卵泡大小和卵泡液内激素水平对卵母

卵泡大小和卵泡液内激素水平对卵母 ｄｏｉｌｌ０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００６—５５７１．２０１２．０２．０１０ 卵泡大小和卵泡液内激素水平对 卵母细胞成熟的影响 高磊，孙贤华，王丽亚，邹淑花 【摘要】目的研究取卵日卵泡大小及其卵泡液内卵泡刺激素（ＦＳＨ）、黄体生成素（ＬＨ）、睾酮（Ｔ）、硫酸脱氢表雄酮（ＤＨＥＡＳ）的水平与卵子成熟度的关系。方法选取３６例因不孕行卵胞浆内单精子注射技术（Ｉｎｔｒａｃｙｔｏｐｌａｓｍｉｃｓｐｅｒｍｉｎｊｅｃｔｉｏｎ，ＩＣＳＩ）治疗的患者，于取卵日穿刺卵泡，收集１９０个卵泡内的卵泡液并标记卵泡大小，卵泡大小按≤１．２ｃｍ、１．３～１．５ｃｍ、１．６～１．９ｃｍ、≥２．０ｃｍ分组，记录卵子成熟度（ＧＶ、ＭＩ、ＭⅡ、退化组），测定卵泡液内ＦＳＨ、ＬＨ、Ｔ、ＤＨＥＡＳ的浓度。结果卵泡液内ＦＳＨ、ＬＨ、Ｔ、ＤＨＥＡＳ的水平与卵泡直径无相关性；卵泡液内Ｔ的水平在卵泡直径１．３～１．５ｃｍ雷Ｉｆ低于≥２．０ｃｍ时（Ｐ＝Ｏ．０３７）；ＭⅡ期卵子的卵泡液内ＬＨ、Ｔ的水平高于ＭＩ期（Ｐ＜０．０５）；卵泡液内其他激素在不同成熟度卵母细胞之间差异无统计学意义；卵泡直径≤１．２ｅｍ与各组之间、１．３～１．５ｃｍ与１．６～１．９ｃｍ间成熟率都有显著差异（Ｐ＜Ｏ．０５）；各直径分组间卵子退化率差异无统计学意义。结论 取卵日卵泡直径≥１．６ｃｍ时成熟率高。取卵Ｅｌ卵泡液内 ＬＨ、Ｔ水平与卵子成熟度有关，ＦＳＨ、ＤＨＥＡＳ的水平与卵子成熟度无关。 【关键词】卵泡液；卵泡直径；甾体激素；卵母细胞成熟度 【中图分类号】Ｒ７１４．１３ 【文献标识码】Ａ ｏｎｏｏｃｙｔｅ ＴｈｅｉｎｆｌｕｅｎｃｅｏｆｈｏｒｍｏｎｅｌｅｖｅｌｓａｎｄｆｏｌｌｉｃｌｅｓｉｚｅＷｏｍｅｎ ａｎｄＣｈｉｌｄｒｅｎ ｍａｔｕｒａｔｉｏｎ ＧＡ０Ｌｅｉ，ＳＵＮＸｉａｎ—ｈｕａ，ＷＡＮＧＬｉ—ｙａ，ＺＯＵＳｈｕ—ｈｕａ．ＲｅｐｒｏｄｕｃｔｉｖｅＣｅｎｔｅｒｏｆＱｉｎｇｄａｏ Ｍｅｄｉｃａｌ ＨｅａｌｔｈｃａｒｅＣｅｎｔｅｒ，Ｑｉｎｇｄａｏ，Ｓｈａｎｄｏｎｇ２６６０１１，Ｃｈｉｎａ Ｆｏｌｌｉｃｕｌａｒｆｌｕｉｄｗａｓｏｂｔａｉｎｅｄｆｒｏｍ ［Ａｂｓｔｒａｃｔ］０ｂｊｅｃｔｉｖｅ １９０ｆｏｌｌｉｃｌｅｓｏｆ３６ Ｔｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｂｅｔｗｅｅｎｔｈｅｆｏｌｌｉｃｌｅｓｉｚｅ，ＦＳＨ，ＬＨ， Ｔ，ＤＨＥＡＳｉｎｆｏｌｌｉｃｕｌａｒｆｌｕｉｄａｎｄｏｏｃｙｔｅｍａｔｕｒａｔｉｏｎ．Ｍｅｔｈｏｄｓ ｗｏｍｅｎｕｎｄｅｒｇｏｉｎｇＩＣＳＩｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｗｅｒｅｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ ｏｎ ｏｖｕｍｐｉｃｋ－ｕｐｄａｙ．ＦＳＨ，ＬＨ，Ｔａｎｄ ｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ（ＣＬＩＡ）．