燕麦β葡聚糖的提取、纯化及脂肪酸分析（可编辑）

燕麦β葡聚糖的提取、纯化及脂肪酸（可编辑） 燕麦β葡聚糖的提取、纯化及脂肪酸分析 甘肃农业大学 硕士学位论文 燕麦β-葡聚糖的提取、纯化及脂肪酸分析 姓名:宋雪梅 申请学位级别:硕士 专业:农产品加工及贮藏工程 指导教师:韩舜愈 20060601 摘要 燕麦是涎圭蠡送主要农作耪,曩年磷究发凌燕发一甏聚糖具有蘩要垒兰理睾臻,燕 麦浊含袁大燕不饱和艟肪酸。提取缝化?一葡聚糖和开发功能性油脂是燕麦深加工增值 的有效途径,能促进以燕麦为基本原料的保健食品、医药产业的快速发展,对加快西北 地区的经济发展可起到~定的促进作用。 ?.葡聚糖和油脂主要富集于燕麦麸中,本文以曹肃镑脱目旨燕麦麸作为实验丰辛释, 磺究了影确彝一羲聚糖掇取率缝因素,鲤提取时闼、僮、涅魔巍 料滚毙,然后喇黑正 交表优化撮数.萄聚糖的工艺参数,并对一麓聚糖粗品中主要杂质淀粉和蛋白质去除 以及最大稷度地富集.葡聚糖等关键步骤进行了研究。以燕麦麸作为实验,利用 正交袭优化出用超临界二氧化碳萃敬燕波油的最佳工艺参数,并用.对其脂肪酸 组分避行了分祈。 终票表明:?.蘩聚糖提墩熬最佳工艺参数必滠度?、埴、时间期斟滚 比:;剥用中湿.淀粉酶进行二次去淀粉,以淀粉酶与提取液反应后的颜色变化作 为淀粉去除效果的评价标准。提取之前,加入/.淀粉酶,反应,提取 完成借,加入/.淀粉酶,反应,即可完全除去淀粉。 法去豫蛋鑫矮需要重复六次,脱蛋寤率为.%,增秀螽去狳蛋囊次数辩,受 自去除事足乎不变。等电点法、胰蛋白酶法、胰蛋自酶结合等电点法和膜蛋自酶结合 法除去蛋白质的去除率分别为.%、.%、.%和.%,而多糖保留率 分别为%、%、.%和.%。综合所述,胰蛋白酶结合等电点法怒去除蛋白质 的最佳方法。不同浓度的乙醇沉淀提取液中?.葡聚糖时,%醇麓够最大量瓣沉淀 出.篱聚糖。霉焉确%乙醇、蔽羧铰稻髯蠢醇分别淀淀?一蘩滚骧,结果表锈:%乙 醇沉淀昼一旗聚耱的效巢比其它两种沉淀浏好。 刹用超临界二氧化碳萃取燕麦油的最佳工艺参数为萃取压力、温度?和 时间。燕麦油中的脂肪酸主要有棕榈酸、硬脂酸、顺一.十八碳烯酸、豫油酸、亚麻 酸、反..十八磙烯酸,其桶对含羹分嗣为.%、.%、.%、.%、.%莽 .%,两且不撼帮鼹肪酸占.%。 脂肪酸 关键词:燕麦麸 .葡聚糖 提取纯化 超临界萃取 。 . . ,. . ,,。 ,一 .、 。 .一 。, :. , ? 。?, . ? 。’ .%,., 。, ,.%,.%,.% ?%.% %,%,.% ,..? 。 %% %,% ?一 / % 。/ ? 。。,.%, .%,一一 : .%, .%, % 一 .%. .%. :?一 甘肃农业大学硕士学位论文 文献综述 燕麦的种植分布 燕麦 是起源于我国的一种古老的粮食作物,已有两千多年的栽 培历史。世界上很多国家都有燕麦的种植,在八类重要禾谷类作 物中,燕麦的总产量仅 次于小麦、水稻、玉米、大麦和高粱,居第六位李进,。掘世界粮 食组织 统计,~年全球年平均种植燕麦面积.×,产量约亿马得泉, 。燕麦产量最多的几个国家依次为:苏联、美国、加拿大、波兰、 德国、法国和 中国。年,全球燕麦的播种面积达至.×,产量为.万吨。同年, 我国燕麦播种面积为×,产量为万吨中国农业年鉴,。目前,我国 有内蒙古、河北、山西、甘肃、陕西、宁夏、新疆、青海、西藏、云南、贵州、四川、 黑龙江、辽宁、吉林等区约个县种植燕麦,播种面积达×王百姓,。 从植物分类学上来说,燕麦属于禾本科燕麦属一年生草本植物,喜冷?湿润的候条 件,一般分为皮燕麦和裸燕麦林汝法,,我国种植的燕麦以裸燕麦 .为主周建新,。 燕麦的营养成分和保健作用 燕麦与其它谷物相比,具有很好的营养价值。燕麦蛋白质含量在.%~.%之间, 多数在%左右,在粮食作物中居首位。其中必需氨基酸组成与每日摄取量的标准基本 相同,可有效的促进人体生长发育张丽萍,。燕麦中蛋白质是任何谷物中氨基 酸最平衡的谷物冯俊,。燕麦脂肪含量在.%~.%之间,平均值为.%,属 于优质脂肪酸,而且主要是亚油酸,占整个脂肪酸的%~%张丽萍,。距油 酸是世界公认的降血脂药物的有效成分。具有降血压、降甘油三酯的作用,可以软化毛 细血管,预防血管硬化,延缓人体衰老等功效修娇,。燕麦含有丰富的锌,可 以促进伤口愈合。燕麦中丰富的维生素可以扩张末稍血管,改善血液循环,调整身体 状况,减轻更年期症状。锰可以间接预防骨质疏松。燕麦中硒含量是大米的.倍,小 麦粉的.倍,玉米的.倍,位居谷物之首,具有增强免疫力、防癌、抗衰老等作用冀 保国,。 澳大利亚学者奥夫尔黄艾祥,证实燕麦中含有所有谷物中所缺少的皂 甙。微量皂甙与植物纤维结合,吸取胆汁酸,促使肝脏中的胆固醇转变为胆汁酸随粪便 排出,间接降低了血清胆固醇。燕麦内含有一种燕麦精,有着各类香味,具有提神、兴甘肃农业大学硕士学位论文 奋作用,可与降血压药物“冠心平”相提并论,并且无损伤肝肾的副作用。燕麦中含有 多种天然抗氧化物,如各种酚类化合物包括阿魏酸、香草酸、芥子酸和香豆酸等】, 酚酸的衍生物燕麦生物碱、黄酮类、植酸类化合物及固醇都对人体具有一定的保健作用 修娇,。燕麦中还含有丰富的一葡聚糖,它具有许多生理作用如降血脂等马 晓凤,。 营养与保健是当代人们对膳食的基本要求,裸燕麦作为谷物中最好的全价营养食品 之一,恰恰能满足这两方面的需要。正如美国著名谷物学家,.