往年实验报告参考药物对离体回肠作用及抗惊厥作用2B-陈云琳-19

药物对抗电刺激引起小白鼠惊厥作用 陈云琳 吴昊 陈潘迪 （浙江大学医学院临床医学08级2B班07组 3080103550@st.zju.edu.cn） [摘 要] 目的：观察苯巴比妥钠（phenobarbital sodium）预防性对抗由电刺激引起小白鼠的惊厥作用。方法：挑选出现电惊厥的小白鼠，随机分成两组，分别腹腔注射(i.p.)苯巴比妥钠和生理盐水，15min后以相同电参数刺激，观察小鼠反应。结果：在相同刺激参数下，苯巴比妥钠组大部分小鼠未出现惊厥，生理盐水组仍出现惊厥。结论：苯巴比妥钠具有对抗电刺激引起的惊厥作用。 [关键词] 苯巴比妥钠 生理盐水 电刺激 惊厥 1.材料和方法 1.1 实验动物 小白鼠4只 1.2 仪器 电惊厥仪，鳄鱼夹，1ml注射器，电子秤 1.3 药品和试剂 5g/L phenobarbital sodium溶液，生理盐水 1.4 实验方法 1.4.1 筛选 取小白鼠4只，先将电惊厥仪输出线的鳄鱼夹尖端用生理盐水浸湿，两个夹子中的一个夹于小鼠的两耳根间的皮肤，另一个夹下颌。开启电刺激器电源开关，输出电压调至20V，刺激时间设为0.5s，刺激周期设为单刺激，通电时观察小白鼠是否发生惊厥（小白鼠的惊厥发生过程：僵直屈曲期－后肢伸直期－阵挛期－恢复期。以后腿强直作为惊厥的指标）。如不发生惊厥，将输出电压增大，直到出现惊厥。 1.4.2 分组并注射相应溶液 用上述方法挑选2只出现电惊厥反应的小白鼠，称体重后用苦味酸分别做记号编为甲（标记上肢）、乙（标记下肢）。甲组小鼠腹腔注射5g/L phenobarbital sodium 0.1ml/10g（体重230g，注射苯巴比妥钠0.23ml）,乙组小鼠腹腔注射生理盐水溶液0.1ml/10g（体重240g，注射生理盐水龙溶液0.24ml）。 1.4.3 实验处理 给药15min后，以给药前同样的电参数刺激各小白鼠，观察小鼠的反应。 1.5 数据记录 记录各筛选中出现电惊厥反应小鼠的体重、筛选电压、腹腔注射剂型以及给药后是否出现电惊厥反应（“＋”示发生惊厥，“—”表示未发生惊厥）。 1.6 统计处理 用Microsoft Excel 软件处理，两组间比较采用χ2检验，p<0.05认为有显著性差异。 2.实验结果 2.1 甲组小鼠体重230g，筛选电压20V，腹腔注射苯巴比妥钠； 2.2 苯巴比妥钠组和生理盐水组的原始数据表格见下表： 表1电惊厥实验10个实验小组的结果汇总表 生理盐水组 苯巴比妥钠组 实验小组 惊厥 未惊厥 惊厥 未惊厥 1 1 0 0 1 2 1 0 0 2 3 1 1 0 2 4 1 0 0 2 5 1 0 0 1 6 1 1 0 2 7 0 1 0 1 8 2 0 0 2 9 0 1 0 2 10 2 0 0 2 2.3 最终统计结果见下表： 表2：苯巴比妥钠对电刺激引起小鼠惊厥作用的影响 组别 惊厥动物数 未惊厥动物数 生理盐水组 10 4 苯巴比妥钠组 0 17 注：甲乙两组间比较采用卡方检验，P<0.01，差异显著 2.3 结果叙述 本实验中，生理盐水组的14只小鼠有10只在相同电参数刺激下发生惊厥，发生惊厥率为71.43%；苯巴比妥钠组的小鼠在相同参数电刺激下均未发生惊厥，发生惊厥率为0.00%。 通过以上数据的比较，注射生理盐水的小鼠，电刺激后仍有惊厥效应发生，而注射苯巴比妥钠的小鼠，电刺激后无惊厥效应发生，实验表明苯巴比妥钠能提高电刺激阈值，具有良好的对抗电刺激引起的惊厥作用。 3.讨论 3.1苯巴比妥抗电刺激引起小白鼠惊厥作用的机制 苯巴比妥（barbital）类药物抑制中枢神经系统，随着剂量的由小到大，中枢抑制作用的程度由浅入深。当剂量大于催眠剂量时有抗惊厥作用。体外电生理研究证明，苯巴比妥作用于突触后膜上的r-氨基丁酸（GABA）受体，增加氯离子的电导，使细胞超极化，治疗浓度的苯巴比妥可降低谷氨酸的兴奋作用，加强r-氨基丁酸的抑制作用，抑制中枢神经系统单突触和多突触传递；当作用于突触前膜时，阻断前膜对Ca2+的摄取，减少Ca2+依赖性的神经递质的释放，因此苯巴比妥能提高电刺激阈值，具有良好的对抗电刺激引起的惊厥作用,临床上常利用此类药物用于治疗癫痫大发作及癫痫的持续状态。 3.2实验的临床意义 本实验证明了苯巴比妥对抗电刺激引起惊厥的作用，能够为此药物在临床上的使用提供相关的理论依据，临床上常利用barbital类这一机制将其用于小儿高热、破伤风、子痫、脑炎等及中枢兴奋药中毒引起的惊厥。 此实验原理还可以作为筛选其它抗惊厥药物的方法之一。 3.3 试验中部分问题解释 在实验过程中，我们小组的实验结果是生理盐水组小鼠注射前有惊厥反应，注射后却未发生惊厥反应，这可能是由于在第一次电刺激之后，小鼠对电刺激的阈值有所提高，以至于在相同的电参数刺激下未发生惊厥。 参考文献 [1].Lu yuan（陆源）,Qia qiang（夏强）.生理科学实验教程.杭州:浙江大学出版社,2004 [2].Yang shi jie（杨世杰）.药理学.北京:人民卫生出版社,2005 [3].Chen ji qiang（陈季强）.基础医学教程各论（下册）.科学出版社，2004