luig.141blmlr a.对照品;b.供试品;C.阴性对照;1.胡椒碱. 图1布仁他拉哈HPLC色谱图 2.6线性关系考察 分别精密吸取对照品溶液(10.686tLg?mI2) 3,5,10,20,30tzI注入液相色谱仪,记录峰面 积,以对照品的进样量(g)为横坐标,以峰面 积为纵坐标,绘制曲线,其回归方程: A一1.2×10一X一9.5219×10r一0.9999 结果表明,胡椒碱进样量在0.03206,0.3206yg 范围内与峰面积呈良好线性关系. 2.7稳定性试验 精密吸取同一批号(20080317)供试品溶液, 分别于配制后0,3,6,9,12,15h进样测定,结 果6次进样胡椒碱峰面积基本稳定不变,RSD为 0.17.表明供试品溶液存15h内基本稳定. 2.8精密度试验 精密吸取同一批号(20090611)供试品溶液, 连续进样6次,测定胡椒碱峰面积,平均峰面积为 996826,RSD为0.8. 2.9重复性试验 取同批号(20090611)的供试品6份,按 "2.3"项下方法制成供试品溶液,测定含量,平均 含量为2.723mg-g,RSD为1.5,表明本试 验重复性良好. 2.10加样回收率试验 精密称取已知含量的同一批号(批号: 20090611,含量:2.723mg?g)样品6份,每份 0.2g,分别精密加入胡椒碱对照品溶液 (O.1781mg?mI.)各3mL,按含量测定方法操作 制备供试品溶液,并按上述色谱条件测定,计算回 收率.结果见表l. 2.11样品的含量测定 精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10ttL, 注入液相色谱仪,测定,结果见表2. 表2胡椒碱含量测定结果mg?g 3讨论 3.1测定波长的选择 取胡椒碱对照品溶液,照分光光度法(《中国 药典》2010年版一部附录V),在200700nm范 围内绘制紫外吸收光谱,胡椒碱在波长343nm处 有最大吸收,结合药典方法选择343nm作为检测 波长. 3.2提取方法的确定 分别超声2O,30,40rain.结果表明,超声提 取20rain时的含量比30,40rain时略低,证明此 时胡椒碱未完全提尽,30,40rain时含量相近,即 30rain胡椒碱提取完全.故选定超声30min制备供 试品溶液. 用HPIC法测定布仁他拉哈中胡椒碱的含量, 经方法学研究表明,此方法具有样品预处理简单, 回收率符合要求,重复性好,专属性强等优点,作 为布仁他拉哈质量标准检测方法,能够更有效地控 制该制剂的质量. 参考文献: [1]中国药典Es3.一部,2010:219—219. [21常新全,丁丽霞.中药活性成分分析手册[M].北京:学 苑出版社,2002:1647—1651. [31赵国平.戴慎,陈仁寿.中药大辞典[M].上海:上海科 学技术出版社,2006:21202122. [4]肖培根.新编中药志[M].北京:化学工业出版社,2007:841841. [53沙世炎,徐礼粲,严敏如,等.中草药有效成分分析法 [M].上册.北京:人民卫生出版社,1985:174—176. [61中国药科大学主编.中药辞海[M].第二卷.北京:中国 医药科技出版社1996:12291231. 一, 吾 一