在第 二届国际燕麦会议上所说的一句很有代表性的话:“与其它谷物相比,燕麦具有独一无 二的特色,即具有抗血脂成分、高水溶性胶体、营养平衡的蛋白质,它对人类提高健康 水平有着异常重要的价值”马得泉,。正是由于燕麦的营养和保健价值,燕麦 及燕麦制品越来越受到人们的重视和喜爱。 燕麦的加工与开发现状 由于燕麦所具有的营养和保健价值,近年来国内外对其进行了较广泛的开发利用。 国际上,在燕麦的个主要产区北欧和北美,对燕麦的研究不发趋于全方位、系统化、 深层次、多样化,从燕麦的种植、产品的开发到燕麦产品的经营都有较为系统的运作冯 俊,。比方说,美国白年建立了桂阁公司以来,就不始了工业化的燕麦片生 产,到现在生产技术已完全成熟。目前美国的燕麦加工业仅次于面粉和饲料加工业,成 为第三大粮食加工业,并形成了成套、先进、可靠的工艺和设备。此外,他们在推出燕 麦纤维和燕麦系列食品的基础上,还扩大了燕麦的其他用途,燕麦营养保健食品已逐渐 形成系列化。 在国内,虽然燕麦栽培的历史很悠久,但长期以来一直是作为产区群众粮草兼用作 物,裸燕麦经简单的作坊式加工制成燕麦粉或食用、或直接作为动物饲料。除了引进的 燕麦片生产线外,基本谈不上对燕麦的深加工和综合利用,同时在消费群体中食品保健 意识形成较晚,对燕麦的保健功能迄今为止未能形成普遍认识,因而也影响了燕麦保健 食品的开发。当前以燕麦为原料的食品、保健工业仍处于起步阶段刘河,。八 十年代以后,国内才开始出现几家规模较大的燕麦片生产企业,如内蒙的武』、山西的 山阴、新疆的乌鲁木齐、甘肃的会宁、上海金山粥和深圳松发等,总计燕麦片年产量不 过千吨。近年来,国内部分企业在燕麦深加工产品上也有所创新,如甘肃兰』丛博连绿 色食品公司从燕麦中提取了部分有效的活性成分后,生产了虫草 晶口服液、山东青岛海甘肃农业大学硕士学位论文 洋研究所类似的研制出了降糖乐刘河,。但从整体上来讲,这些企业规模不大 且销量小,而且市场还没有全面接受“燕麦产品”这个概念,有待于实施战略性市场开 发。 目前,从国内外情况来看,燕麦在食品中的应用主要包括以下几个方面:婴儿食品、 挤压食品、饮料、早餐食品、焙烤食品、快餐食品、保健品等,其中在焙烤食品和快餐 食品中应用最多。近年来,膳食结构存在的问使得城市中高血脂、血管硬化、肥胖病 等“富贵病”发病率不断上升,燕麦食品的需求也会相应增加。总之,随着我国人民生 活水平不断的提高、膳食结构的变化、保健意识的增强和保健食品工业的蓬勃发展,消 费者追求全价营养食品,膳食中增加杂粮和粗粮,而燕麦无疑是这些谷物的首选品。 燕麦麸的利用和开发 燕麦除了为人类提供粮食外,就其副产品而言,还有秸秆、麸皮、糠壳等。就所占 比例来看,后者要大于前者,而且科学利用潜力很大。特别是麸皮, 含有丰富的纤维能 加快肠胃蠕动,增加饱腹感,减少热量吸收,己引起国内外学者对其研究、开发和利用 的极大兴趣马晓凤,。麸皮一般指的是谷物颖果的外层。以小麦而言,它的结 构决定了通过碾磨工艺就能够很好的实现面粉与麦麸的分离,但燕麦的结构松软,很难 做到这一点。即使碾磨后,所谓的“麸皮”中仍含有较多的粉质,因此很难从作物解剖 结构学上对“燕麦麸”下一个准确的定义。直至年,出于商业应用上的需要, 有关部门对它才有了一个标准:清洁的燕麦或燕麦片经碾磨、筛分后得到燕麦的外层组 织,这个组分的得率不超过原始物料的%,其中总一葡聚糖含量不低于.%干基, 总膳食纤维含量不低于%干基,且至少有/是可溶的顾尧臣,。除了这个标 准外,德国农业协会也有一个标准:食用级燕麦麸皮由燕麦籽粒周围的皮层组成, 燕麦颖壳不算周围的皮层,其中的总膳食纤维含量不低于%干基顾尧臣,。 不管从哪个标准来看,膳食纤维的含量是评价燕麦麸皮质量的一 个重要指标。 膳食纤维富集于麸皮中,利用麸皮中的膳食纤维研究和不发“功能性食品”已成为 热门课题。燕麦纤维在膳食纤维中属新型高级食用纤维,它特有的降血脂功效是谷类中 唯一的。国外已将燕麦麸加工成膳食纤维粉、强化面包、饼干等食品,或与香料、盐混 合与肉一起加工成肉糜制成低脂肉,很受喜食肉又怕胆固醇高的消费者欢迎。原西德科 印制了添加燕麦麸的说 学家将燕麦麸与其它谷类混合制成的休闲食品,在其包装: 明,以吸引顾客。美国学者则以燕麦粉和燕麦麸为原料,用一淀粉酶水解,获得甘肃农业大学硕士学位论文 液状的含%一葡聚糖的淀粉糊精,代替食品中的脂肪,从而减少热量的摄入。国内王 常青对燕麦纤维进行了挤压研究;高瞻对燕麦水溶性膳食纤维的提取、 流变型、挤压进行了一系列研究;刘森、马晓风等也对燕麦麸的改性、 挤压和降血脂等功效进行了研究,并研制了高纤维产品“高纤麦维素”。但和国外相比, 国内对燕麦纤维及其食品的开发研究仍有很多差距。 一葡聚糖的研究状况 等比较了普通燕麦麸、纤维素的降脂作用,研究结果表明燕麦中降脂的有 效成分是口一葡聚糖,它占燕麦胶的~%。一葡聚糖是谷物胚乳和糊粉层细胞壁的 ~种非淀粉多糖,是燕麦胚乳细胞壁的重要成分李孝辉,,富集于脱皮燕麦的 糊粉层。一葡聚糖是由右旋葡萄糖以一?糖苷键连接的多糖,其中每两到三个单 元由一?糖苷键连接。它不是独立的物质,而是和蛋白质、戊聚糖等紧密结合在 一起。一般来讲,由于原料品种和制粉加工工艺不同,商品燕麦麦麸中一葡聚糖含量 为%,之间。 .燕麦一葡聚糖的提取 等提出了温和碱提取法,用值,离子强度.的碳酸钠在 ?