紫外分光光度法测定水果汁中果糖的含量

紫外分光光度法测定水果汁中果糖的含量 摘要：研究了紫外分光光度法测定果糖的方法果糖在盐酸的作用下生成羟甲基糖醛，其最大吸收波长在291nm．果糖浓度在0-30ug/ml范围内服从比尔定律。用 本法测定了苹果汁、鸭梨汁和桔子汁中的果糖台量 关键词：分光光度法；果糖；测定 1 实验部分 1.1试剂与仪器 1.1.1 果糖标准溶液 称取0．1000gD一果糖(生化试剂)溶于二次蒸馏水，并定容到1000ml，果糖浓度为0.1000mg／ml；浓盐酸(分析纯)；所有实验用水均为二次蒸馏水。 苹果，鸭梨，桔子单个果重约100～200g，均购于海南省五指山市农贸市场. 1.1.2仪器：TU-1201紫外可见分光光度计 1.2 实验方法 在具塞比色管中加入适量的0．1000mg/ml的果糖标准溶液，加入3ml浓盐酸，用二次水定容到l0ml.在沸水中加热8min，取出用流水冷却．用1 cm比色皿，以试剂空白为参比，于波长291nm处测定其吸光度A． 将待测果实沿脐到叶柄方向纵向切成几块，用榨汁器挤出果汁，过滤，取滤液1ml，定容到1000 ml，制成待测液．按上述方法测定待测液．由待测溶液的吸光度计算出果汁的果糖含量。 2 结果与讨论 2.1 吸收曲线 按实验方法用紫外分光光度计进行吸收光谱扫描，测出最大吸收波长在291nm(见图1)．当果糖浓度增大时最大吸收波长略有增加，本实验选定291nm为吸收波长。 2.2 盐酸的影响按实验方法对不同 体积的浓盐酸进行试验，结果明，不加浓盐酸时，吸光度A=0；当盐酸的加入量达3～4ml时，吸光度达到最大值；继续加入盐酸，吸光度降低(见图2)，盐酸的用量以3ml为宜。 2.3 温度及加热时间的影响 对不同反应温度进行试验，结果表明，在100℃的水浴中加热6min后，吸光度基本不变(见图3)为使反应充分，实验选定加热时问为8min。 2.4 放置时间对稳定性的影响 用紫外分光光度计进行60min的时间扫描，结果发现吸光度在40min内有0.003的波动，40～60min内吸光度逐渐增加0.004(见图4)．实验选在40min内完成测定。 2.5工作曲线的绘制 吸取0.1000mg/ml的果糖标准溶液0.0，0.5，1.0，1.5，2.0，2.5，3.0ml，按实验方法测定吸光度，绘制工作曲线(见图5)，可知呆糖含量在0.30ug／ml范围内服从比尔定律．其线性方程为：A=0.0306c+0.0151，相关系数r2=0.9983．对20ug／ml果糖进行11次测定，其相对标准偏差为2 6％． 2.6 干扰物质实验 按照复验方法进行了干扰试验，结果表明：抗坏血酸、可溶淀粉无干扰．葡萄糖浓度大于果糖浓度的5倍时，葡萄糖对果糖产生干扰(以误差小于5％计)．蔗糖对本方法有较大干扰由于蔗糖在盐酸中水解产生果糖和葡萄糖，在测定实际 样品时，果糖测定值中含有蔗糖水解产生的果糖的量． 3 样品分析 在上述实验条件下，对苹果汁、鸭梨汁和桔子汁待测液中的果糖含量进行检测，并进行加标试验，各种果汁中的果糖含量的检测结果列于表1，所测得的果糖含量为总果糖量(包括蔗糖在盐酸中水解产生果糖)．从实验结果可见该方法具有很好的选择性和高的灵敏度，适用于组成较复杂的分析对象中的果糖含量测定。 参考，