人巨细胞病毒感染与染色体着丝粒点变异关系研究
人巨细胞病毒感染与染色体着丝粒点变异
关系研究
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科墨2f!堂(ActaUniversitatisScieU—aeMedicinn.Ch,ongqing) 文章编号:0253?3626(2000)02-0113-02 人巨细胞病毒变异关系研究
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摘薹Ig的:研究孕妇HcMv感染对胚胎染色体着丝粒点(cd1变异的影响,探讨cMV感染引起出生缺陷的原困和机 H
制.方法;用我室改良的cd_NOR同步银染技术对l5例HcMV感染和25例非感染孕妇的胚胎或绒毛组织cd消失,cd变异进打
比较
.结果:前者cd消失,cd变异频率较后者有显着和极显着的增高.结论:染色体cd的变化可能是HCMV感染引起胚
胎发育异常的重要原因之,对HcMv感染孕妇的胚胎或绒毛组织进行染色体cd分析对
胚胎进一步发育可能受累的风险
和优生优育具有重要的临床意义.
~till词着丝粒点;巨细胞病毒;
中国圈
分类法分类号:Q343.2
胚胎;
R373
产前诊断H
文1吐标识码{A收稿日期;1999?12-14
Astudyontherelationshipbetweentheinfectionofhuman
cytomegalovirus(HCMV)andthevariationofkinetochore
WENGYa-guan~,etal
Laborator5rofGenetics,Dcpa.r~crdofFamilyPlanning
AbstractObie~ive:WestudiedtherelationshipbetweentheinfectionofHCMVandthevariationot
kinetochore.researchedthemechanismofcausingabnormalgrowthembryo.Methods:Kinetochore
(centromericdots,Cd)ofchorionicvillusorembryotissueof15HCMV.DNA(PCR)positiveand25HCMV-DNA
(PCR)negativepregnantwomenwerestudiedbyCd-bandingtechniques,Results:ThefrequencyofCdlossand
Cdsizevariationinpositivegroupweresignfiflcanflyhi曲
erthanthoseinneg~ivegroup.Conclusion:Thes柚dy
indicatedthatCdvariationcausedbyHCMVinfectionplayanimportantroleinformofbirthdefect,Cdbanding
analysisinchorionicvillusorembryotissueofHCMV-DNA(PCR)positivepregnantwomencouldevaluatethe
riskofabnormalgrowthembryo,
KeyWordsKinetochor~;Cytomegalovirus:Embryo:Prenataldiagnosis 人巨细胞病毒01umancytomeg~lovirus,HCMY)
是引起人类先天性畸形和婴幼儿感染的重要病原之
一
,然而HCMV~『起出生缺陷的原因和机制尚不清
楚.染色体着丝粒点(centromeredots,Cd)是染色体
与纺锤丝连接的部位,主要DNA和cd蛋白组成,
是细胞有丝分裂中保证染色体正常分离的重要结构
.胚胎发育过程中细胞进行着旺盛的有丝分裂,
染色体Cd功能异常会导致细胞分裂过程中染色体数
目异常而引起胚胎发育异常或出生缺陷.本文对
HCMV感染与染色体Cd变异的关系进行了研究,从
细胞遗传学的角度来探讨HCMV感染引起胚胎发育
异常和出生缺陷的机制.
1材料与方法
作者彳r绍:翁亚光(1962-07t~k).男.副救授
1.1对象用PcR方法对妊娠4,20周妇女HCMV?DNA进 行检测(华美公司试剂盒),并对25例HCMV?DNA阴性, 17例HCMV-DNA阳性孕妇胚胎或绒毛组织细胞体外培养制 各染色体标本.其中25例HCMV-DNA阴性孕妇胚胎或绒毛 组织染色体核型全部正常(非感染组),17例HCMV-DNA 阳性孕妇胚胎或绒毛蛆朗中2例为染色体非整倍性异常,15 例染色体棱型正常(感染蛆)
1.2方法
1.2.1采用长期或短期细胞培养法制备绒毛或胚胎的染色体 标本.
1.22对染色体核型正常的标本用我室改良的Cd-NOR同步银 染法制备染色体cd标本,
1.2.3标本分析
cd消失:每条染色体的两条或一条染色单体的Cd区未染 色计Cd消失一次(见图l,图2)
CA变异:每条染色体的两条或一条染色单体的Cd染色区 小于正常cd太小的一半计cd变异一次(见图l,图2).
重庆医科大学2000年第25卷第2期
(AclaUnivemRatisScientiaeMedicinaeChongqing)
嗍正常CdCd消失Cd变异
圈1c?变化示意圈
2结果
圈2cd丑t照相圈(16×100倍)
对感染组和非感染比较分析结果
明:HCMV 感染孕妇的胚胎或绒毛组织细胞染色体cd消失频
率,cd变异频率的增高与非感染组比较.经统计学 分析(t检验)差异显着和极显着.
寰HCMVA和非感;组Cd变化比较分析寰(dt譬) 表示与非感染组比较有显着差异(0_05) 幸幸表示与非感染组比较有极显着差异(.p(0.01) 3讨论
HCMV感染目前认为是引起胚胎发育异常的重 要原因之一,孕妇感染后可通过胎盘致胎儿宫内感 染.导致孕妇自然流产,死胎,胎儿先天畸形等 .在自然流产,死胎中染色体数目异常胚胎约占 50~,4.我们曾对自然流产的胚胎绒毛染色体cd研究 中发现cd的变异与正常胚胎比较有显着的增高, 这可能是引起染色体数目异常的重要原因之一,然 而引起染色体cd变异的原因尚不清楚.HCMV侵入 人体细胞后,病毒DNA将会破坏细胞原有的遗传平 衡或通过病毒DNA整合到人类DNA上,导致部分基 因结构或功能的异常.我们认为这种整合可能涉及 到:1,Cd区DNA,改变其原有的结构和特性,将 阻碍Cd蛋白与该DNA区的正常结合:2,Cd蛋白相 关的基因,可造成Cd蛋白合成缺陷或结构和功能异 常.这些变化将会使整个cd的组成,结构和功能直 接受到影响.
cd消失可由cd蛋白缺乏所致,表明Cd活性的 丧失.cd消失频率感染组与非感染组比较.统计 学分析有显着的增加,Cd的消失会严重影响纺锤丝 与cd的正常附着.最终导致染色体分裂异常.因此 HCMV感染造成cd消失很可能是HCMV感染引起自 然流产,死胎甚至胎儿先天畸形的一个重要原因. cd变异表现为Cd区变小.这种变化会导致纺锤丝微
管与Cd连接的数量减少.从而影响其连接的稳定
性,引起染色体移动的滞后或延迟,使部分染色体
丢失或不分离.经统计学分析.Cd变异频率感染组
与非感染组比较有极显着的差异,表明HCMV感染
引起Cd变异频率的变化程度高于Cd消失频率,即
HCMV感染对Cd的影响表现出Cd严重受损的比例较
低.轻度受损的比例较高的特点.
由此可见,HCMV感染是引起Cd异常的一个重
要原因,Cd异常又可导致染色体数目异常.引起
胚胎发育异常或出生缺陷.目前,对感染HcMV孕
妇的胎儿宫内感染的临床诊断尚有一定难度.而通
过绒毛或胎儿染色体Cd分析,可以评价尚未发生
染色体异常胚胎今后发育过程中可能受累的程度和
风险.因此对于早期产前诊断中发现HCMV感染的
孕妇的胚胎,辅以染色体cd分析,对防止出生缺陷
和优生优育具有一定的临床意义和重要的参考价
值.
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