【doc】乌头类中药化学成分及其生物碱含量测定方法的研究概况

【doc】乌头类中药化学成分及其生物碱含量测定方法的研究概况 乌头类中药化学成分及其生物碱含量测定 方法的研究概况 第9卷第O2期?总第106期 2011年01月?下半月刊◎瑷代DISTANCED远UCAl程擞]ONOFC育INA 乌头类中药化学成分及其生物碱含量测定方法的研究概况 周玲 关键词:乌头类中药;生物碱;测定方法:中药鉴定;综述 doi:10.3969~.issn.1672.2779.2011.02.171文章编号:1672—2779(2011) 一02—0223-02 乌头类中药材具有悠久的临床运用历史,包括附子, 川乌,草乌等.中医认为乌头类药材有大热,大毒的药 性.其中附子具有回阳救逆的功效,临床上多用于治疗 阳虚阴盛;乌头具有祛风湿止痛的功效,临床多用于治 疗风湿性关节炎.现代研究表明乌头类生物碱既是其有 效成分,也是毒性成分[1】.因此不少学者对乌头类生物 碱的种类和含量测定的方法进行了研究. l乌头类中药化学成分的研究概况 附子来源于毛莨科乌头属植物乌头Aconrtum carmichaeliiDebx.的侧生子根及加工,是众多乌头类 中药中最常用的一类;川乌为毛茛科植物乌头Aconrtum carmichaeliiDebx.的干燥母根;草乌为毛茛科植物北乌 头AconitumkusnezoffiiReichb.的干燥块根L2J. 附子,川乌及草乌中共同的化学成分有:双酯型生物 碱,如乌头碱(Aconitine),新乌头碱(Mesaconitine),次 乌头碱(Hypaconitine);胺醇类生物碱,如尼奥灵(新乌宁碱, Neoline),塔拉乌头胺(Talatizamine);二萜类生物碱,如 北乌碱(Beiwutine),去氧乌头碱(Deoxyaconitine). 从毒性角度来看,乌头类中药中的主要毒性成分为 双酯型生物碱,单酯型生物碱和胺基醇型生物碱.其中 双酯型生物碱的毒性最大,主要有乌头碱,新乌头碱和 次乌头碱三种,属于难溶于水的脂溶性成分;单酯型生 物碱是双酯型生物碱c8位上的乙酰基水解失去一分子 乙酸后的产物.属于亲水性成分,毒性较小,为双酯型 生物碱的1/2000;胺基醇型生物碱是酯型生物碱C14 位上苯甲酯酰基水解失去一分子苯甲酸后的产物,属强 亲水性成分,毒性甚微,仅是双酯型生物碱的1/2000 1/4000.通常认为这三类生物碱既是乌头类中药的有效 成分,也是它们的毒性成分J. 2乌头总生物碱含量测定方法的研究概况 2.1酸碱中和法原理:利用生物碱的碱性,用酸直接 滴定或加入定量酸液及指示剂,用氢氧化钠液回滴定, 根据消耗碱液的体积计算出乌头类总生物碱的含量. 1990年版,1995年版,2000年版,2005年版,2010年 版《中国药典》一部中对制川乌,制草乌中乌头类总生 物碱的含量测定均采用此方法. 方法:取本品中粉10g,精密称定,加乙醚.三氯甲 烷(3:1)的混合液50ml与氨试液4ml,密塞,摇匀,放 置过夜,滤过,药渣加乙醚一三氯甲烷50ml,连续振摇 lh,滤过,药渣用乙醚一三氯甲烷洗涤3,4次,每次15ml, 滤过,洗液与滤液合并,低温蒸干.残渣加乙醇50ml 使溶解,精密加入硫酸滴定液(0.01mol/L)15ml,水15ml 作者单位:四川省乐lJJ市市中区中医医院药剂科(614000) 与甲基红指示液3滴,用氢氧化钠滴定液(0.02mol/L) 滴定至黄色.每lml硫酸滴定液(0.01mol/L)相当于 12.9mg的乌头碱J. 