黑色素脱色法
目的:当黑色素大量存在时,细胞结构可能模糊不清。脱色法同样可作为鉴别黑色素的一种因素。
对照: 两张相同的切片,一张脱色另一张不脱色。
固定:10% 甲醛
技术:4μ石蜡切片。
设备:蒸馏水清洗玻璃器皿,染色缸。
试剂:
高猛酸钾:
高猛酸钾Potassium permanganate 0.15 gm
0.3% 硫酸sulfuric acid 50.0 ml
新鲜配制,用后丢弃。
警告:避免接触和吸入。
1%草酸 Oxalic Acid:
详见浸银法
警告:避免接触和吸入。
H & E 染色
安全:穿戴丁腈手套、护目镜和白大衣,避免接触和吸入。
高猛酸钾:对皮肤和眼睛刺激,摄入可引起严重的胃肠反应。强氧化剂。
硫酸:吸入烟雾有毒性。影响靶器官为皮肤、呼吸系统、生殖系统及胎儿系统。对皮肤、眼睛和呼吸道有刺激性。当使用硫酸时应使用警告标志。慢慢加入溶解。
草酸:能引起严重的眼睛、皮肤和粘膜灼伤。吸入和摄入毒性。影响靶器官为肾血管和心血管系统,反复接触能引起皮炎。腐蚀性。
程序:
1. 脱蜡至蒸馏水。
2. 脱色:高猛酸钾溶液 2-4 hours。
3. 对照片置蒸馏水中直接至第6步。
4. 1% 草酸1-2 minutes或直至无色透明。
5. 流水冲洗。
6. 两种切片同时进行H & E染色。
7. 脱水,透明和封固。
结果:
如果色素为黑色素,经脱色的切片则不存在。
注意:组织有脱落的可能性时,可使用处理过的玻片,如果使用火棉胶必须在第2 步后使用。
参考文献:
Sheehan D, Hrapchak B, Theory and practice of Histotechnology, 2nd Ed,
1980, pp220-221, Battelle Press, Ohio
Luna L, Manual of Histologic Staining Methods from the AFIP, 3rd Ed,
1968,pp 42, McGraw-Hill, NY
Crookham,J, Dapson,R, Hazardous Chemicals in the Histopathology
Laboratory, 2nd ED, 1991, Anatech
程序卡
黑色素脱色法
对照: 两张相同的切片,一张脱色另一张不脱色。
技术:4μ石蜡切片。
程序:
1. 脱蜡至蒸馏水。
2. 脱色:高猛酸钾溶液 2-4 hours。
3. 对照片置蒸馏水中直接至第6步。
4. 1% 草酸1-2 minutes或直至无色透明。
5. 流水冲洗。
6. 两种切片同时进行H & E染色。
7. 脱水,透明和封固。
结果:
如果色素为黑色素,经脱色的切片则不存在。
注意:组织有脱落的可能性时,可使用处理过的玻片,如果使用火棉胶必须在第2 步后使用。
高猛酸钾:
高猛酸钾Potassium permanganate 0.15 gm
0.3% 硫酸sulfuric acid 50.0 ml
新鲜配制,用后丢弃。
警告:避免接触和吸入。
1%草酸 Oxalic Acid:
详见浸银法
警告:避免接触和吸入。
H & E 染色