Ａ１１ｔｈｅ ｒｅｃｏｒ— ＤＨＥＡＳｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ ｂｙｃｈｅｍｉｌｕｍｉｎｅｓｅｎｃｅ ｓａｍｐｌｅｓｗｅｒｅｇｒｏｕｐｅｄｂｙｔｈｅｆｏｌｌｉｃｌｅｓｉｚｅ（≤１．２ｃｍ，１．３－１．５ｃｍ，１．６—１．９ｃｍ，≥２．０ｃｍ），ａｎｄ ｏｒ ｄｅｄｏｏｅｙｔｅｍａｔｕｒａｔｉｏｎ（ＧＶ，ＭＩ，ＩⅥｌＩＦＳＨ，ＬＨ，Ｔ，ＤＨＥＡＳｗｅｒｅｉｎＭⅡｗｅｒｅｈｉｇｈｅｒｔｈａｎＭ ｎｏｔ ｄｅｇｅｎｅｒａｔｅｄｐｅｒｉｏｄ）．Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｔｈｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓｏｆ ｃｏｒｒｅｌａｔｅｄｗｉｔｈｆｏｌｌｉｃｌｅｓｉｚｅ．ＴｈｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓｏｆＬＨ，ＴＥＳＴＯ ｌｅｖｅｌｗｅｒｅｌｏｗｅｒｉｎｇｒｏｕｐ１．６—１．９ｃｍｔｈａｎ ｒａｔｅ Ｉ（Ｐ＜０．０５）．Ｔ ２．０ｃｍ．Ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓｗｅｒｅｏｂｓｅｒｖｅｄｉｎｍａｔｕｒａｔｉｏｎｏｔｈｅｒｇｒｏｕｐｓ，ａｌｓｏｂｅｔｗｅｅｎｇｒｏｕｐ１．３－１．５ｃｍａｎｄｇｒｏｕｐｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｗａｓｆｏｕｎｄｉｎｄｅｇｅｎｅｒａｔｅ ｓｉｏｎ ｒａｔｅ ｂｅｔｗｅｅｎ ｇｒｏｕｐ≥ ｇｒｏｕｐ≤１．２ｃｍａｎｄａｎｙ １．６－１．９ｅｍ（Ｐ＜０．０５）．Ｎｏｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ａｍｏｎｇｔｈｅｄｉｆｆｅｒｅｎｔｄｉａｍｅｔｅｒ ｏｏｃｙｔｅ ｇｒｏｕｐｓ（Ｐ＞Ｏ．０５）．Ｃｏｎｃｌｕ・ Ｗｈｅｎ ｆｏｌｌｉｃｌｅ ｓｉｚｅ≥１．６ｃｍ ｏｎ ＯＰＵｄａｙ，ｔｈｅｍａｔｕｒａｔｉｏｎｉｓｔｈｅｈｉｇｈｅｓｔ．ＬＨａｎｄＴ ｌｅｖｅｌｓｉｎｆｏｌｌｉｃｕｌａｒｆｌｕｉｄｅｆｆｅｃｔｏｏｃｙｔｅｍａｔｕｒａｔｉｏｎ．ＦＳＨａｎｄＤＨＥＡＳｌｅｖｅｌｓｉｎｆｏｌｌｉｃｕｌａｒｆｌｕｉｄｅｆｆｅｃｔ ｏｏｃｙｔｅｍａｔｕｒａｔｉｏｎ． ［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］Ｆｏｌｌｉｃｕｌａｒｆｌｕｉｄ；Ｆｏｌｌｉｃｌｅｓｉｚｅ；Ｓｔｅｒｏｉｄｈｏｒｍｏｎｅ；Ｏｏｃｙｔｅｍａｔｕｒａｔｉｏｎ 卵母细胞的成熟是一个复杂的过程，同时滋养细胞也为卵泡质成熟做准备，细胞质和细胞核的变化对受精和早期胚胎分化发育的影响至关重要ｎ１。卵母细胞的发育依赖于卵泡液中的各种激素和生长 【作者单位】 【作者简介】【通讯作者】 因子，以及这些物质在卵母细胞和颗粒细胞之间的相互影响［２］。