蛋白酶酶切位点

蛋白酶酶切位点蛋白酶的分类及作用位点蛋白酶分类作用位点已知抑制物氨基肽酶金属蛋白酶带有自由氨基的L-氨基酸氨基末端；不分解由X-Pro、D或Q组成的肽键2'2‘双口比咤，1.1()-菲咯咻菠萝蛋白酶，基蛋白酶无特异性a2巨球蛋白，TPCK,TLCK,烷化竣肽酶A辛金属蛋白酶带有自由氨基酸的L-氨基酸竣基端；不能分解R、P或羟脯氨酸EDTA,EGTA竣肽酶B捽金属蛋白酶K-Lys,R-Arg竣基端EDTA,EGTA,碱性氨基酸竣肽酶Y,氨酸竣肽酶氨基酸竣基端PMSF组织蛋白酶C卜基蛋白酶氨基端双肽，可通过K,R或P氨基端作为第二或第三个氨基酸封闭醋酸碘，甲醛胰凝乳蛋白酶,氨酸蛋白酶在F-Phe,T-Thr或Y-Tyr之后抑肽酶,PMSF,TPCK,a-巨球蛋白胶原酶卜属蛋白酶在P-X-G-P肽链中X之后EDTA,EGTA,还原剂，但无血清存在dispase金属蛋白酶无特异性EDTA,EGTA,Hg2+,重金属内肽酶Arg-C丝氨酸蛋前在R-Arg之后a巨球蛋白，TLCK内肽酶Asp-N卜属蛋白酶在D-Asp和C-Cys半胱氨酸之前EDTA,a菲咯咻内肽酶Glu-C内肽酶Lys-C,氨酸蛋白酶在E-Glu/Gln或D-Asp之后a巨球蛋白，TLCK丝氨酸蛋白酶在K-Lys之后TLCK,抑肽酶，抑蛋白酶醛肽肠激酶丝氨酸蛋白酶在D-D-D-D-K-肽链中K之后Xa因子，氨酸蛋白酶在R-Arg之后PMSF,APMS,大豆胰蛋白酶抑制物尢花果蛋白酶k基蛋白酶无特异性TPCK,TLCK,a-巨球蛋白激肽释放酶丝氨酸蛋白酶在一些R-Arg之后抑肽酶，抑蛋白酶醛肽木瓜蛋白酶翁基蛋白酶长期孵育时具有广泛特异性arg、lys、gly、L-CitrullineTPCK,TLCK,抑蛋白酶醛肽a一巨球蛋白，烷化剂胃蛋白酶纤溶酶蚊蛋白酶广泛特异性phe、trp、tyr等疏水aa胃蛋白酶抑制素丝氨酸蛋白酶在K-Lys或R-Arg之后PMSF,TLCK,抑肽酶，a-巨球蛋白链霉蛋白酶混合型无特异性B.M.完整药片蛋白酶K卜氨酸蛋白酶广泛特异性PMSF,PefablocSc枯草杆菌蛋白酶匕氨酸蛋白酶无特异性PMSF,a巨球蛋白，苯甲眯热溶素捽金属蛋白酶在非极性残基之前EDTA凝血酶丝氨酸蛋白酶在K-Lys之后TLCK,PMSF,抑蛋白酶醛肽抑肽酶，a巨球蛋白，苯甲眯胰蛋白酶卜氨酸蛋白酶在K-Lys或R-Arg之后arg、lysTLCK,PMSF,抑蛋白酶醛肽抑肽酶，a巨球蛋白蛋白酶分类作用位点已知抑制物木瓜蛋白酶疏基蛋白酶具有广泛特异性TPCK,TLCK,抑蛋白酶醛肽“-巨球蛋白，烷化剂胃蛋白酶酸蛋白酶广泛特异性胃蛋白酶抑制素胰蛋白酶丝氨酸蛋白酶在K或R之后TLCK,PMSF,抑蛋白酶醛肽抑肽酶,a巨球蛋白人体20种氨基酸及其英文缩写名称三字符号单字符号丙氨酸AlaA精氨酸ArgR天冬氨酸AspD半胱氨酸CysC谷氨酰胺GlnQ谷氨酸Glu/GlnE组氨酸HisH异亮氨酸IleI甘氨酸GlyG天冬酰胺AsnN亮氨酸LeuL赖氨酸LysK甲硫氨酸MetM苯丙氨酸PheF脯氨酸ProP丝氨酸SerS苏氨酸ThrT色氨酸TrpW酪氨酸TyrY缴氨酸ValV【生化】特异性蛋白酶的酶切位点胰蛋白酶arg、lys,得到以arg、lys为C末端残基的肽段。