有学者采用此方法测定了川乌,附子及炮制品中生 物碱的含且【,还测定了制剂三七伤药片【10],小活络丸【l1] 中的总生物碱的含量.此方法的优点是简单易行,不需 要很昂贵的仪器设备,容易普及;缺点是操作方法比较 麻烦,如果操作的平行性不好,会使误差较大. 2I2分光光度法 2.2.1酸性染料比色法原理:利用生物碱和酸性染料 (如溴甲酚氯)反应生成的络合物在紫外光下有吸收, 用乌头碱的标准液绘制标准曲线后,根据标准曲线法计 算乌头类生物碱的含量.利用酸性染料比色法测定生物 碱总量时,要注意符合比尔定律的含量范围,水相pH 的选择要与文献中的一致. 方法:精密量取乌头碱标准液0,0.5,1.0,1.5,2.0, 2.5ml,分别置于分液漏斗中,加入三氯甲烷20ml,以第 一 份为空白对照,然后各加入10mlpH=6.0的溴甲酚绿染 料,充分振摇,静置1h,三氯甲烷层置于25ml量瓶中 并用三氯甲烷稀释至刻度.于415nm波长处,测定吸光 度.以生物碱量与吸光度为横纵坐标,绘制标准曲线. 再用同样方法在同样条件下测定样品溶液的吸光度,最 后根据标准曲线法计算出乌头碱的含量Ij.? 乌兰娜日等选择溴甲酚绿为酸性染料,以乌头碱 (10mg/lOOml,氯仿)作对照,于波长(415?1)nn3处 测定附子理中丸中乌头总碱含量.平均回收率为99.5%, RSD为1.43%.王海孙等[】3】选择文献的条件测定风湿骨 痛酒中乌头总生物碱含量,平均回收率为98.58%,RSD 为1.83%.此方法的优点是灵敏度高,简便,准确快速. 缺点是干扰因素多,水相pH值或指示剂配制,处理均 影响呈色稳定性,颜色稳定时间较短,需用对照品绘制 标准曲线,且专属性差. 2.2.2导数分光光度法原理:利用设定不同的求导阶 数以清除干扰组分的吸收,直接进行测定生物碱的含量. 根据导数分光光度法,样品经乙醇提取后,不经分离即 可直接测定,测定结果与药典法比较,无显着差别. 龙沛霞等[1】将制草乌,制川乌,附子在碱性条件下 用乙醇提取生物碱,不经分离,直接采用一阶导数紫外 分光光度法测定总生物碱的含量,操作简便.徐思文采 用二阶导数光谱法测定三七伤药片中总生物碱含量,样 品和标准品溶液在波长(238?2)am和(246?2)nnl处 有相应的吸收谷和吸收峰,而阴性对照光谱呈近平行线, 不干扰样品中乌头总生物碱的定量分析.所以选择此两 波长谷峰之间的导数振幅值作为三七伤药片中总生物碱 ◎MEDC荩INEM为ODERNDISTANCED远Lk.CAT 程教IOI,!OFC 第9卷第02期?总第106期 20l1年01月?下半月刊 的定量依据.此法的优点是灵敏度很高,准确,简便, 且提取溶剂乙醇比氯仿对人体更安全.缺点是选择性差, 达不到对双酯型乌头碱限量控制的. 2.3薄层扫描法 2-3.1’高效硅胶G板.薄层色谱李焕荣等选择高效 硅胶G板,以氯仿一醋酸乙酯一氨水(15:20:1)为展开 剂展开,喷以碘化铋钾显色后,双波长锯齿形反射扫 描测定镇痛宁注射液中乌头总碱含量,平均回收率为 97.85%,RSD为1.98%. 2.3.2硅胶G板一薄层色谱王浴铭等选择硅胶G板, 以正己烷(氨水饱和).乙酸乙酯一95%乙醇(64:36:10) 为展开剂展开,碘蒸气显色后,双波长锯齿形反射扫描 测定活血壮筋丹中乌头总碱含量.平均回收率为 95.75%,RSD为0.824%. 薄层扫描法准确度高,专属性强,重现性好,适用 于不能用酸碱中和法进行含量测定的复方制剂. 