高效液相色谱法测定1_2_丙二胺含量_王建华

　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　精　细　石　油　化　工1996年5月　　　　　　　　　　　　　　SPECIALITYCHEMICALS　　　　　　　　　　　　　　　　第3期高效液相色谱法测定1,2丙二胺含量王建华(岳阳石油化工总厂研究院,414014)建立了用苯甲酰氯衍生高效液相色谱法测定1,2丙二胺的方法。优化了衍生反应条件和色谱分离条件。衍生物用反相色谱分离,流动相组成为甲醇∶水=60∶40(V/V)。方法的相对标准偏差为0.12%,1,2丙二胺平均回收率为98.91%,标准曲线方程为y=0.1015x-0.0046,γ=0.9999。关键词:高效液相色谱法　柱前衍生　1,2丙二胺1　前　言丙二胺及多胺是具有两个以上氨基的脂肪族DD混剂和1,2二氯丙烷是环氧氯丙烷和化合物,此类化合物无紫外吸收,且碱性较强,检环氧丙烷生产过程中的副产物。为了充分利用这测困难,所以必须衍生后才能检测。对于多胺的衍些副产物,可以通过氯化、氨化、脱氯化氢及异构生一般有紫外衍生、荧光衍生和电化学衍生[2]。作化等反应变成有用的物质[1]。我们进行了1,2二为胺的紫外衍生试剂主要是苯甲酰氯。而荧光衍氯丙烷氨化合成1,2丙二胺及多丙烯多胺的研生和电化学衍生一般用于微量组分的检测。究。为了计算反应的转化率及选择性,则需要测定其主要组分的含量。　　收稿日期:19950823。参　考　文　献社,1990.341～343。　2　姚蒙正,程侣柏,王家儒.精细化工产品合成原理.北京:中　1　张铸勇.精细有机合成单元反应.上海:华东化工学院出版国石化出版社,1992.149PREPARATIONOFADIPICACIDFROMBIORGANICWASTEWATERTangLihua(LiaoyangPetrochemicalEngineeringCollege)AbstractTheprocessofpreparingadipicacidfromHPOCaPinBIorganicwastewaterasrawmaterialswasintroduced,andnitricacidasoxidantbyusingcobaltacetateascatalyst.Theoptimumconditionswereestablishedbasedonexperimentalresults.Theproductqualityaccordwithourenterprisestandardstandards.Keywords:BIwastewater;HPOCaP;adipicacid;decomposition;oxidation第3期　　　　　　　　　　　　王建华.高效液相色谱法测定1,2丙二胺含量　　　　　　　　　　　　　　53　　　至于高效液相色谱法(HPLC)测定1,2二范围内测定。为了增大进样量,我们选取了紫外吸氯丙烷氨化合成1,2丙二胺的文献资料未见报收相对小些的254nm作为检测波长。道。我们参照其它多胺衍生方法,建立了用苯甲酰3.1.3　色谱图氯衍生、紫外检测1,2丙二胺的方法。根据选择的流动相组成和检测波长,得到了2　实验部分如图1的色谱图。2.1　仪器和试剂2.1.1　仪　器Waters高效液相色谱仪,包括510泵,U6K进样器,991二极管阵列检测器,820色谱工作站。2.1.2　试　剂试验中所用试剂均为分析纯级。2.2　色谱条件柱:NovapakC183.9×150mm(4μ),流动相:甲醇∶水=60∶40(V/V),流速:0.5mL/min,柱温:40℃,检测波长:254nm,进样量:图1　样品的色谱图5μL,定量方法:峰面积外标法。色谱分析时间为即可其组分定性是2.3　样品衍生步骤12min。#采用已知标样的衍生物定性。1峰为游离3,取100μL样品放入50mL带磨口的三角烧NH3#峰为1,2丙二胺,4#峰为二丙烯三胺,其它峰瓶中,加入2.0mL四氢呋喃(THF),然后加入未知2.0mL苯甲酰氯衍生试剂(10%THF溶液),密。衍生反应条件的优化封振动1min,再加入1.0mL2M的NaOH溶3.2　丙二胺与苯甲酰氯的反应是在含水的碱性有液,在40℃下反应30min,冷却后加入3.0mL2机溶液中进行的同时也伴随发生苯甲酰氯的水M的NaOH溶液。