下提取,之后调值到.去除蛋白,这种方法得到的非淀粉多糖含有%左 右的蛋白质,非淀粉多糖再用硫酸铵分级。根据同样的原理,等报道了大量提取 燕麦胶的方法,用这种方法从燕麦麸中提取到.燕麦胶,其中包括%的 一葡聚糖和%的淀粉,进一步用硫酸铵纯化后,一葡聚糖含量增加到%~%。 和等研究了温度、值对燕麦一葡聚糖提取的影响,指出 .、。或氖。或。下提取时,淀粉污染较小,并且,按此条件从燕麦 麸皮中提取出%~%的一葡聚糖,从裸燕麦中提取出%~%的一葡聚糖。由于 等指出通过干磨和筛分可以得到 一葡聚糖在籽粒中的含量较低, 富含一葡聚糖的大麦和燕麦组分,可以使一葡聚糖的含量比籽粒中增加.~.倍: 干磨和气选分级也可以使一葡聚糖的含量增加%。等提出用乙醇处理,千磨 和湿磨相结合,可使燕麦麸皮中的一葡聚糖含量达%~%。 国内对一葡聚糖的制备研究较晚,李孝辉等从大麦中通过酶解法制备了 一葡聚糖。而管骁确定的燕麦一葡聚糖的最佳工艺参数是,温度、 值、料水比:和提取时间。在此工艺条件下,一葡聚糖的得率为.%,经过纯甘肃农业大学硕士学位论文 化,最终一葡聚糖粗品以燕麦胶的形式存在,呈白色,纯度可达%,其它主要杂质 为蛋白质。申瑞玲等人研究了莜麦麸皮水溶性一葡聚糖的提取,所确定的工 艺参数为提取温度为。、料水比:,最后用异丙醇沉淀一葡聚糖,测得一葡聚 糖的得率为.%。 .燕麦一葡聚糖含量测定 定量测定方法的确定是研究一葡聚糖的基础。国外学者很早就开始尝试一葡聚 糖各种定量测定方法,但效果均不理想。测定方法的不同导致所得结果往往差异较大, 即使同定方法,不同实验室测定结果也不尽相同,其原因在于燕麦中一葡聚糖是 否被完全提取。等提出采用肼处理可使一葡聚糖完全提 取,该方法曾用于谷物中总一葡聚糖测定,但由于整个过程耗时,且透析除去肼 又需,这样长达处理不仅分析周期长,且容易造成一葡聚糖降解而使测定结 果偏低。酶法测定~葡聚糖时,必需将一葡聚糖与其中混杂的淀粉等其它杂质分开, 否则就需要采用专一性一葡聚糖酶进行水解后测定葡聚糖含量。到目前为止,测定一 ,。 葡聚糖的方法有流动注射荧光法、专一性酶法和高效液相色谱法 其中,酶测定法因其反应专一,测定准确、可靠,而被采用为国际 测定方法, 。 . 一葡聚糖分子量测定和结构研究 .. 一葡聚糖分子量 一葡聚糖在人体内的许多生理功能均与其粘度大小有关,而其粘度高低取决于分 子量、分子结构和一葡聚糖浓度。等人研究表明,一葡聚糖分子量 受品种、产地、提取方法和测定方法不同而异。因此,报道的有关分子量从.×到 .×不等,且燕麦一葡聚糖分子量大于大麦一葡聚糖分子量。当用水提取时,提 取温度对提取一葡聚糖分子量影响不大,但用氢氧化钠溶液提取一葡聚糖的分子量 明显低于水提分子量。等研究表明,在浓度一致的条件下,燕麦麸皮中一葡聚 糖粘度大予胚乳中一葡聚糖粘度。因此,可以推测燕麦麸皮中一葡聚糖分子量高于 胚乳中一葡聚糖分子量。 .. 一葡聚糖分子中一一和??糖苷键比例 关于一葡聚糖分子结构,国外学者很早就开始研究。现已知它是一葡萄糖以? 一和一?糖苷键连接而成的线性多糖。这两种糖苷键的比例大致为: . 。但其确切比例,不同学者研究结论略有不同,这与研究中所采用的提取甘鸯表韭大学蘸士学簸论文 祭件、温度、及分析方法有关。 ..分子?一?秘一一糖营键分舔 关于一葡聚糖中一和?糖背键分布问题,早期研究认为,一葡聚糖分子 中每隔~令圣一一糖蓉键裁毒令?一一耱营毽。靼: 一?一?一。一?一?一一。一 一一:一一糖营镶 一?一:一糖苷键 瞧部分学嚣稿实验塞研究认为,在一葡聚糖长链分子中存在有少量连续?糠萤键结 构。即: 一一。一?一?一~一?一。一一 ? 如上世纪、年代、和等利用一葡聚糖与高碘酸、 鬣瓣佬耱菠应邵反应螽,在溢霸条传下承麓,分极其承群产耪,并逶过英承簿产 物推测以上结构存在,且随提取温度越高,该结构越多。 进入瀚年代磊,疆著专一洼懿汞释技零戆癜掰,霹?一麓聚糖结秘鸯了逡~步豹试 识。等用专一性酶水解表明,在大麦、燕麦一葡聚糖中??和?一糖 蛰键分蠢耀完全煮蓐,也?竞全无露。其中,%强上懿?一羲聚骧分子中筝在羞每 隔~个?一糖苷键就商一个?一糖替键,但还脊%是融长链??糖 营键潮蹑一令一一糖瞢键组成,其长度可能饔、个躐个葡蕊糖残基。如: 一~一?一一一?一一一。一 、、 专一往酶水解并没祷发现有连续?一糖营键缩梅,因磁,认为前入研究结采 可能是对降解反应产物错误推断所导致,但仍不能排除在极少数品种中霄极少量 该结构存在。燕麦糊粉层中豹?连接匏纤维瑟糖兜释魏?连接静纤维西耱 要少。 . ?一餐聚蘧麴浚变学茬溪 燕麦中一葡聚糖高粘度性能不仅使其具有良好的生理功能,而鼠具有潜在的食品 应瘸徐餐,妇爱佟食鑫驳、食磊壤稠裁竣羧楚劐添麓到嚣羧中羧善毯嗣燕瑷等,疆此许 多学者开始研究燕麦一葡聚糖的流变学性质。、等在年、年、 年磷究表囊,燕麦骏水滚滚在浓度大予.%时,表现为牛顿浚体剪切交褥于为, 甘肃农业大学硕士学位论文 且具有非触变性,但在较低浓度时具有较高粘度,而在糖%和鼢存在时,仍呈现 出良好的稳定性。因此,具有潜在作为食品增稠剂的应用价值。冀流动曲线可用鞯率方 程 ,来表示:“ :翦切威力 :赘切速率 瀑热处理蒸汽、烘烤、灭酶对一葡聚糖糕度也剪影响。矗研究 裘明:湿热处理质,水提取一葡聚糖分子量并没有大的改变,但粘度升高。