2.4高效液相色谱法(HPLC)邹恩济等采用反高效 液相色谱法,以甲萘基为内标,分离测定两种蒙成药那 如一3,嘎日迪.5中草乌的3种剧毒性成分,选择色谱柱 为150mmX416mmid的不锈钢柱;流动相甲醇.水.氯仿 一 三乙醇(70:30:20:l1),检测波长230nm.平均回收率: 新乌头碱9817%,RSD=2.1%;乌头碱93.65%,RSD为 1.1%;次乌头碱101.7%,RSD=3.2%. 现行2010年版《中国药典》中采用的高效液相色谱 法可以同时测定含乌头碱的复方制剂中六个组分,包括 单酯型和双酯型生物碱【. 用HPLC测定中乌头碱的含量,操作简便,样品用 量少,杂质分离效果好,乌头碱,次乌头碱,新乌头碱 均达到了基线分离,回收率,重现性,精密度均很好. 3总结 现在测定乌头总生物碱或者是测定酯型生物碱的含 量有许多方法,但要根据条件进行灵活的选择.酸碱中和 法适用于川乌,草乌,附子单味药材乌头生物碱含量测定, 不适合用于测定含有其他碱性成分的复方制剂;紫外分光 光度法一般只能测定乌头生物碱总量:薄层扫描法不仅可 用于单味药材JJl乌,草乌,附子中乌头碱的含量测定,还 广泛应用于含有川乌的复方中药制剂中酯型生物碱含量 测定;高效液相色谱法可分别测定乌头碱,新乌头碱,次 乌头碱的含量,且操作简便,结果准确,重现性好,是目 前复方中药制剂中乌头类生物碱含量测定的首选方法.? 参考文献 [1]李娅萍,田颂九,王国荣.乌头类药物的化学成分及分析方法概况[J1.中国 中药杂志,2001,26(10):659.660. 【2]中华人民共和国卫生部药典委员会冲华人民共和国药典2010年版(一 部)[M】.北京:中国医药科技出版社,2010. 【3]张卫东,韩公羽,梁华清,等.国内外对中药附予成分与活性的研究[J1.药学 实践,1996,14(2):91—95. 【4】王宪楷,张同芳.中坝附子及其化学成分[J].中国药学杂志,1993,28(11):690. 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(本文校对:周嘉虎收稿日期:2010-09—19) 药用植物园建设的现状,必要性与可行性浅析※ 李云贵肖海英木刘卫平肖慧勇肖艳肖志勇刘明 摘要:简述了药用植物园的概况及研究现状,并就医药院校建设药用植物园的必要性,可行性进行分析,并得出了医药院校建设药用植物 园是提高药学专业学生素质的必要条件的结论. 关键词:药用植物园;必要性;可行性 doh10.3969/j.issn.1672—2779.2011.02.172文章编号:1672—2779(2011)一02-0224—03 1药用植物园的概况与广义功能 国际植物园保护组织(BGCI)将植物园概括为以科 学研究,保护,展示和教育为目的,并具有完整的 活植物保育分区的机构[1】.药用植物园则是以科学研究, ※基金项目:2010年湖南省高等学校教学改革研究立项 项目【NO:2010”432l0 作者单位:湖南省长沙医学院药学系(410219) 考 保护,展示和教育为目的,并具有完整档案的药用植物 活体保育机构.其主体对象以药用植物为主,广义的功 能应包括了植物园的所有功能,主要有植物多样性的迁 地保护,即在植物园对稀有濒危,特有的植物物种和有 重要价值的植物种质资源实行迁地保护,展示,教育, 咨询以及科学研究,植物园收集引种的植物可作为植物 学和各相关学科研究的材料,并提供研究基地.药用植 物园集教学,科研,科普教育于一体,具有生物多样性 保护,植物种质资源保存等方面的功能,在学科建设与