把衍生反应液放入125mL分,解因此衍生试剂的用量值含水量反应液漏斗中,加入25mL乙醚和20mL10%NaCl。,、pH、、温度及时间都会影响衍生反应的进行及产物的稳水溶液进行萃取,静置分层后放出水层。乙醚层再定性,所以必须进行衍生反应条件的优化。用10%NaCl溶液洗涤两次,每次20mL,收集乙溶剂及含水量的选择醚层并在红外灯下烘至近干,用甲醇溶解残留物,3.2.1　本文探讨了乙腈四氢呋喃甲醇等溶剂对衍放入10mL容量瓶中,用甲醇稀释至刻度,混匀、、生反应的影响。发现选用乙腈、四氢呋喃等非质子后取5μL进行HPLC分析。溶剂能使反应顺利进行我们在试验中选用四氢3　结果与讨论。呋喃作溶剂其衍生步骤是在四氢呋喃水体系中3.1　色谱条件的确定。进行能使胺从水溶液中快速而直接的衍生而不3.1.1　流动相组成的确定。,需要预先样品处理[3]。流动相的pH值对衍生物保留值影响不大。体系中含水量较高时苯甲酰氯水解速度加我们选择甲醇水作为流动相,研究了流动相组成,快会造成衍生反应不完全因此控制反应体系中的改变对衍生物保留行为的影响。试验结果明,,,含水量在以下[4]是保证衍生反应完全的重流动相中甲醇的体积分数与样品组分的lnk成线35%要条件我们在试验中选择的含水量性关系。为兼顾分离度和分析时间,我们选择甲醇。20%。反应温度和反应时间的影响∶水配比为60∶40(V/V)。3.2.2　文献[5]指出在测定生物多胺时反应放置过3.1.2　检测波长的选择,,夜或适当加热在较短时间内均能反应完全固定利用991二极管阵列检测器能作三维图的功。其它条件改变反应温度然后测其衍生物的峰面能,我们对衍生物中几个组分峰进行了紫外光谱,,积其结果表明在试验温度范围内室温回流分析。得知1,2丙二胺及其它组分衍生物的最大,,(),组分衍生物的峰面积基本上不变我们选取吸收波长在235nm左右,且可以在220～260nm,40℃　54　　　　　　　　　　　　　　　　　　精　细　石　油　化　工　　　　　　　　　　　　　　　　　1996年的反应温度。分,这是因为样品本身为碱性溶液。当NaOH用当固定其它条件,仅改变体系的反应时间(0量超过0.5mmol时,衍生物的峰面积基本上不～90min)时,得到了如图2的结果。变。本方法选择2mmol的NaOH用量。图2　反应时间与组分衍生物峰面积关系图(图中编号同图1)图4　NaOH用量与组分衍生物峰面积关系图从图2可知,在反应时间超过10min后其衍　　　　　　　(图中编号同图1)生物的峰面积不变,所以我们在试验中选取反应3.3　定量分析时间为30min。3.3.1　工作曲线的建立3.2.3　衍生试剂用量的选择配制成浓度为10.00%的1,2丙二胺标准衍生试剂的用量决定于条件,即要反应完全,溶液,分别稀释至0.10%、1.00%、2.00%、又要避免衍生试剂的极大过量(因为它本身也具3.00%、4.00%、5.00%、6.00%,按2.3和2.2中有较高的紫外吸收)。试验了衍生试剂与胺浓度摩所述条件进行测定。试验可知在此浓度范围内,1,尔比之间的变化。取一混合标样,在其它条件不变2丙二胺的浓度与响应值峰面积呈良好的线性下,改变苯甲酰氯用量,结果如图3。关系。经回归得到1,2丙二胺的标准方程为:y=0.1015x-0.0046　　　γ=0.9999式中:y:1,2丙二胺衍生物峰面积,AU×min;x:1,2丙二胺的浓度,w%;γ:相关系数。3.3.2　精密度试验在线性范围内,我们对1,2丙二胺样品进行精密度试验,结果见表1所示。表1　精密度试验1,2丙二胺衍生物峰面积0.3601,0.3595,0.3603,图3　苯甲酰氯与胺摩尔比和组分衍生物峰面积之间关系图/AU×min0.3600,0.3591,0.3598,0.3595(图中编号同图1)平均值/AU×min0.3598从图3中可知,当衍生试剂与胺浓度的摩尔标准偏差/AU×min0.0004比超过10∶1时,衍生物的峰面积基本上恒定,所相对标准偏差/%0.12以我们选择20∶1摩尔比用量的衍生试剂。对于　　表1是采用编号为DAP0111#的样品,过量的衍生试剂,在反应完毕后,加入过量的按2.3和2.2所述条件平行测定7次,得到每次NaOH溶液使其水解变为苯甲酸钠盐而留在水层的峰面积,计算出平均峰面积为0.3598AU×中。min,标准偏差为0.0004AU×min,相对标准偏3.2.4　氢氧化钠用量的选择差为0.12%。