为此对卵泡内微环境（即卵泡液）及其对卵子发育影响的研究成为近年来研究的热点。探讨卵泡液内各生长因子与激素水平的关系，对如何改善未成熟卵子体外培养（Ｉｎｖｉｔｒｏｍａｔｕｒａｔｉｏｎ，ＩＶＭ）体系，更好地完善ＩＶＭ实验室培养系统也是很有意义的。 随着辅助生殖技术的发展，在进行体外受精一胚胎移植（ＩＶＦ）治疗时，控制性超促排卵（Ｃｏｎｔｒｏｌｅｄ 青岛市妇女儿童医院生殖医学中心，山东青 岛２６６０１１ 高磊（１９７３一），本科，从事妇产科工作 邹淑花，Ｅ－ｍａｉｌ：ｚｚｓｓｈｈ８７５１６＠ｙａｈｏｏ．ｃｏｒｎ．ｃｎ 万方数据 ｏｖａｒｉａｎ ｈｙｐｅｒｓｔｉｍｕｌａｔｉｏｎ，ＣＯＨ）可以使患者在同一 周期产生多个成熟和不成熟卵，为研究发育程度不同的卵子提供了机会。由于卵子的成熟度直接关系到卵子的受精率、着床率及妊娠率，如何改善ＣＯＨ提高卵子质量，从而改善ＩＶＦ的受精率和临床妊娠率是生殖医学研究的最终目的。１资料与方法 １．１一般资料２０１１年３月至８月因输卵管因素或男方因素在青岛市妇女儿童医院生殖中心进行体外受精一胚胎移植治疗的患者３６例，收集卵泡１９０个，跟踪卵子质量１７９个。患者年龄２２～４０岁，平均年龄（３２．６７±４．０２）岁，至少３个月内无内分泌调控治疗，既往月经周期正常，双侧卵巢平均窦卵泡不少于８个。 参加实验的每位患者均签署知情同意书，此实验经过青岛市妇女儿童医院伦理管理委员会批准。 １．２方法 １．２．１ 周期控制患者均采用常规长方案促 排卵治疗，在黄体中期皮下注射促性腺激素释放激素激动剂（ＧｎＲＨ—ａ，达菲林，ＩＰＳＥＮ，０．１ｍｇ／支）０．１ｍｇ／ｄ降调节，Ｂ超监测卵泡发育，降调节ｌｏ～１４ｄ达降调节标准［３］（阴道Ｂ超监测卵泡直径≤５ｒａｍ，子宫内膜＜５ｍｍ，ＬＨ＜１０ｍＩＵ／ｍＬ，ＦＳＨ＜１０ｍＩＵ／ｍＬ，Ｅ２＜１１０ｐｍｏｌ／Ｌ）后，于月经第３天给予促卵泡生成素（ＦＳＨ，丽申宝，丽珠，７５ＩＵ／支），起始剂量为２００３００ＩＵ，平均为（２５０．０２±４．９２）ＩＵ，根据卵泡生长情况适时减少ＦＳＨ用量和增加尿促性腺激素（ＨＭＧ，乐宝德，丽珠，７５１Ｕ／支）用量，至少有３个卵泡直径≥１．８ｃｍ时考虑卵泡近成熟，肌注绒毛膜促性腺激素（ＨＣＧ，丽珠，５０００ｌＵ／支） １００００ＩＵ。 １．２．２取卵及卵泡液的收集注射ＨＣＧ后 ３６ｈ取卵，取卵之前测量卵泡平均直径，多平面测量至少２次取平均值；每位患者随机抽取≤１．２ｃｍ、１．３～１．５ｃｍ、１．６～１－９ｃｍ、≥２．０ｃｍ的卵泡各１～２个，彻底抽吸每个卵泡液，一对一收集卵泡液和卵子，记录卵子成熟度，血染的卵泡液被废弃。卵子成熟度分级标准［４］：ＧＶ（Ｇｅｒｍｉｎａｌｖｅｓｉｃｌｅ）期：卵胞浆内有生发泡，但第一极体未排出；Ｍ１（ＭｅｔａｐｈａｓｅＩ）期：卵胞浆内生发泡已消失，且第一极体未排出；ＭⅡ期：卵母细胞已排出完整的第一极体。退化卵母细胞：卵母细胞发生异常分裂或碎裂、胞浆溶解、颜色发暗、卵内充满空泡。 １．２．３ 卵泡液处理卵泡液收集后立即 ２０００ｒｐｍ、离心１０ｍｉｎ后取上清液，置一８０℃保存待检。