说明这些 处理方法能够改变一葡聚糖分予的空间构型戏存在状态,如可能破坏一葡聚糖分子 间氢键,使一葡聚糖分子更舒展,从而导致流体精度增大。 .耩究装葫,经帮分求麓豹?一蔫聚糖迎寒经承解楚残熬?一甍聚 糖易予形成三维空间网络结构,具有形成更大凝胶的趋势,但具 体原因不明。测定水麟 和未水解一葡聚糖分子结构时,发现结构没有明最不同,这种凝胶形成能力的不同只 能解释为部分水解使得一葡聚糖分子变小,移动能力增大等原因。年, 等迸一步采稽分析一葡聚糖凝胶特性,表瞬其是一种可遂凝胶,萁溶解温度范鬣 为?~?。 . ?一蕊聚糖的生理功能 ..降低胆固醇 大多数研究将燕麦食品降低血胆固醇功能归于?一葡聚糖,但真实机制尚未清楚。 最有说服力的裤释是?一葡聚糖可在肠肉形成嵩秸度环境,阻礴膳汁酸和服固酵分布吸 收。磷究表赘,缝对名熹纛器患者每天鼹援充?一蘩聚糖试验, 患者憨胆露簿和低密瘦黯蛋囱胆固醇量肖显著下降,但毫密度脂蛋白胆固熬量无明显下 降。研究表明,一葡聚糖对正常老鼠血中胆固醇含量无暇著影响,但 可明龆降低老鼠肝脏重量,说明~葡聚糖可促进肝脏脂肪代谢,对高血脂老鼠,~ 葡聚糖有明显降斑脂功能。研究迸一步证确,?一葡聚糖对征常 健潦人群 矗虢无影响。关予显著降低盘疆嗣簿含筵嚣需燕麦熬皮或?一麓聚糠摄入夔太,、一壹是 一个鸯争议静耀题,不冠学溪褥如结论蚤甭捐网。如等研究结论是,每 天摄入燕麦食品~克戚燕麦麸皮~克有明照效果。而研究认 为,每天从各种燕麦食品中摄入.克以上的一葡聚糖就有髭著效果。大多数人体实甘肃农业犬学硕士学位论文 验表臻,每天念翔稳当予.~克?一蘩蒙耱翡燕麦麸皮裳螽帮可有显著隆稳巍耱效果, 但正常饮食供给搬难达到上述标准,因此要达到降低血脂功效,必须额外补究富含一 葡聚糖燕麦食品。 降血糖 等久薅正霉蘩避嚣蒸麦食鑫食弱溺试衰弱,食弱蒸麦套菇蠢显著瘴 低血糖作用。等人对糖尿病患者进行食璃燕麦食品实验表明,每天食用 合约克一葡浆糖燕麦食品后,患者血糖水平可降低约%。等人研 究了一葡聚糖粘度、摄入剂量对健康人体血糖和胰岛綮水平的影响,结果液明,它们 之阉存在着显骧线性关系。年。等避一步研究表明,入?盘糖翻貘 秘素水平 懿高低与摄入?一赣聚耱浓度稻分予豢有显著萑。 .增强兔疫能力 等年研究表明,聚糖有显著增强免疫力作用。如~黼浆糖可刺 激老鼠腹膜巨噤细胞释放促癌细胞螺死因子郛肉源自细胞 。等磅突表鞠,经瀵鬻或弱穸注瓣?一瓷聚耱嚣,老 鼠血清免疫球繇的数量和病抗原数蹩明显增加,说明?一葡聚糖具 有提高小鼠兔痰力作用。 燕麦油脂的研究状况 食强蒸麦麴慧葵徐篷之一是骥食绎维,毽燕麦?馨矮豢营舞及热工方嚣魄??黉羹要。 商品燕麦的含演率低于油料作物,假高于其它谷物,所以燕麦是热量和不饱和脂肪酸酶 优良来源。燕赘的脂质含量受其遗传性状和环境因素的影响,燕麦脂质的食髓约为~ %,平均含擞~%,世界上多个燕麦品种中%以上燕麦品种的脂质含量为~ 舄,明显蹇予葵它答耱刘军海,。燕麦中?翼溪主要分蠢杰蒸麦謇予糖中,%集 中在麸皮稻释犰中。根据萃取特馁,膳质可分为游离溅耱结合壅,一般蒸发糙质静% 为游离型,可用非极性溶剂正已烧攀舣:剩余的%为结合型脂质,可用极性溶剂如 水饱和丁醇苯取。燕麦油脂所禽的脂肪酸,主要为油酸、一亚麻二烯睃等不饱和脂 肪酸。 燕麦鬻溪绞黎萃取爵毪,气撩氇灌摹鬈薄崖层藤《分为三营潼酸、磷囊、糖鬻、游裹 脂肪酸和甾醇邋几大类表王萍,。甘索农业大学硕士学位论文 寝燕麦的主要餍阻憨脂肪酸或总目质%裘示 三甘油醐是燕麦油中最大的部分。对于加工工艺和营养方面而言,燕麦油脂艏肪酸 缝成显得狠重要,与其它谷物一样,长链自旨髓酸占多数,为总嚣肪酸%淤上。英中稼 躺酸~%,硬疆酸~%,灌酸~强,疆涵酸~%,豫囊酸~%。此强,逐 含有月桂酸、花生四烯酸、二十碳不饱和月旨肪酸及痕攫术蜡酸和神经酸王游,。 .溶剂萃取 溶剂萃取是最常用方法,不同溶剂系统差别很大。几乎没有~种溶剂能有效地萃取 谷物月旨质。非极往溶莉如正己烷和乙醚可有效萃取中性聪璇,餐对极往旨震萃取能力狠 差,茏英是对与纲瞧骥结合豹磷爨,毳嗣极性溶裁剽相反。对七羊 孛溶测系统兆较结果见 发王萍,。从表可知,总月譬和各种脂质合量上都有明显蒺别。总脂台量变 化范围是.~。%酸水解得到结果是.%。三甘油酯变化范围是.】~.%,平 均值为.%。极性溶剂萃取麓主要增加在极性脂质上。 表不同溶剂系统苹取燕麦籽粒的船质组成质量% 馨甘肃农照走学硕士擎位论文 。越蕊蚕二氧毽碳攀取 .,超临界二氧化碳萃取的原理 怒临赛滚落摹敬技术是近二卡多年来发燕起来愆~耪耨羹纯工分离按术。它综合了 各类提驳分离的特点,从天然产物中分离有效成分具有安全、无毒、商效的优点,且分 离在低温高压的无氧状态下邋行,对萃敬天然活往成分有羞秃可比拟的优势。 超临界流体萃取是以超峻界状态下的流体乍为溶剡,利用浚状奄下流体所具有的蹒 渗透能力和商溶解能力萃取分离混合物的过稔,;张固宏,;陈维橇, ;玉蟪,。当浚传湿度秽压力处予它豹甄赛湿度叉和临界压力。以上对, 该流体就处于超临界状态。图是纯物质的胍力.温度相图余蜀宜,。从图中 爵菇露出,翔莱沿着气滚共存线囱裹滠、裹燕方囱移动,裁裁达到该物蔟豹冁器患。在 此移幼过程中,温度的上升导致热膨胀,液相的密度公随之撼小:而压力的升高则将气 相压缩,使其密度增大。在麓稿器点、。露,气相与液褶浑然一体,两稻的密澄 相当,两相的界限消失,两棚之间的相变潜热变为零,当 , 时,流体即成为趟 临界流体右上方斜线区。 