铁皮石斛的国家标准是怎么诞生的(附2015版铁皮石斛标准)

铁皮石斛的国家标准是怎么诞生的（附2015版铁皮石斛标准）从《神农本草经》，一直到2005年版的《中华人民共和国药典》，在漫长的2000年时间里，铁皮石斛在主流本草经典中的地位，就一直归结在“石斛”条目下面。请看2005年版《中华人民共和国药典》中对“石斛”的法定解释：“石斛的药材来源主要为兰科石斛属的三个品种，分别为：金钗石斛——来源于植物石斛，鲜品应用时名鲜金钗石斛或鲜金钗：铁皮石斛——来源于植物铁皮石斛，又称霍山石斛，鲜品应用时名鲜铁皮石斛或鲜铁皮，产品称铁皮枫斗（耳环石斛）；马鞭石斛——来源于植物马鞭石斛（又称流苏石斛、马鞭草）。部分近似品种如美花石斛、束花石斛等亦可入药。长久以来，石斛药材尤以铁皮石斛与金钗石斛两种为最优。虽品种不一，但处方名称均统称为石斛。”“2000多年以来，铁皮石斛之所以没有在历代的药典中单独列项，是因为没有必要列项。”参与2010年版《中华人民共和国药典》“铁皮石斛”条目制定的杨兵勋博士这样说：“铁皮石斛尽管是滋阴生津中药成员里面的一极，但药源历来非常稀少。国家药典关注的是那种影响面很大的药材，铁皮石斛药材稀缺，影响有限，国家药典因此就没有必要出面进行规范。”在21世纪的头10年，铁皮石斛在生物医药、养生保健领域内可谓炙手可热。这期间，用其他劣质石斛冒充铁皮石斛的现象随之出现。这既阻碍了铁皮石斛产业的发展，又严重地侵害了消费者的利益。“这就到了国家药典不得不进行规范的时候了。”杨兵勋博士说：“第一，随着铁皮石斛产业越来越大，临床应用越来越多，国家药典有必要对它进行规范；第二，在中药材里面，石斛类药材的来源是所有中药品种里面特别复杂的，到底什么是铁皮石斛？2005年版《中华人民共和国药典》对铁皮石斛的鉴定仅限于外观、形状等，用这些简单的方法已经无法解决市场上出现的各种问题；第三，广大消费者急需得到保护。没有国家权威的标准，各级行政部门很难对市场进行监控，消费者购买铁皮石斛制品，权益无法得到保护。”2005年版《中华人民共和国药典》颁布后不久，由于深感改革开放以后，全国的药品市场发展了急剧的变化，国家药典委员会即着手新一版药典的增订工作。铁皮石斛条目的制定，自然落到了浙江省食品药品检验所的肩上。期后整整花了六年时间才撰写完成。为什么花了6年时间才制定出国家标准，它的难点在哪里？根据国家药典委员会的要求，制定铁皮石斛国家标准的时间从2004年正式开始。自古至今，石斛属植物即为石斛药材应用的正品。历代主流本草经典中所涉及的石斛药材不仅仅来源于一种植物，而是涉及石斛属的70多种植物。而且还涉及兰科石斛属以外的一些属植物，如金石斛属、石仙桃属、石豆兰属及其他一些属近20种植物，石斛类药材是目前《中华人民共和国药典》收载的中药材中特别复杂的一味药材。摆在研究者面前的难题有，找到我国境内的76种石斛属植物，通过对每一种石斛属植物的分析研究，最后找出属于铁皮石斛这一味药材的唯一特征，用专业的语言来讲就是找到铁皮石斛的指纹图谱，找出铁皮石斛的专属性，阐明铁皮石斛的“性状”、“鉴别”、“检查”、“浸出物”、“含量测定”、“性味与归经”、“功能与主治”、“用法与用量”、“贮藏”，让全国的从业者能够方便地使用这一标准。不用说对76种石斛属植物进行分析，要找到这76种石斛属植物，本身就是一件很难完成的工作。第二个难题，必须采集到全国各地生长的、不同年份、不同季节采收的铁皮石斛样本。浙江省食品药品检验所中药室主任祝明主任药师回忆，从2004年开始，研究人员着手收集不同产地、不同年份、不同采收季节的铁皮石斛样品，光是往乐清、云南等地就跑了15次，收集样品约50批、成百上千种；另外为了作比较，又同时收集了容易混淆的非铁皮石斛样品（包括紫皮、刚节、水草等）约50批。