电化学发光法测量卵泡刺激素（Ｆｏｌｌｉｃｌｅ－Ｓｔｉｍｕ—ｌａｔｉｎｇＨｏｒｍｏｎｅ，ＦＳＨ），黄体生成素（ＬｕｔｅｉｎｉｚｉｎｇＨｏｒｍｏｎｅ，ＬＨ），睾酮（Ｔｅｓｔｏｓｔｅｒｏｎｅ，Ｔ），硫酸脱氢 万方数据 表雄酮（Ｄｅｈｙｄｒｏｅｐｉａｎｄｒｏｓｔ盯ｏｎｅ，ＤＨＥＡＳ）浓度，每个卵泡的每种激素均测定２次取其均值。 １．２．４不符合超促排卵中取卵条件者（出现内源性ＬＨ峰或血清Ｅ：水平下降５０％等情况）放弃此周期。 １．３ 统计学方法采用ＳＰＳＳｌ７．０软件进行 统计学分析，统计方法采用Ｐｅａｒｓｏｎ相关分析，定量资料组间用ｔ检验，Ｌｅｖｅｎｅ’Ｓ方差齐性检验，率的组间比较用７２检验或Ｆｉｓｈｅｒ’ｓ精确概率法，以Ｐ＜０．０５为差异有显著意义。２结果 ２．１ 患者取卵日卵泡液内ＦＳＨ、ＬＨ、Ｔ、 ＤＨＥＡＳ的水平与卵泡直径的关系 由图１可知， 卵泡液内ＦＳＨ、ＬＨ、Ｔ、ＤＨＥＡＳ的水平与卵泡直径无相关性。 ２．２卵泡液内激素水平在不同卵泡直径组之间的比较卵泡大小按≤１．２ｃｍ、１．３～１．５ｃｍ、１．６～１．９ｃｍ、＞／２．０ｃｍ分组，比较不同直径组之间的激素差异。由表１可知，卵泡平均直径≥２．０ｃｍ组时Ｔ水平显著高于１．３～１．５ｃｍ组（Ｐ＝０．０３７），其他激素在不同直径问差异无统计学意义。 表１ 不同直径组间各激素的差异比较（互±ｓ） 注：１．３～１．５ｃｍ组卵泡液内Ｔ水平与≥２．０ｃｍ组比较，。Ｐ＜ ０．０５ ２．３卵泡液内激素水平在卵子不同成熟度间的比较由表２可知，ＭＩＩ期卵泡液内ＬＨ水平显著高于ＭＩ期（Ｐ＝０．０３２），ＭＩＩ期卵泡液Ｔ水平显著高于ＭＩ期（Ｐ—Ｏ．０２９），即卵细胞成熟时ＬＨ水平在（Ｏ．２５土０．０８）ＩＵ／Ｌ，Ｔ水平在（４２．６７士３．２６）ｎｍｏｌ／Ｌ；其他激素在不同成熟度之间差异无统计学意义。 ２．４卵泡成熟率、退化率与直径的关系 由表 ３可以看出卵泡直径在１．６～１．９ｃｍ时卵子成熟率最高；卵泡直径≥２．Ｏｃｍ时卵子成熟率显著高于直径≤１．２ｃｍ（Ｐ－－－－０．０００），１．６～１．９ｃｍ组卵子成熟率显著高于１．２ｃｍ组（Ｐ＝０．０００），１．３～１．５ｃｍ时卵子成熟率显著高于直径≤１．２ｃｍ时（Ｐ＝０．００６），１．６～１．９ｅｍ组卵子成熟率显著高于１．３～１．５ｃｍ 组（Ｐ＝０．０２７）。 ６４２Ｏ８６４ ・ － —邓：ｌｉｉ：ｌｉ． ・！ ．！Ｉ．：・・！・．・・・・・．ｓ！：！・ ◆．・．：ｌ ’ ●● ・ ● ・ ● ● ！◆・一 ●● ●● ・．：▲ｌｉ！：：：’’◆ ・・ｌ● ●・ ・ ・ ・．・。・・；ｉｉ：… ・ ２Ｏ０．ＯＯ Ｏ．５０ １．００ Ｉ．５０ ２．００ ２．５０ ３．００ ●．：・：：ｌＩｉｌｉｉ：’ ’ 卵泡平均直径（ｃｍ） Ａ 卵泡平均直径（锄） Ｂ ；ｌ ｌ ．ｉ ● ７ 言曹 一 ．●● 。・’・・ ’’ 毯 ｌ． ：．１：． ’◆７・ ● ・ ： ● ・ 答 盏蕾 ・・’・・ ’ １ 一 Ｏ．ＯＯ Ｏ．５０ ，—７惭ｌｌｉｌ・Ｉ： ． ：’・’，・・ ｌ・・・ ● ●●●●▲●● 一 龛 魍 ・。 ・ ’‘’’－■■●’ｌ’ １．５０ 碌 ２．５０ ３．ＯＯ １．ＯＯ２．００ 卵泡平均直径（ｃｍ） Ｃ 卵泡平均直径（ｃｍ） Ｄ 图１患者卵泡液激素与卵泡平均直径的关系 注：Ａ患者卵泡液内ＦＳＨ与卵泡直径的关系（ｒ—ｏ．