lipofectamine3000 说明方案

lipofectamine3000protocol中文版1.接种细胞至70-90%汇合度时转染使用Opti-MEM培养基稀释Lipofectamine?3000试剂（2管），充分混匀使用Opti-MEM培养基稀释DNA，制备DNA预混液，然后添加P3000?试剂，充分混匀。在每管已稀释的Lipofectamine?3000试剂中加入稀释的DNA（1:1比例）。室温孵育5分钟。加入DNA-脂质体复合物至细胞中。7.37°C孵育细胞2-4天。然后转染细胞。siRNA转染转染siRNA至细胞中时，遵循如上所述的DNA实验，但在稀释siRNA时不要加入P3000?试剂（第3步）。细胞培养容器96-well24-well6-well贴壁细胞1-4x1040.5-2x1050.25-1x106Opti-MEM培养基稀释Lipofectamine?3000试剂(2管)Opti-MEM培养基5yLx225yLx2125yLx2Lipofectamine?30000.15和0.3此0.75和1.5yL3.75和7.5yLOpti-MEM培养基稀释DNA，制备DNA预混液，然后添加P3000?试剂，充分混匀Opti-MEM培养基10yL50yL250yLDNA(0.5-5卩g/yL)0.2ygEg5聘P3000?试剂(2卩L/ygDNA)0.4yL2yL10yLLipofectamine?3000试剂中加入稀释的DNA（1:1比例）稀释的DNA5yL25yL125yL稀释的Lipofectamine?30005yL25yL125yL室温孵育5分钟加入DNA-脂质体复合物至细胞中96-well24-well6-wellDNA-脂质体复合物10yL50yL250UL37°C孵育细胞2-4天。然后分析转染细胞。表1：使用lipofectamine?3000转染DNA产品参考用量