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医学免疫学CDC实验

2019-07-20 13页 ppt 4MB 66阅读

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医学免疫学CDC实验CDC(complementdependentcytotoxicitytest)补体依赖的细胞毒性试验实验原理细胞表面抗原与相应的抗体(IgG1~3或IgM)特异性结合形成的免疫复合物,可通过经典途径激活补体形成攻膜复合体而导致细胞膜穿孔。因此,水溶性染料如台盼蓝可进入受损细胞,染成蓝色,为阳性反应;不带抗原的细胞,未损伤,不染色,为阴性反应。方法胸腺细胞(LC)悬液制备小组操作个人滴片胸腺细胞(LC)悬液制备胸腺细胞悬液制备颈椎脱臼法处死小鼠暴露胸腔,分离出胸腺镊子夹住胸腺反复轻轻研磨单个细胞PBS洗2次,1000rp...
医学免疫学CDC实验
CDC(complementdependentcytotoxicitytest)补体依赖的细胞毒性试验实验原理细胞表面抗原与相应的抗体(IgG1~3或IgM)特异性结合形成的免疫复合物,可通过经典途径激活补体形成攻膜复合体而导致细胞膜穿孔。因此,水溶性染料如台盼蓝可进入受损细胞,染成蓝色,为阳性反应;不带抗原的细胞,未损伤,不染色,为阴性反应。方法胸腺细胞(LC)悬液制备小组操作个人滴片胸腺细胞(LC)悬液制备胸腺细胞悬液制备颈椎脱臼法处死小鼠暴露胸腔,分离出胸腺镊子夹住胸腺反复轻轻研磨单个细胞PBS洗2次,1000rpm,10min加入5%小牛血清PBS制备细胞悬液调节细胞浓度至3-4×107/ml消毒其胸腹部皮肤弃上清计数并检测细胞存活率CDC实验操作步骤Ab:ALS每组加台盼蓝50μl,分别用不同吸嘴先混匀后取40μl于高倍镜下观察。 第一组 第二组 第三组 第四组 试剂 LC+ALS+C LC+ALS LC+C LC LC(μl) 50 50 50 50 ALS(μl) 50 50 PBS(μl) 50 50 37℃孵育30min C(μl) 100 100 PBS(μl) 100 100 37℃孵育30min第一节免疫预防概念:1.人工主动免疫(artificialactiveimmunization):用疫苗接种机体,使之产生特异性免疫,从而预防感染的措施。2.人工被动免疫(artificialpassiveimmunization):给人体注射含特异性抗体的免疫血清或细胞因子等制剂,以治疗或紧急预防感染的措施。免疫预防AgAb人工自动免疫人工被动免疫第二节免疫治疗 免疫增强剂:IL-2,IFN-γ,中药 免疫抑制剂:糖皮质激素,中药骨髓干细胞治疗,单克隆抗体导向药物,基因治疗,LAK,TILCDC实验结果
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