硫酸根离子标准曲线制作方法硫酸根离子标准曲线制作方法
有关硫酸根离子测定的具体步骤,包括试剂配制、标准曲线的制定步骤如下:
稳定液的配制75g分析纯NaCl,溶于300ml水中,加入30ml分析纯浓HCl,50ml甘油和100ml 95%乙醇,混匀。
o硫酸根标准储备液配制:准备称取1.814g无水硫酸钾(KSO分析纯,事先在105C下24
干燥两小时),溶于少量纯水后,移入1000ml容量瓶中,用纯水定容至刻度。此溶液1.00ml
2-含1.00mg硫酸盐(SO)。 4
硫酸根标准溶液配制:准确吸取上述储备液10.00ml于100ml容量瓶中,...
硫酸根离子标准曲线制作方法
有关硫酸根离子测定的具体步骤,包括试剂配制、标准曲线的制定步骤如下:
稳定液的配制75g分析纯NaCl,溶于300ml水中,加入30ml分析纯浓HCl,50ml甘油和100ml 95%乙醇,混匀。
o硫酸根标准储备液配制:准备称取1.814g无水硫酸钾(KSO分析纯,事先在105C下24
干燥两小时),溶于少量纯水后,移入1000ml容量瓶中,用纯水定容至刻度。此溶液1.00ml
2-含1.00mg硫酸盐(SO)。 4
硫酸根标准溶液配制:准确吸取上述储备液10.00ml于100ml容量瓶中,用纯水稀释至
2-刻度。此溶液1.00ml含100ug硫酸盐(SO)。 4
标准曲线绘制方法:称取0.1g BaCl晶体若干份备用,向一系列50ml烧杯中准确加入2
硫酸根标准使用液,0.00,0.30,0.50,1.00,1.25,1.50,2.00和2.50ml,加蒸馏水至最终体积为5.00ml,然后分别加入稳定剂1ml,将配置成标准系列的50ml烧杯逐个放在磁力搅拌器上,于搅拌中迅速加入0.1g BaCl晶体,计时搅拌1 min,静置15 min后,用2 cm2
比色皿,在波长420 nm处,蒸馏水做对照,测得数据如下表:
表3.2 硫酸根标准浓度和相应的吸光度
-12-SO(mg•L) 吸光度 4
0.0 0.009
6.0 0.068
10.0 0.114
20.0 0.228
30.0 0.334
40.0 0.45
50.0 0.555
比浊法(吸光度)测定:取0.1g BaCl,稳定溶液1ml,吸取待测菌液的上清液250ul,2
加入50ml烧杯配成50ml体系,摇匀。以蒸馏水空白做对照,用紫外可见分光光度计于420nm波长处测定吸光度。
-1计算:硫酸盐(mg•L)=相当于标准溶液中硫酸盐(mg)×1000?水样体积(ml) 0菌液中硫酸盐浓度的变化为:C’= C-C;式中,C'是菌液中实际硫酸盐浓度,C是测得的硫0酸盐的浓度;C是菌液中硫酸盐的初始浓度,即刚接入菌种时,菌液中硫酸盐的浓度。
以硫酸根浓度为横坐标,吸光值为纵坐标,绘制工作曲线并作回归分析如下:
0.6
0.5
0.4
0.3
A(420nm)0.2
0.1
0
0102030405060
硫酸根浓度(mg/L)
图3.1 标准曲线
表3.3作曲线的线性回归分析
Parameter Value Error
A 0.0055 0.00202
B 0.01102 7.17244E-5
R SD N P
0.99989 0.00325 7 ,0.0001
-1由上述对工作曲线的回归分析可知:硫酸根浓度在10-50 mg•L内,硫酸根浓度与吸光度呈很好的线性关系,相关系数r,0.999,标准曲线为:y=0.0055+0.011x
经反复试验,以每次取菌液250ul所得数据可以较好的用词曲线来求所含硫酸根离子的浓度。
硫酸根离子测定方法:
取250?L样品,1mL稳定液,用蒸馏水定容到50mL,称取0.1gBaCl迅速倒入2搅拌中的溶液,计时搅拌1min,静置15min,于420nm处测吸光度(以蒸馏水为对照)
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