幽纯物质的温度压力图 麓箱器浚体俘为一静特豫豹滚体状态形式,与气髂孝曩液髂羲毒籀秘之她又鸯藤不 同。作为萃取和分离技术所采用的溶剂,超临界流体具有两种特殊的性质。其一就是它 具有优良的佑质特性。表翔出了气体、超临界流体和液体斡典墅静物理特性刘禚, 。甘肃农业大学硕士学位论文 表气体、超《界流体和液体的典型物理特性从表可知,超临界流体非气非液,兼有两相特点,也因此让人称之为“无相之境”。 超临界流体的密度接近于液体,具有液体较强的溶解能力;它的 粘度接近于普通气体, 扩散能力比液体高两个数量级,与气体很相近,所以流体处于超临界状态时,具有较大 溶解能力并且能够快速传质,在短时间内达到平衡。这就是超流体萃取优于普通液.液 萃取的主要原因。另一个特殊性质是流体在超临界状态的一定范围内,其密度、粘度等 随温度、压力显著地变化,因此其溶解能力又与其密度有很大关系,温度和压力的变化 往往会导致超临界流体的溶解能力发生急剧变化,正是利用超临界流体这一特性进行物 质的选择性萃取和萃取后的分离,;吴卫泽,。 到目前为止,常用的超临界流体萃取溶剂主要有乙烷、乙烯、丙烷、苯、氨和二氧 化碳,其中最常用的是二氧化碳。因为它具有以下特点:二氧化碳的超临界压强是 .,临界温度为.,临界条件适中,不会使热敏性萃取物发生变化;二氧化 碳化学性质不活波,无色、无味、无毒、安全性好,这样就避免了采用有机溶剂作为萃 取剂所带来的有机溶剂残留问题,不会造成环境的污染和回收溶剂所造成的浪费;二氧 化碳价格低,纯度高,容易获得;具有极强的溶解能力,并且是非极性溶剂,对中、低 分子量和非极性化合物许多天然活性物质多属此类有较强的亲和能力:其低粘度和 低表面张力又能使之深入到所要提取的原料的基质中,发挥非常有效的萃取能力。同时。 二氧化碳又容易与萃取物分离,可以得到纯净的萃取物。因此在食品工业中一般优先采 用二氧化碳作为超临界流体萃取的溶剂。 .,超临界流体萃取技术的发展 超临界流体萃取技术是一项新型分离、提取技术。早在年,英国的和 就报道了超临界流体具有溶解能力的特殊物理现象。世纪年代,美国的 和从理论上提出应用超临界流体萃取进行工业化分离的可能性。年甘肃表韭大学硕士学位论文 经避大量蒸戳研究掌攘了超临界漉钵作为分离介痰豹普遍规镰。,, 等人申请了许多超临界流体萃取咖啡中的咖啡因、啤酒中的呈味物质、烟蕈中的 尼吉丁以及荣时中的儿茶酚、香辛料中的糟油等专:,;.,: 石兼容,:李建,,年,联邦德国的公司首先建成了用超牺羿萃联 技术除去咖啡中咖啡碱的生产线,年,北京化工学院从瑞士引进了我国首台越临界 瀛俸萃取褫。由于翻溺超临秀摹敬技术可硝显魂提蕊产晶静产率、纯度鞠葳壤,并基辽 能够节时、环保,因此这一技术在石油、医药、化工、食品等生产领域中得到广泛的应 躅。在食磊领域中,它主要庭瘸子麸食茹嚣辩中提取蚕籽、涵驻、色素、生理涯浚秘霞 阱及除去食品体系中的不良物质励建荣,。 .。超浆爨擎馥技术霞滏?萋提墩孛戆瘗用 利用提取动植物油腊,从开始提取普通油脂大豆油、菜籽油、葵花籽油、棉 籽溜等到分燕提取~些县有保越乍用功能性油月是熟油、紫苏酒、月见荤油、艇癸酒、 等分别对萃取大豆油、菜籽 沙棘油等,这方面研究很多。 濑和葵花籽油工艺条件进行研究,在。, .籀件下,攀取,菜 籽中扣%油脂可被提取寤米。对所褥油脂的气相色谱分褫结果表明,.萃取 与溶剂提取的油脂在脂肪酸组成上无明显区别,但前者所得油脂品质优予后者。 等入用?觚鱼离中攀取鱼涵,褥羁%的涵膳,精用添热了%乙酪静萃 取得到%的油脂。等用.从冷冻的鱿鱼调味龋废料中萃取油 虢,褥率为%,掰褥酒?蓦含多释不篷弱籍肪酸,主要巍。嗡葶羹。碡?簿, 脂肪酸的萃舣总量高于用三氯甲烷一甲醇体系抽提所得油脂。吴卫泽等采用超 稳赛萃取方法,鞋为溶蠢,在较渥秘豹实验条譬下,默蛋黄羚中孳敬蛋黄涵。癸冀 平等用超临界萃取茶籽油,骐油的品质比有机溶剂萃取所得油有许夥优点 热有茶香、色泽浅、骏赞羲等。王丰俊等爝超蠛爨萃取了核桃、油,其涵的 晶质达到了食用一级标准。刘元法等用超临界二氧化碳萃取猕猴桃籽油,最大 可能的保存了里面的不饱和强肪酸和猕猴桃籽的清褥。 超临界在低温高压下完成了所需物质的萃敝,提高了油的品矮。而且使魇蔷的 不饱和腊肪酸得到了保护。随辫超临界萃取技术的提高和设备的改进,超临界萃取 将会代替传统的溶荆萃联。 甘肃农照太擎硕壶学位论文 蓠裔 燕麦 上,属禾本科燕麦属孽本植物,是重耍的饲草、 饲料作物,一般分为带稃型和裸粒型稀大类。世界各豳栽培的燕麦以带稃型为主,绝大 多数髑予镧莠豢毫、家禽。中翅栽培的燕麦以裸粒型为主,常称裸燕麦。,几乎 全部食用杨海鹏,。 缓爹簸是鐾赛最大豹蒸麦生产国,其燕麦产量占凝赛豹%以上,其它主婪生产戮 有美圈、加拿大、中圈、澳大利亚及欧盟等。由于医学专家和营养专家研究证明燕麦熟 有降低视体膣簦醇的功效,蕊馥遥几年,孜鼗、俄罗簌、蠢本对燕麦都确有专篷研究。 我国以裸燕麦又称莜爱为主,其产量约占燕麦总产餐的%以上,主产区集中在内蒙 的阴山南北,河北的烦上、燕山地区,由西的太行、黼梁山区,云、髓、脚三省的大棘 山,小壤由离由地带亦霄零申攘颞尧瞧,,其中内蒙地送的矛中撼面积最大,占全 国燕麦种植总面积的%左右顾尧臣,。 燕麦是嚣 蘧嚣熬主要农蕈凌之一,毽箕并发列臻~壹憝在较低求乎。