维生素C的测定

维生素C的测定 所需试剂: 100ug/ml维生素C标准溶液:在电子天平上准确称取维生素 C10mg,加2ml 10%的盐酸混 匀,加入新煮沸并冷却的二次 蒸馏水定容至100ml的棕色容 量瓶: 10ug/ml维生素C标准溶液:用吸量管吸取10ml 100ug/ml 维生素C标液于100mL容量瓶 中,加入1%HCl溶液稀释至刻 度,摇匀。现用现配。 0.1mol/L的1%HCl溶液 所需器材:吸量管,100ml、50ml的棕色容量瓶,1cm的石英比色皿,721型分光光度计,电子天平,榨汁 机,精密漏斗,酸度计 实验步骤: 1.吸收曲线的绘制(1) 用吸量管移取1.0ml的10ug/ml维生素C标准溶液移入50ml的容量瓶中,加1%的HCl溶液稀释至刻度,以1.0ml 的蒸馏水为参比溶液,用1cm石英比色皿在190nm~300nm 的波长下间隔10nm测量一次吸光度,其中在230~250nm之 内,间隔5nm测量一次。然后以波长为横坐标、吸光度为纵坐标绘出吸收曲线,并确定适宜的工作波长。 2.溶液酸度的选择(2) 取9支试管,8支各加入0.0,5.0,7.5,, 10.0,12.5,15.0,17.5,20.0ml的HCl溶液,配置不同pH值的盐酸溶液,以不同pH值的盐酸为溶剂,加入2ml的维生素C 的标准溶液,加水定容至50ml,摇匀,以蒸馏水为参比溶液,在选定的波长下测量各溶液的吸光度。用酸度计测量个溶液的pH,以溶液的pH值为横坐标,相应的吸光度为纵坐标绘制A-pH曲线,确定适宜的pH范围。 3.标准曲线的绘制 用吸量管分别吸取维生素C标液0.0、0.2、0.4、0.6、0.8、1. 0ml, 到6个洁净的50mL容量瓶中, 加入1%盐酸溶液, 稀释至刻度,摇匀,以0.0mL维生素C标液为空白作参比, 在242. 6nm 波长下,用1cm 石英比色皿,测定吸光度,根据数据画出标准曲线。 4.蔬菜的预处理: 将样品洗净, 用滤纸吸干表面的水,用电子天平准确称取 10g, 用榨汁器将其榨汁,并过滤得样品汁液,将滤液移入 100mL 棕色容量瓶中, 加2mL10%HCl,混匀, 加入新煮沸并冷却的蒸馏水定容, 摇匀, 若提取液澄清透明, 则可直接取 样测定,若有浑浊现象, 可通过台式高速离心机6000r/ min(加 0. 45 m 滤膜) 离心过滤,消除浑浊现象,作为储备液, 备用。 5.蔬菜中维生素C含量的测定 用吸量管吸取上述样品储备液1mL于50mL容量瓶中加入1% HCl稀释至刻度,摇匀, 最后进行测定。 参考文献: 1.斯琴格日乐等,苦瓜中维生素C含量的测定【J】光谱实验室,2011.28(2)::846-849 2.新乡医学院.卫生化学实验.人民卫生出版社.2010.25-27 3.徐琳苏筱渲等,维生素C含量测量不确定度的评定【J】工业技术, 2011.6上:67-67