１１２，Ｐ＝０．３２１）；Ｂ患者卵泡液内ＬＨ与卵泡直径的关系（ｒ＝一ｏ．０２３，Ｐ＝０．７１２）；Ｃ患者卵泡液内Ｔ与卵泡直径的关系（ｒ一０．１２６，Ｐ＝０．１８２）ＩＤ患者卵泡液内ＤＨＥＡＳ与卵泡直径的关系（ｒ－－－－－－－０．０９１，Ｐ＝０．４５０） 衰２不同成熟度间各激素的差异比较Ｃｒ士ｓ） 解卵巢生理和卵子发育及成熟有重要意义。卵泡液成分部分来源于颗粒细胞和卵泡膜细胞分泌的物质，部分来源于外周血［５］。卵泡内甾体激素由颗粒细胞、卵泡膜细胞产生，其分泌受垂体促性腺激素的调节卵泡液内微环境影响卵泡生长发育和卵子质量。 ３．１卵泡液内激素浓度与卵泡大小的关系卵泡液内激素浓度与卵泡大小之间关系的研究有不 注：ＭＩ期卵泡液内ＬＨ、Ｔ水平与ＭⅡ期比较，。Ｐ＜Ｏ．０５ 同的报道，Ｗｅｎ等［１３研究发现随着卵泡直径的增大，卵泡液内Ｔ的含量增加，但Ｔ的浓度与卵泡大小不相关。而有研究发现，Ｔ浓度与卵泡直径负相关［６］。本研究结果表明，卵泡液内Ｔ、ＦＳＨ、ＬＨ、ＤＨＥＡＳ浓度与卵泡平均直径不相关；卵泡液内Ｔ水平在卵泡直径≥２．０ｃｍ时显著高于卵泡直径１．３～１－５ｃｍ时（Ｐ＝０．０３７），但与卵泡直径≤１．２ｃｍ时并无显著差异。有研究表明，卵泡液内Ｅ：浓度随卵泡直径的增大而增加［７］，小卵泡对ＦＳＨ的敏感性主要来源于由ＬＨ刺激产生的内源性雄激素Ｅ８－９３。随着卵泡的增大（１．３～１．５ｃｍ），Ｅ：浓度增高，可以增加颗粒细胞上的ＦＳＨ和ＬＨ受体表达，从而增加卵 １．３～１．５ｃｍ和１．６～１．９ｃｍ组之间、１．６～１．９ｃｍ组与≥２．０ｃｍ组之间卵子成熟率差异无统计学意义。不同卵泡直径组之间卵子退化率差异无统计学意义。 表３不同直径组闻成熟率，退化率的比较（％） 注：卵泡直径≤１．２ｃｍ组与其余三组卵子成熟率比较，’Ｐ＜Ｏ．Ｏｌ； 卵泡直径１．３～１．５ｃｍ组与１．６～１．９ｃｒａ组卵子成熟率比 泡对ＦＳＨ和ＬＨ的反应性，使雄激素合成增加、更多的雄激素转化为雌激素，Ｔ水平降低。当卵母细胞卵泡直径继续增大时，卵泡ＦＳＨ、ＬＨ受体丰富，芳香化酶活性增强，使得睾酮浓度处于相对较高水平。 ３．２卵泡液内激素水平对卵母细胞成熟的影响 随着卵泡的发育，卵泡液内甾体激素分泌量增 较，。。Ｐ＜０．０５ ３讨论 卵子的分化发育过程离不开卵子生存的微环境卵泡液，了解卵泡液内的激素含量和蛋白组成对理 万方数据 多，卵泡液容积增大，卵泡直径也不断增大［１ ０。。 ＦＳＨ是卵泡发育过程中重要调节因子之一，它刺激卵泡的发育和未成熟卵的募集，在卵泡募集和闭锁的平衡调控中起重要作用［１¨。很多实验性和临床性的研究明确表明，卵泡发育过程离不开ＬＨ的刺激［１２｜，而且在卵泡发育过程中ＬＨ的浓度是有度的，要在一定的水平之内［１３。。超高浓度的ＬＨ会影响卵泡的发育和卵母细胞的成熟［１引，会使卵母细胞成熟率和受精率显著降低［１引。本研究中，未成熟和成熟卵母细胞的卵泡液内ＦＳＨ和ＤＨＥＡＳ水平无显著差异，ＭⅡ期卵泡液内Ｔ、ＬＨ水平显著比ＭＩ期高。ＬＨ在卵子成熟过程的最后阶段起重要作用［１｝１７］，它刺激Ｔ的生物合成过程需要ＦＳＨ的参与［１８１。一旦在卵母细胞发育的特定时期完成了对ＦＳＨ的反应，ＬＨ即开始发挥其在卵泡膜细胞和颗粒细胞的作用［１２。。