最蠢麓零戆 加工食品如燕麦片、燕麦粥销售,但是技术含量、产量和产品附 加值低,难以创避 显著盼经济效益帮卒主会效益。褥且对燕麦深糯工力褒不够,嫠褥燕麦镌经济效益不畿宽 分体现。 燕麦籽粒营养价鬣丰富而全面,尤其是蛋白质和脂肪含羹在谷物炎作街审最高,另 外,还害含矿物质、维生素积膳食纤维,因此被誉为楚谷类食品中最好豹全价食品之一 李进,。现代医学界经过大髓的临床观察或动物实验,证实了经常食用燕麦能 有效颈薅蟊渗疗出裹瞧疆疰零超粒心蕤囊謦痰痣等马缮泉, 英国的一项研究表明:每天摄入含水溶性燕麦纤维的食品,可使肛液中胆固醇含艟 降低%,冠心瘸死亡率减少%,有效减轻耱藤瘸的疰获。我国现喜糖藤瘸惑者绞 万之多,绝对患者数为世界第一位商瞻,。对糖尿病的治疗不能仅靠药物治疗, 因此,越来越多的糖尿病和商血脂患者将燕赛食品作为一种蓬要的膳食来源,希望备稀 燕麦类操毽晶窥食品溺现的愿望鼹婺迫切,这荸孛消费者需求离涨和实际研发不足的尖锐 矛盾为燕麦的深层次开发利用提供了良好的跫机。 燕麦纤缀中豹烹簧成分怒?。麓浆糖,塞集于黢皮燕麦豹凝羚屡。狳了它具有熏簧 的,土理功能之外,它还可有作为增稠荆等。提取和分离燕麦中的活性物质葡聚糖, 是燕麦深热王增值的有效途径之一。麴灭之嚣,我国农盈琵离着严峻熬撬藏,淹甘肃农业大学硕士学位论文 着科学知识的普及和人们饮食健康理念的形成,为燕麦食品提供了越来越大的市场空 间。开发高附加值燕麦制品,必将促进以燕麦为基本原料的保健食品、医药产业的快速 发展,而且对加快西北地区的经济发展起到一定的促进作用。 燕麦脂质主要分布在燕麦籽粒中,%集中在麸皮和胚乳中刘成海,,主要 为不饱和脂肪,,其中,油酸和亚油酸含量比较高王萍,。不饱 和脂肪酸能够降低血液中的胆固醇,预防心脏病、高血压、高血脂、动脉硬化、糖疗病 李璇,。现在,人们普遍食用植物性油脂,所以开发这样的功能油脂具有重要 的意义。 目前提取植物油主要采用压榨法和有机溶剂萃取法,压榨法效率低,有机溶剂法容 易造成溶剂的残留,而超临界流体萃取能在低温低压下操作,避 免了热敏性物质的 分解和不饱和脂肪酸的氧化,萃取具有高效、无污染、操作简单、易于控制等优点。与 传统方法相比,超临界流体萃取能保持提取油的纯天然特性,萃取后的植物残渣可 继续它用,如用脱脂燕麦麸皮进行一葡聚糖提取。 本研究以脱脂燕麦麸皮为原料,通过研究影响一葡聚糖提取率的主要因素,优化 一葡聚糖的提取工艺,确定提取一葡聚糖的最佳工艺参数。并对一葡聚糖纯化以及 它的性质进行了初步的研究,期望为一葡聚糖进一步扩大使用,提供一定的参考价值。 另外,以燕麦麸皮为原料,研究超临界二氧化碳萃取燕麦油脂的最佳工艺,并用气相色 谱.质谱联用仪对其脂肪酸组分进行了分析,为燕麦的深加工开辟一条途径。 材料与方法 .原料与来源 来源于甘肃省会宁县实验室自制燕麦麸皮 燕麦 .试剂及仪器设备 ..试剂 公司 .葡聚糖酶 .葡聚糖苷酶 公司 公司 葡萄糖氧化酶 甘肃农业大学硕士学位论文 公司 过氧化物酶 胰蛋白酶 上海惠世生化试剂有限公司 ?.淀粉酶 北京奥博星生物技术有限责任公司 牛血清白蛋白 国药集团化学试剂有限公司 一氨基非那宗 ,叠氮钠 对羟基苯甲酸 上海化学试剂公司 考马斯亮蓝. 天津市科密欧化学试剂开发中心 二氧化碳纯度. 兰州刘家堡送气站 无水葡萄糖 上海 .分装 异丙醇、硫酸铵、正丁醇、氯仿、苯酚、浓硫酸、磷酸、盐酸、 乙醇、甲醇、氢氧 化钠、磷酸二氢钠、醋酸钠、氢氧化钾、石油醚。~。、苯均为分 析纯;%的 食品级酒精 ..试剂配制 ...磷酸钠缓冲液,. 参考 的方法。称取..溶于的蒸 馏水中,用的调.,最后体积达到。 ...醋酸钠缓冲液、. 参考吕耀昌的方法。称取..溶于.的蒸馏水中, .,然后用蒸馏水稀释到。 用/盐酸调整 ... .葡聚糖酶/ 的方法。用.、磷酸钠缓冲液溶解,装 参考 在聚丙烯试管内,冷冻贮藏。 ... .葡萄糖苷酶/ 的方法。用 的醋酸钠.溶解,装在 参考 聚丙烯试管内,冷冻贮藏。 ...葡萄糖氧化酶/过氧化酶试剂 参考吕耀昌的方法配制下列溶液。 ?葡萄糖试剂缓冲储备液 称取磷酸二氢钾、.氢氧化钠和.对羟基苯甲酸在室温下溶解在 甘肃农业大学硕士学位论文 的水中。用/的盐酸调整溶液的至.,然后加入的叠氮钠。用水调 整体积 至。?下暗处贮存,至少稳定个月。 注意:在调整之前,不要加入叠氮钠,因为此时用叠氮钠会释放出 有毒气体。 ?葡萄糖试剂缓冲工作液 量取葡萄糖试剂缓冲储备液,用水调整体积至,加入.氨 基非那宗,过氧化酶和葡萄糖氧化酶,溶解并置于棕色瓶内,?下 暗处 贮存,该溶液稳定个月。 ...考马斯亮蓝.染料试剂 %体 参考余冰宾的方法。称取考马斯亮蓝.,溶于 积分数的乙醇,再加入 %体积分数的磷酸,用水稀释至。 ...重蒸馏苯酚的制作 参考钱和的方法。将苯酚加热后溶解,称取,加铝片.,加入氢氧 化钠.,蒸馏收集。的馏分,取馏出液,加水,置棕色瓶中备用。 ...斐林试剂的配制 参考陈钧辉的方法。液:称取硫酸铜。..,溶于蒸馏水 并稀释至。 液: 称取氢氧化钠,酒石酸甲钠,溶于蒸馏水并稀释至。 ... ./ 。溶液的配制 参考王肇慈的方法。称取.氢氧化钾,用少量的甲醇溶解之后,定 容 到的容量瓶中。 ..仪器设备 型分光光度计 上海第三分析仪器厂 江苏省金坛市荣华仪器制造有限公司 ?数显三用恒温水箱 北京医用离心机厂 ?