胰凝乳蛋白酶phe、trp、tyr等疏水aa。胃蛋白酶phe、trp、tyr等疏水aa。木瓜蛋白酶arg、lys。葡萄球菌蛋白酶，磷酸缓冲液ph7.8时断裂glu、asp。碳酸氢钱缓冲液ph7.8或醋酸钱缓冲液ph4.0时断裂glu。梭菌蛋白酶arg,用于不溶性蛋白的长时间裂解。CNBr断裂Met。羟胺断裂asn-gly间的肽键。二硫键可以用疏基化合物还原法或者过甲酸氧化法断裂.。木瓜蛋白酶(Papain),又称木瓜酶，是一种蛋白水解酶。木瓜蛋白酶是番木瓜(Carieapapaya)中含有的一种低特异性蛋白水解酶，广泛地存在于番木瓜的根、茎、叶和果实内，其中在未成熟的乳汁中含量最丰富。木瓜蛋白酶的活性中心含半胱氨酸，属于萌基蛋白酶，它具有酶活高、热稳定性好、天然卫生安全等特点，因此在食品、医药、饲料、日化、皮革及纺织等行业得到广泛应用。木瓜蛋白酶是一种蛋白水解酶，分子量为23406,由一种单肽链组成，含有212个氨基酸残基。至少有三个氨基酸残基存在于酶的活性中心部位，他们分别是Cys25、His159和Asp158,另外六个半胱氨酸残基形成了三对二硫键，且都不在活性部位。纯木瓜蛋白酶制品可含有：(1)木瓜蛋白酶，分子量21000,约占可溶性蛋白质的10%;(2)木瓜凝乳蛋白酶，分子量26000,约占可溶性蛋白质的45%;(3)溶菌酶，分子量25000,约占可溶性蛋白质的20%;及纤维素酶等不同的酶。番木瓜未成熟果实中含有木瓜蛋白酶(Papain)、木瓜凝乳蛋白酶A(ChymopapainA)、木瓜凝乳蛋白酶B(ChymopapainB)、木瓜肽酶B(PapayaPeptidaseB)等多种蛋白水解酶。且已知四种半胱氨酸蛋白酶的一级结构具有高度的同源性。其中，木瓜蛋白酶属萌基蛋白酶，可水解蛋白质和多肽中精氨酸和赖氨酸的竣基端，并能优先水解那些在肽键的N-端具有二个竣基的氨基酸或芳香L-氨基酸的肽键。木瓜蛋白酶papain属疏基蛋白酶，具有较宽的底物特异性，作用于蛋白质中L-精氨酸、L-赖氨酸、甘氨酸和L-瓜氨酸残基竣基参与形成的肽键。此酶属内肽酶，能切开全蛋蛋白质分子内部肽链一CO-NH一生成分子量较小的多肽类。最适合pH值5.7（一般3〜9.5皆可），在中性或偏酸性时亦有作用，等电点1=8.75;最适合温度55〜60C（一般10〜85c皆可），耐热性强，在90C时也不会完全失活；受氧化剂抑制，还原性物质激活。胃蛋白酶为什么不水解自身百度文库胃蛋白酶是一种酸性蛋白酶。由胃部中的胃粘膜主细胞释放出没有活性的胃蛋白酶原。酶原在遇到由胃壁细胞所释放的胃酸中的盐酸后切去44个氨基酸残基将被激活，其最适pH值约为1.5〜2.2,在中性或碱性pH值的溶液中，胃蛋白酶会发生解链而丧失活性。胃蛋白酶在对蛋白质或多肽进行水解时，具有一定的氨基酸序列特异性，倾向于水解氨基端或竣基端为芳香族氨基酸（苯丙氨酸、色氨酸和酪氨酸）或亮氨酸的肽键。胰蛋白酶和糜蛋白酶：糜蛋白酶潜在切点太多了，你联合用的话会出好多峰，要控制好反应时间或者建议glu-C配合trypsin切E+K+R或glu-C+lysylendopeptidase切E+K都很特异，比较好的结果，顺便说一下trypsin太猛不要放太多。搭配糜蛋白酶反应要彻底点，主要的切点WYFT