紫皮、刚节等样品来源有数种植物，品种混乱，并不是直接可以用，专家们又将收集的鲜品一部分干燥，一部分专门进行种植开花鉴定，确保样品来源的可靠。制定铁皮石斛国家标准最关键的是两个数据，一个是找到只有铁皮石斛有而其他石斛没有的数据，一个是不同地方、不同季节、不同年份的铁皮石斛，怎样才算是优质的数据。由于石斛属药材品种众多，这几年下来，研究人员的头发都白了不少。经过前后6年的艰苦努力，浙江省食品药品检验所的专家们终于确信，铁皮石斛中黄酮苷类化学成分具有一定专属性，铁皮石斛中多糖水解后甘露糖与葡萄糖峰面积比及水解后单糖含量有其特征性，不同于其他石斛。所以在2010年新版药典中，出现了铁皮石斛薄层色谱鉴别、甘露糖与葡萄糖峰面积比及杂质、水分、总灰分、浸出物等检查项目，并制定了多糖与甘露糖含量测定方法，制定出具有专属性的鉴别与质量可控的含量测定方法。另外，新的标准不仅能够检测铁皮石斛的真伪，还能进一步控制和鉴别铁皮石斛的质量好坏。专家们对不同产地、不同年份、不同采收季节铁皮石斛样品进行测定，最终确定了铁皮石斛的采收期为每年11月至翌年3月。祝明主任表示，铁皮石斛国家标准的建立，为铁皮石斛产业提供了产品的质量保证和检验标准，有利于保护消费者利益，促进产业健康发展，同时，新标准为铁皮石斛的种植、采收起到了指导作用，能够带动种植业的发展，对整个产业的规范化发展能起到积极作用，将推动整个铁皮石斛中药行业的健康有益发展。附：2015版中国药典铁皮石斛的收载内容铁皮石斛本品为兰科植物铁皮石斛（DendrobiumofficinaleKimuraetMigo）的干燥茎。11月至翌年3月采收，除去杂质，剪去部分须根，边加热边扭成螺旋形或弹簧状，烘干；或切成段，干燥或低温烘干，前者习称“铁皮枫斗”（耳环石斛）；后者习称“铁皮石斛”。【性状】铁皮枫斗本品呈螺旋形或弹簧状，通常为2?6个旋纹，莲拉直后长3.5?8cm，直径0.2?0.4cm。表面黄绿色或略带金黄色，有细纵皱纹，节明显，节上有时可见残留的灰白色叶鞘；一端可见茎基部留下的短须根。质坚实，易折断，断面平坦，灰白色至灰绿色，略角质状。气微，味淡，嚼之有黏性。铁皮石斛本品呈圆柱形的段，长短不等。【鉴别】（1）本品横切面：表皮细胞1列，扁平，外壁及侧壁稍增厚、微木化，外被黄色角质层，有的外层可见无色的薄壁细胞组成的叶鞘层。基本薄壁组织细胞多角形，大小相似，其间散在多数维管束，略排成5圈，维管率外韧型，外围排列有厚壁的纤维束，有的外侧小型薄壁细胞中含有硅度块。含草酸钙针晶束的黏液细胞多见于近表皮处。（2）取本品粉末lg，加三氯甲烷-甲醇（9:1）混合溶液15ml，超声处理20分钟，滤过，滤液作为供试品溶液。另取铁皮石斛对照药材lg，同法制成对照药材溶液，照薄层色谱法（通则0502）试验，吸取上述两种溶液各2?5μl，分别点于同硅胶G薄层板上，以甲苯-甲酸乙酯-甲酸（6:3:1）为展开剂，展开，取出，烘干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在95°C加热约3分钟，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。【检查】甘露糖与葡萄糖峰面积比取葡萄糖对照品适量，精密称定，加水制成每lml含50啤的溶液，作为对照品溶液。精密吸取0.4ml，按〔含量测定〕甘露糖项下方法依法测定。供试品色谱中，甘露糖与葡萄糖的峰面积比应为2.4?8.0。水分不得过12.0%（通则0832第二法）总灰分不得过6.0%（通则2302）。【浸出物】照醇溶性浸出物测定法（通则2201）项下的热浸法测定，用乙醇作溶剂，不得少于6.5%。