ＭⅡ期较高水平的Ｔ有可能是因为成熟卵卵泡膜细胞ＬＨ受体表达丰富，合成雄激素的量较多而造成的。 有研究表明，增加卵泡液内雄激素的水平会增加血清ＬＨ水平，可能导致优势卵泡发育的阻滞，因而引起卵泡的闭锁和退化［１９。。本研究中退化组与成熟组之间卵泡液内ＦＳＨ、ＬＨ、Ｔ、ＤＨＥＡＳ水平均无显著差异，可能与退化组病例数较少有关。目前有关于卵泡大小与卵子成熟度关系的报道各不相同。本研究发现，按卵泡平均直径分组，大卵泡组卵母细胞成熟率明显高于小卵泡组，但是在卵泡直径在１．６～１．９ｃｍ（８４．６２％）与≥２．０ｃｒｎ（８０．６５％）之间成熟率没有差异，提示卵泡直径≥１．６ｃｍ时卵子大部分成熟。正常情况下，排卵前４～５天卵泡的生长速度为２ｍｍ／ｄｃｓ］，由于注射ＨＣＧ后４ｈ可一过性出现ＬＨ峰，故至取卵前卵泡会增长２－－－，４ｍｍ，因此在临床工作中，当大部分卵泡直径≥１．４ｃｍ时注射ＨＣＧ可获得较多数目的成熟卵子。通过卵泡直径大小推断卵子成熟情况，不失为一种简便有效的方法。本实验中卵泡平均直径≥２．０ｃｍ时的卵子退化率（８％）高于其他各组，但各直径分组之间的卵子退化率的差异无统计学意义，考虑可能与退化卵子数目较少有关。 卵母细胞分化发育的过程不仅与卵泡液内激素有关，还与各种因子以及这些物质受体的表达及其相互作用有关，为了更好地探讨影响卵母细胞分化发育的原因，还需进一步研究各种生长因子及其受体的表达。 参考文献 ［１］Ｗｅｎ Ｘ，ＬｉＤ，Ｔｏｚｅｒ ＡＪ，ｅｔａ１．Ｅｓｔｒａｄｉｏｌ，ｐｒｏｇｅｓｔｅｒｏｎｅ，ｔｅｓ— ｔｏｓｔｅｒｏｎｅ ｐｒｏｆｉｌｅｓｉｎｈｕｍａｎｆｏｌｌｉｃｕｌａｒｆｌｕｉｄａｎｄｃｕｌｔｕｒｅｄ ｇｒａｎｕ— ｌｏｓｅｃｅｌｌｓｆｒｏｍｌｕｔｅｉｎｉｚｅｄｐｒｅ－ｏｖｕｌａｔｏｒｙｆｏｌｌｉｃｌｅｓ［Ｊ］．Ｒｅｐｒｏｄ Ｂｉ— ｏｌＥｎｄｏｃｒｉｎｏｌ，２０１０，８：１１７ ［２］ＥｒｉｅｋｓｏｎＧＦ，ＳｈｉｍａｓａｋｉＳ．Ｔｈｅｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙｏｆｆｏｌｌｉｅｕｌｏｇｅｎｅｓｉｓｌ 万方数据 ｔｈｅｒｏｌｅｏｆｎｏｖｅｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒｓＥＪ］．Ｆｅｒｔｉｌ Ｓｔｅｒｉｌ，２００１，７６（５）： ９４３—９４９ ［３］陈子江，刘新民，李嫒，等．人类生殖与辅助生殖［Ｍ］．北京： 科学出版社，２００５ｚ３７４，３８９ ［４］ＰｅｔｅｒＲ。Ｂｒｉｎｓｄｅｎ．体外受精与辅助生殖［Ｍ］．北京：人民卫生 出版社２００９：２２７ ［５］Ｆａｈｉｍｉｎｉｙａ Ｓ，Ｒｅｙｎａｕｄ Ｋ．Ｌａｈａｓ Ｖ，ｅｔａ１．Ｓｔｅｒｏｉｄｈｏｒｍｏｎｅｓ ｃｏｎｔｅｎｔ ａｎｄｐｒｏｔｅｏｍｉｃａｎａｌｙｓｉｓｏｆｃａｎｉｎｅｆｏｌｌｉｃｕｌａｒｆｌｕｉｄｄｕｒｉｎｇ ｔｈｅｐｒｅｏｖｕｌａｔｏｒｙｐｅｒｉｏｄ［Ｊ＂］．Ｒｅｐｒｏｄ ＢｉｏｌＥｎｄｏｅｒｉｎｏｌ，２０１０，１ （８）：１３２ ［６］ＣｏｓｔａＬＯ，ＭｅｎｄｅｓＭｃ，Ｆｅｒｒｉａｎｉ ＲＡ，ｅｔａ１．