低速离心机 北京市永光明医疗仪器厂 微型植物试样粉碎机 金坛市自动化仪器厂 .型数字酸度计 上海亚荣生化仪器厂 一旋转蒸发器 ?一分光光度计 甘肃农业大学硕士学位论文 ..超临界萃取设备 江苏南通南通超临界萃取有限公司 ? / 气相色谱.质谱.联用仪 . .实验方法与内容 ..燕麦中一葡聚糖的提取 ... 一葡聚糖酶法测定的原理 一葡聚糖测定方法包括酶测定法、荧光法和高效液相色谱法等。其中酶测定法因 其反应具有专一性,测定准确、可靠,而被定为国际测定方法。样品经水合和糊化,用 地衣酶.葡聚糖酶将样品中的.葡聚糖酶解成.寡聚糖,经调整体积和过滤分离 后,用.葡聚糖苷酶将这些可溶的.寡聚糖水解成葡萄糖。葡萄糖氧化酶将其氧化成 葡萄糖酸和过氧化氢,后者用过氧化物酶分解,以便在对羟基苯甲酸和.氨基非那宗存 在下形成适宜于比色分析的光吸收络合物,在分光光度计下测定。其原理如下: ...葡萄糖标准曲线的制定 参考吕耀昌的方法,以无水葡萄糖为标准样品,用葡萄糖氧化酶法制定测 定燕麦中.葡聚糖的标准曲线。 葡萄糖标准液原液./甘肃农业大学硕士学位论文 将.基准葡萄糖用蒸馏水溶解,然后定容于的容量瓶中; 葡萄糖标准液工作液 分别量取、、、葡萄糖标准液原液于的容量瓶中,用水补充至刻度。 这时工作液中葡萄糖浓度分别为、、、/ 葡萄糖显色测定 在个空试管中的一个试管内加入.的水做试剂空白,在其他四个试管中分别 加入.的葡萄糖工作液,然后在这些试管中分别加入.的醋酸钠缓冲溶液。在 所有工作标准液和试剂空白中加入的液,。水浴保温,取出反应 液之后,在分光光度计处测定吸光度。 ... .葡聚糖的含量测定的步骤 参考,.和管骁的方法并略加修改,进行粗提液燕 麦一葡聚糖含量测定。 ?取一支试管,分别取.葡聚糖的精提取液.,磷酸钠缓冲液.., 葡聚糖酶溶液.,加入其中连续摇动使溶液均匀,并将混合溶液于水浴反应 .; ?另外取三支试管,一支做空白,分别加入.上述稀释的反应液,往空白试管中加 入醋酸钠缓冲液..,往另外两支试管中各加入一葡聚糖苷酶溶液., ?下反应; ?取出反应液,同时往三支试管中分别加入葡萄糖氧化酶/过氧化物酶试剂,。 继续反应 ?取出反应液,立即在下进行比色,对照标准曲线求出葡聚糖的含量。 ...葡萄糖标准曲线的制定 参考张惟杰的方法,以无水葡萄糖为标准样品,用苯酚硫酸法制定标准 曲线。准确称取标准葡萄糖于容量瓶中,加水至刻度,分别吸取、.、 .、.、.、.、.、.及.,各以水补至.,然后分别加入 %苯酚.和浓硫酸.,静置分钟,摇匀,室温放置分钟后于处测 定吸光度,以.水按同样显色操作为空白,以横坐标为多糖浓度,纵坐标为吸光度 值,制作标准曲线。 ...多糖含量的测定 甘肃农业大学硕士学位论文 参考张惟杰的方法,测定粗提液中的多糖含量。吸取适量的多糖溶液,分 别加入%苯酚.和浓硫酸.,静置分钟,摇匀,室温放置分钟后于 处测定吸光度。 . .蛋白质标准曲线的制定 参考余冰宾的方法,以牛血清白蛋白为标准样品,用考马斯亮蓝法制定标 准曲线。取支试管,支作空白,用./的标准蛋白质溶液给各试管分别加入, .,.,.,.,.,.,然后用无离子水补充到.,最后各管中分别加入 .考马斯.试剂,每加完一管,立即手摇均匀,加完试剂?后,在 处测定各样品的吸光度值,空白对照为第号试管,即.水加..试剂。 ...蛋白质含量的测定 参考余冰宾的方法,测定粗提液中的蛋白质含量。吸取适量的多糖溶液, 加入.考马斯.试剂,手摇混合均匀,在后,于处测定各样品 的吸光度值。 ..提取.葡聚糖的工艺流程 ...原料的预处理 将萃取完油的燕麦麸,用%乙醇?回流,冷却到。,倾去剩余的乙醇, 自然?干,粉碎,过目筛。 ...单因素实验 ?的确定 取原料,料液比:,温度。,时间,分别在、、、、 甘肃农业大学硕士学位论文 下浸提,测定吸光度。 ?温度的确定 、。、 取原料,料液比:,,时间,温度分别为。、 ?、下浸提,测定吸光度。 ?时间的确定 取原料,料液比:,,温度。,时间分别为、、、 、下浸提,测定吸光度。 ?料液比的确定 取原料,,时间,温度,料液比分别为:、:、:、:、 :下漫提,测定吸光度。 ...多因素实验 通过单因素实验结果和文献介绍,确定了影响葡聚糖提取的主要 因素是温度、溶 液的值和料液比。必葡聚糖提取率为指标,选取的正交表, 安排实 验的因素和水平表。 % 聚糖提取率 堡堑专毳器掣 表 葡聚糖提取的因素水平表 ,.. .葡聚糖的初步纯化 除去淀粉 利用中温淀粉酶去除淀粉,根据不同酶用量在不同时间内去除淀粉的效果,确定出 去除淀粉的最佳酶用量和时问。分别取原料,浸提,离一心,浓缩,定容到, 在值~,温度。下,进行去除淀粉的实验。 除去蛋白质 法除去蛋白质 称取原料,按照:加入蒸馏水,浸提,离心,浓缩,定容到,分成八甘肃农业足学硕士学位论文 份,每次吸取浓缩液,进行脱蛋囱实验。设置脱一次、二次、三次,直到八次的 ,\个处理。每次鸯曩.继的氯傍和.僖的正丁释,手攥,裹,?,矮去沉 淀,将上清液定容到,再吸取稀释到,分别吸取和.稀释液 进行蛋囊矮窝多糖豹嚣定。滚鳞滚豹蛋囊蔟蟊多耱含量分剐为,/、./矗。 ?等点溅除去蛋白质 取浓镣液,在搅拌下掰溉盐酸缓漫诵节秘德至。,?静鬣一夜,然 后离 心,得到除去蛋白质的上清液,测定蛋囱质和多糖含量。 ?