【含量测定】多糖对照品溶液的制备取无水葡萄糖对照品适量，精密称定，加水制成每lml含90μg的溶液，即得。标准曲线的制备精密量取对照品溶液0.2ml、0.4ml、0.6ml、0.8ml、1.0ml，分别置10ml具塞试管中，各加水补至1.0ml，精密加入5%苯酚溶液lml（临用配制），摇匀，再精密加硫酸5ml，摇匀，置沸水浴中加热20分钟，取出，置冰浴中冷却5分钟，以相应试剂为空白，照紫外-可见分光光度法（通则0401），在488nm的波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。供试品溶液的制备取本品粉末（过三号筛）约0.3g，精密称定，加水200ml，加热回流2小时，放冷，转移至250ml量瓶中，用少量水分次洗涤容器，洗液并人同一量瓶中，加水至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液2ml，置15ml离心管中，精密加入无水乙醇10ml，摇匀，冷藏1小时，取出，离心（转速为每分钟4000转）20分钟，弃去上清液（必要时滤过），沉淀加80%乙醇洗涤2次，每次8ml，离心，弃去上清液，沉淀加热水溶解，转移至25ml量瓶中，放冷，加水至刻度，摇匀，即得。测定法精密量取供试品溶液1ml，置10ml具塞试管中，照标准曲线制备项下的方法，自“精密加入5%苯酚溶液lml”起，依法测定吸光度，从标准曲线上读出供试品溶液中无水葡萄糖的量，计算，即得。本品按干燥品计算，含铁皮石斛多糖以无水葡萄糖（C6H12O6）计，不得少于25.0%。甘露糖照高效液相色谱法（通则0512）测定。色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.02mol/L的乙酸铵溶液（20:80）为流动相；检测波长为250nm。理论板数按甘露糖峰计算应不低于4000。校正因子测定取盐酸氨基葡萄糖适量，精密称定，加水制成每lml含12mg的溶液，作为内标溶液。另取甘露糖对照品约10mg，精密称定，置100ml量瓶中，精密加人内标溶液lml，加水适量使溶解并稀释至刻度，摇匀，吸取400μl，加0.5mol/L的PMP（1-苯基-3-甲基-5-P比唑啉酮）甲醇溶液与0.3mol/L的氢氧化钠溶液各400μ1，混匀，70°C水浴反应100分钟。再加0.3mol/L的盐酸溶液500μl，混匀，用三氯甲烷洗涤3次，每次2ml，弃去三氯甲烷液，水层离心后，取上清液10μl，注人液相色谱仪，测定，计算校正因子。测定法取本品粉末（过三号筛）约0.12g，精密称定，置索氏提取器中，加80%乙醇适量，加热回流提取4小时，弃去乙醇液，药渣挥干乙醇，滤纸筒拆开置于烧杯中，加水100ml，再精密加人内标溶液2ml，煎煮小时并时时搅拌，放冷，加水补至约100ml，混匀，离心，吸取上清液1ml，置安瓿瓶或顶空瓶中，加3.0mol/L的盐酸溶液0.5m1，封口，混匀，110℃水解1小时，放冷，用3.0mol/L的氢氧化钠溶液调节pH值至中性，吸取400μl，照校正因子测定方法，自“加0.5mol/L的PMP甲醇溶液”起，依法操作，取上清液注入液相色谱仪，测定，即得。本品按干燥品计算，含甘露糖（C6H12O6）应为13.0%?38.0%。【性味与归经】甘，微寒。归胄、肾经。【功能与主治】益胃生津，滋阴清热。用于热病津伤，口干烦渴，胃阴不足，食少干呕，病后虚热不退，阴虚火旺，骨蒸劳热，目暗不明，筋骨痿软。【用法与用量】6?12g。【贮藏】置通风干燥处，防潮。再附：对比2010版药典，没有太大变化，主要变化是在“功能与主治”一块增加了“胃阴不足，病后虚热不退，阴虚火旺，骨蒸劳热，筋骨痿软。”“用法与用量”一块减少了“入复方宜先煎、单用可久煎。”