本试验选用NaOH溶液作为碱性缓冲液。当3.3.3　回收率试验改变NaOH用量时(NaOH溶液总体积保持在样品中分别加入不同已知量的1,2丙二1.0mL),结果见图4。胺标样,然后按2.3和2.2中所述进行回收率测从图4中看出,当不加NaOH时能反应一部定,结果见表2所示。第3期　　　　　　　　　　　　王建华.高效液相色谱法测定1,2丙二胺含量　　　　　　　　　　　　　　55　表2　回收率试验98.91%,工作曲线方程为y=0.1015x-0.0046,No.123γ=0.9999。样品中原有1,2丙二胺含量/%2.092.092.09b.　优化了苯甲酰氯衍生化条件,确定了在加入1,2丙二胺的含量/%1.492.573.45100μL样品中先用2.0mLTHF溶解,再加入实测加入后样品中1,2丙二胺/%3.564.645.50回收1,2丙二胺的量/%1.472.553.412.0mL10%苯甲酰氯的THF溶液和1.0mL2回收率/%98.6699.2298.84MNaOH溶液,于40℃下反应30min,然后进行平均回收率/%98.91萃取。　　本方法的1,2丙二胺平均回收率为c.　对衍生物进行色谱分离。确定了流动相98.91%,说明本方法的准确度较好。组成为甲醇∶水=60∶40(V/V),流速0.5mL/3.4　实际样品测定min,检测波长为254nm。我们用本方法对大量1,2丙二胺合成样或d.　衍生反应后过量的苯甲酰氯试剂在加入蒸馏样进行了测定。每次测定同时采用标样和样过量的NaOH溶液中水解成苯甲酸钠盐而留在品一同进行处理。如果样品中1,2丙二胺含量过水相中,不干扰测定。高,则先用水稀释到方法的线性范围内后再处理。e.　对大量的实际样品进行了测定,为工艺部分样品的结果列于表3中。合成提供了可靠的分析数据。表3　样品的测定1,2丙二胺1,2丙二胺　　致谢:标样和样品由本院一所提供,李铭瑜同志参加了试验样品编号样品编号含量/%含量/%在此表示一并致谢。DAP0092#5.56T1#12.39DAP011#4.71T11#0.022参　考　文　献DAP20#2.80T6#20.86DAP31#3.31Y5#17.960171#4.74L045#95.32　1　刘厚全,晏懋隶.齐鲁石油化工,1994,22(4):327～3304　结　论　2　唐琴梅.色谱,1992,10(3):146～150　3　ClarkCR,WellsMM.JChromatogrSci,1978,16(8):332a.　本文建立了用衍生高效液相色谱法测定～3391,2丙二胺的方法。该方法的相对标准偏差为　4　崔同,傅承光.色谱,1995,13(2):117～1190.12%(n=7),1,2丙二胺的平均回收率为　5　王志,徐宏达,傅承光.色谱,1990,8(5):325～327DETERMINATIONOF1,2PROPANEDIAMINEBYHIGHPERFORMANCELIQUIDCHROMATOGRAPHY(HPLC)WangJianhua(ResearchInstituteofYueyangGeneralPetrochemicalworks)AbstractThemethodwasestablishedforthedeterminationof1,2propanediaminebyHPLCwithbenzoylchloridederivatization.Thederivatizatereactionconditionsandchromatographicconditionswereoptimized.ThederivativeswereseparatedonaNovapakC18columnwithmethanolwater(60∶40,V/V)asthemobilephaseanddetectedatUV254nm.Theaveragerecoveryandrelativestandarddeviationwere98.91%and0.12%,respectively.Theregressionequationforcalibrationcurvewasy=0.1015x-0.0046(γ=0.9999).Keywords:HPLC;precolumnderivatization;1,2propanediamine