胰蛋自酶除去焉自质 称取暇糙,加入蒸馏水,浸提,裹心,浓缩到,分别暇鞴 浓缩液,霞于个三角瓶中,按照条件分别除去鬣白质,缩束之厝,?下,灭酶, %戆鼷壤酵撰,?裁爨一夜,离心,、泼淀定容到,秀吸驻 ,定容剿, 吸取进行蛋白质的测定。浓缩液的蛋自质古墩为./,多糖含擞为.‖。 另静,墩 源浓缩滚搽释副,溺定蛋舀质静含量。 通过预备实验结果和文献介绍,确定了影响麒蛋白酶除去蛋自质的主要因素为胰蛋 臼酶量、温度、时间和值。以蛋白质去除率为指标,选取难交设计表,安 撵实验昀因素秘水平表 表胰蛋白酶除去蛋白质的因豢水平表 瓢棼&嘲黯 瓤。?睾疆姆榉 鐾结合酶法 按照?的最佳方法酶解之质,嬲入.倍的氯仿和.倍的正丁醇手摇, ?静鬻一夜,离心,豫去蛋自旗,稀释捌,在吸取,稀释到,吸取. 测定多糖含量和吸取钡定摄白质含量。 ?等龟点结合黼法 按照?的最佳方法酶解之聪,再按照?的方法除去爨白质。再按照?的方法测定多 糖和蛋囱质。 ...溶剂沉淀一葡聚糖甘肃农业大学硕士学位论文 ?醇舞 在搅拌条件下,向提取液中缓慢加入%乙醇,用溺精计控制其浓度,分别为%、 %、%、%,。静黄一夜,离心,弃去上清液,定容,测定.葡聚糖的含量。 ?乙醇 宾提取滚中嬲入%乙醇,缓箕乙簿达到%,?黪置一褒,蛮心,蹇去上滂渡, 定容,测定.葡浆糖的含量。 ?硫酸铵 向提取液中加入硫酸铵,直至硫酸铵的浓度达到%,。静置一夜,离心,弃去 上清液,定容,测定,葡聚糖的食澄。 ?异蠢醇 向提取液中加入异丙醇,崴至界丙醇达到%/,。静嚣一夜,离心,弃去 上清液,定容,测定一葡聚糖的禽缴。 .。 .葡聚糖的定性鉴定 ?与疆纯锷.谈反应 将少量糨多糖溶解之后,加入几滴碘化钾碘试剂,璐祭溶液颜色的变纯情滋,另 作空白对照。 ?与斐林试剂反应 参爨陈钧黪麴方法。取~支试警,分剐宓入筵拣试剂窝蚤,混匀, 然磊%静多糖溶渡,熏沸承涤中趣燕数分镑,取琏,冷却,戏察试繁中煞交纯情 况,另作空白对照。 ?与苯酚一硫酸葳应 将少量糖多糖溶解之螽,配成邋整的浓度,热入%苯瀚.和浓硫酸.,静 止分锤,藏察试蓉中餐颜色交纯,勇俸空童霹慧。 ?三氯化铁反应 参照北京大学化学学院有机化学研究所编的有机化学实验。加多糖溶液 于一试管中,褥加一滴%三氯化铁溶液:另取一试管,加入蒸馏水和几滴三氯化铁 试裁遘嚣空自试验,毙较嚣令警孑巾熬颜色变纯。甘肃衣业大学 硕士学位论文 ..燕麦油的超临界二氧化碳萃取 ...原料的预处理 将燕麦麸皮粉碎,通过目的筛子。然后在。二.燥两个小时后,燕麦麸的含 水量降到%以下。 ..操作步骤 严格按照江苏南通设备厂的超临界设备的安全操作步骤进行。 ?开启电源,打不制冷,冷循环,将萃取釜、分离、分离的温度分别设置到所需要 的温度; ?将粉碎过筛的原料装入萃取釜中,放入萃取釜后,装好密封圈,旋紧堵头; ?待萃取釜、分离、分离的温度达到设定温度后,不启钢瓶,打不高压泵,进 行加压。当萃取釜压力达到所需的压力后,打开萃取釜、分离、分离之间的阀门, 进行逐级加压。当压力平衡到要求的压力后,打开回路阀门,使系统形成回流。 ..超临界二氧化碳萃取燕麦油的工艺流程 采用超临界二氧化碳萃取方法主要是考虑燕麦油含有不饱和脂肪酸,具有燕麦特有 的麦香味,结合超临界萃取的特点,制各营养并具有特殊香味的燕麦油。其工艺流程如 下: ...燕麦油萃取的最佳工艺参数确定 通过预备实验,确定影响燕麦油萃取率的主要因素为萃取温度、时间和压力。一次 性装料量为,分离的压力,分离的压力。通过选取的正 交设计表,以燕麦油的萃取率为指标,确定出萃取燕麦油的最佳工艺参数。萃取率甘肃农业大学硕士学位论文 ‘塑掣翼銎堕?% 一次装罐量 表超临界二氧化碳萃取燕麦油的冈素水平表 ...燕麦油脂肪酸的甲酯化 参照王肇慈的方法。称取油样,加入石油醚。与苯 ./ 混合液,振荡使油脂溶解后,加入 .溶液,混匀后在 室温静置,加入水,振荡,静置,取上层清液进样,即可进行色谱.气 质分析。 ...燕麦油脂肪酸?分析 ?气相色谱条件 毛细管色谱柱×,载气为氦气,分流速度./,升温程序:初 ,。/到,保持,在。/到。,保持,进样 始温度 量雌。 ?质谱条件 电离方式为电子轰击离子源,离子源温度。,电子能量,质量扫描 /, 范围 结果与分析 .葡萄糖标准曲线 以葡萄糖为标准样品,用葡萄糖氧化酶法制作标准曲线。 标准曲线的方程为..为吸光度值,为葡萄糖的浓度/,相关 系数.。甘肃农业大学硕士学位论文 . 制 督 . . , , .浓度/ 幽葡萄糖的标准曲线 .多糖的标准曲线 以葡萄糖为标准样品,苯酚.硫酸法制作标准曲线。 标准曲线的方程为.一.为吸光度,为葡萄糖的浓度./,相关 系数.。 一 型. 铎浓度/ 剀葡萄糖的标准曲线.蛋白质的标准曲线 以牛血清白蛋白为标准品,考马斯亮蓝法制作标准曲线。 标准曲线的方程为..为吸光度值,为葡萄糖的浓度/,相关 系数.。甘肃农业大学硕士学位论文童氇 型 米 鍪疆 . . . . .浓艘孵/田 豳蛋壹霞的标准麴线 。?,葡聚糖提取静单溷索试验 提取工艺参数的选臻与?.甍装臻提取攀察切提关。先对尼个霹能造成较大影响豹 工艺祭件进行独立的考察,以观察它们各自的影响,然后在此基础上进行优化实验。 ..褥滚篦豹确定 从图可以磊出,料波比在:褥:之阙,?.裁凝糖提取率惑剧增加,之后增加 缓慢。但是,,葡聚糖提取率的最大僵在料液比:左右摆动。根裾液固萃取基本理论, 溶剂的增