Ｅｓｔｒａｄｉｏｌａｎｄ ｔｅｓ— ｔｏｓｔｅｒｏｎｅ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓｉｎｆｏｌｌｉｃｕｌａｒｆｌｕｉｄａｓ ｃｒｉｔｅｒｉａｔｏｄｉｓ— ｃｒｉｍｉｎａｔｅｂｅｔｗｅｅｎｍａｔｕｒｅａｎｄｉｍｍａｔｕｒｅｏｏｃｙｔｅｓ［Ｊ］．ＢｒａｚＪ ＭｅｄＢｉｏｌＲｅｓ，２００４，３７（１１）：１７４７—１７５５ ［７３ Ｕｅｈａｒａ Ｓ，ＮａｇａｎｕｍａＴ，ＴｓｕｉｋｉＡ，ｅｔａ１．Ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｂｅ— ｔｗｅｅｎｆｏｌｌｉｃｕｌａｒｆｌｕｉｄｓｔｅｒｏｉｄｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓａｎｄｉｎｖｉｔｒｏｆｅｒｔｉｌｉ—ｚａｔｉｏｎ．ＯｂｓｔｅｔＧｙｎｅｃｏｌ。１９８５，６６（１）：１９—２３ ［８３ＭａｃｉｅｌＧＡ，ＢａｒａｃａｔＥＣ，ＢｅｎｄａＪＡ，ｅｔａ１．Ｓｔｏｃｋｐｉｌｉｎｇｏｆ ｔｒａｎ— ｓｉｔｉｏｎａｌａｎｄｃｌａｓｓｉｃｐｒｉｍａｒｙｆｏｌｌｉｃｌｅｓｉｎｏｖａｒｉｅｓｏｆｗｏｍｅｎｗｉｔｈｐｏｌｙｃｙｓｔｉｃ ｏｖａｒｙ ｓｙｎｄｒｏｍｅ［Ｊ］．Ｊ ＣｌｉｎＥｎｄｏｃｒｉｎｏｌ Ｍｅｔａｂ，２００４。 ８９（１１）：５３２１－５３２７ Ｅ９－ｉ ＦｌｅｍｉｎｇＲ，ＤｅｓｈｐａｎｄｅＮ，Ｔｒａｙｎｏｒ Ｉ，ｅｔａ１．Ｄｙｎａｍｉｃｓｏｆ ＦＳＨ—ｉｎｄｕｃｅｄｆｏｌｌｉｃｕｌａｒｇｒｏｗｔｈｉｎｓｕｂｆｅｒｔｉｈｗｏｍｅｎ：ｒｅｌａｔｉｏｎ— ｓｈｉｐｗｉｔｈａｇｅ，ｉｎｓｕｌｉｎｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ，ｏｏｃｙｔｅｙｉｅｌｄａｎｄａｎｔｉ—Ｍｕｌｌｅ— ｒｉａｎ ｈｏｒｍｏｎｅ［Ｊ］．Ｈｕｍ Ｒｅｐｒｏｄ，２００６，２１（６）：１４３６—１４４１ ［１０］罗丽兰，黄荷凤，刘继红，等．不孕与不育［Ｍ］．２版．北京：人 民卫生出版社，２００９：７ ［１１］ＱｉａｏＪ，Ｆｅｎｇ ＨＬ．Ｅｘｔｒａ－ａｎｄｉｎｔｒａ—ｏｖａｒｉａｎｆａｃｔｏｒｓｉｎｐｏｌｙｅｙｓ－ ｔｉｃｏｖａｒｙ ｓｙｎｄｒｏｍｅ．．ｉｍｐａｃｔｏｎ ｏｏｃｙｔｅ ｍａｔｕｒａｔｉｏｎａｎｄｅｍｂｒｙｏｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌｃｏｍｐｅｔｅｎｃｅ［Ｊ］．Ｈｕｍ ＲｅｐｒｏｄＵｐｄａｔｅ，２０１１， １７（１）：１７－３３ ［１２］ＦｒａｎｃｏＪＧＪｒ，Ｂａｒｕｆｆｉ ＲＬ，Ｏｌｉｖｅｉｒａ ＪＢ，ｅｔａ１．Ｅｆｆｅｃｔｓｏｆ ｒｅ－ ｃｏｍｂｉｎａｎｔＬＨ ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔａｔｉｏｎ ｔｏ ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔＦＳＨｄｕｒｉｎｇ ｉｎｄｕｃｅｄｏｖａｒｉａｎｓｔｉｍｕｌａｔｉｏｎｉｎｔｈｅＧｎＲＨ—ａｇｏｎｉｓｔｐｒｏｔｏｃｏｌ：ａｍａｔｃｈｅｄｃａｓｅ－ｃｏｎｔｒｏｌｓｔｕｄｙ［Ｊ］．Ｒｅｐｒｏｄ ＢｉｏｌＥｎｄｏｃｒｉｎｏｌ， ２００９，７：５８ ［１３］ＢａｌａｓｃｈＪ，Ｆｄｂｒｅｇｕｅｓ Ｆ．ＬＨｉｎｔｈｅｆｏｌｌｉｃｕｌａｒｐｈａｓｅ：ｎｅｉｔｈｅｒ ｔｏｏ ｈｉｇｈ ｎｏｒｔＯＯ ｌＯＷ［Ｊ］．Ｒｅｐｒｏｄ Ｂｉｏｍｅｄ Ｏｎｌｉｎｅ，２００６，１２ （４）：４０６－４１５ ［１４］ Ｓｈｏｈａｍｚ．Ｔｈｅｃｌｉｎｉｃａｌｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｗｉｎｄｏｗｆｏｒｌｕｔｅｉｎｉｚｉｎｇ ｈｏｒｍｏｎｅｉｎｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄｏｖａｒｉａｎ ｓｔｉｍｕｌａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｆｅｒｔｉｌ Ｓｔｅｒｉｌ。 ２００２，７７（６）：１１７０・１１７７ ［１５］ＵｒｍａｎＢ，ＴｉｒａｓＢ，ＹａｋｉｎＫ．Ａｓｓｉｓｔｅｄｒｅｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｉｎｔｈｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｆｐｏｌｙｅｙｓｔｉｃｏｖａｒｉａｎ ｓｙｎｄｒｏｍｅ［Ｊ］．Ｒｅｐｒｏｄ Ｂｉｏｍｅｄ Ｏｎｌｉｎｅ。２００４，８（４）：４１９－４３０ ［１６］Ｈｉｌｌｉｅｒ ＳＧ．Ｇｏｎａｄｏｔｒｏｐｉｃｃｏｎｔｒｏｌｏｆｏｖａｒｉａｎｆｏｌｌｉｃｕｌａｒｇｒｏｗｔｈ ａｎｄｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ［－Ｊ＂］．ＭｏｌＣｅｌｌＥｎｄｏｃｒｉｎｏｌ，２００１，１７９（１－２）： ３９—４６ ［１７］ＺｅｌｅｚｎｉｋＡＪ．Ｆｏｌｌｉｃｌｅ ｓｅｌｅｃｔｉｏｎｉｎ ｐｒｉｍａｔｅｓ：”Ｍａｎｙ ａｒｅ ｃａｌｌｅｄ ｂｕｔｆｅｗ ａｒｅ ｃｈｏｓｅｎ”［Ｊ］．Ｂｉｏｌ Ｒｅｐｒｏｄ，２００１，６５（３）：６５５—６５９ ［１８］Ｃｅｄｒｉｎ Ｉ。ＤｕｒｎｅｒｉｎＫ，ＦｌｅｍｉｎｇＲ，ｅｔａ１．Ｅｆｆｅｃｔｓｏｆｒｅｃｏｍｂｉ— ｎａｎｔ ＬＨｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｎ ｆｏｌｌｉｃｕｌｏｇｅｎｅａｉｓａｎｄｒｅｓｐｏｎｓｉｖｅｎｅｓｓ ｔｏ ＦＳＨ ｓｔｉｍｕｌａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｈｕｍ Ｒｅｐｒｏｄ，２００８，２３（２）：４２１—４２６ ［１９３ ＢｉｌｌｉｇＨ，ＦｕｒｕｔａＩ．Ｈｓｕｅｈ ＡＪ．Ｅｓｔｒｏｇｅｎｓｉｎｈｉｂｉｔａｎｄａｎｄｒｏ． ｇｅｎｓ ｅｎｈａｎｃｅｏｖａｒｉａｎｇｒａｎｕｌｏｓａｃｅｌｌａｐｏｐｔｏｓｉｓ［Ｊ］．Ｅｎｄｏｃｒｉ— ｎｏｌｏｇｙ。１９９３，１３３（５）：２２０４—１２ （本文编辑：彭玲）