乌梢蛇不同生长时期蛇蜕的氨基酸分析

乌梢蛇不同生长时期蛇蜕的氨基酸分析 第32卷第11期 2007年6月 中国中药杂志 ChinaJournalofChineseMateriaMedica Vo1.32,Issue11 June,2007 乌梢蛇不同生长时期蛇蜕的氨基酸分析 叶红',唐鑫生 (1.黄山学院生命与环境科学学院,安徽黄山245021; 2.安徽农业大学生命科学学院,安徽合肥230000) 蛇蜕为游蛇科动物黑眉锦蛇剧叩ktaeniura,锦 蛇E.carinat或乌梢蛇Zaocysdhumnades等蜕下的 干燥皮膜.有祛风,定惊,解毒,退翳功用,用于小 儿惊风,抽搐痉挛,翳障,喉痹,疔肿,皮肤瘙痒. 现有人用蛇蜕治疗脑囊虫病,还试用于治疗绒毛膜 上皮细胞癌等.蛇蜕的主要组分是骨胶原,氨基 酸,脂肪酸,甾醇和微量元素J.目前普遍认为,氨 基酸对人体的健康有着极其重要的生理意义,药物 中的氨基酸对临床治疗疾病能够产生较大的影响. 本试验研究乌梢蛇不同生长时期蛇蜕的氨基酸组 成,为探讨乌梢蛇蛇蜕化学成分与乌梢蛇蛇蜕药效 之间的关系,以及对乌梢蛇蛇蜕的选材提供参考依 据. 1与方法 1.1样品来源成蛇蛇蜕由黄山市蛇类科学研究 所提供,幼蛇的3次蛇蜕由本课组对刚孵化的幼 蛇进行单独饲养至冬眠前所收集.全部蛇蜕经 唐鑫生副教授鉴定. 1.2样品处理每一批蛇蜕取2件标本,用少量洗 洁精洗涤,自来水漂洗后,经去离子水反复冲洗4次 (以上),各取其中段,剪碎,40?真空烘干后混匀, 从中准确称取50mg,经6mol?L盐酸水解后,采 用日立835—50型氨基酸自动分析仪进行分析,其 中色氨酸在水解过程中被破坏未能测出. 2结果 在所测定的不同生长时期乌梢蛇蛇蜕中的水解 氨基酸除色氨酸水解破坏未能测出外,其他的一型 氨基酸均被测定,共测出16种(见表1),其中必需 氨基酸6种,非必需氨基酸10种,含量较多的氨基 酸为甘氨酸,谷氨酸,丝氨酸,亮氨酸,酪氨酸,精氨 酸和脯氨酸,其中含量最高的是甘氨酸,在幼蛇第1 [收稿日期]2006-03-22 [基金项目]安徽省高校青年教师科研资助项目(2003jq163) [通讯作者]'叶红,Tel:,E—mail:yehong@hsu.edu.cn 次蛇蜕中含量为11.64%,幼蛇第2次蛇蜕中含量 为12.18%,幼蛇第3次蛇蜕中含量为11.37%,成 蛇蛇蜕中含量为11.14%,最低的是组氨酸.蛇蜕 中必需氨基酸含量占氨基酸总量的26.53%一 29.80%.可见,所测得的氨基酸中,人体必需及半 必需氨基酸含量匀较丰富. 表1不同时期乌梢蛇蛇蜕的氨基酸组成和含量 (g/100g干重) 氨基酸幼蛇第1次幼蛇第2次幼蛇第3次成蛇 其次,对本次所测定不同生长时期乌梢蛇蛇蜕 的氨基酸含量进行对比,幼蛇蜕中必需氨基酸含量 平均为21.26%,成蛇为16.33%.幼蛇蜕中氨基酸 总量平均为74.71%,成蛇为61.53%.以上比较表 明,乌梢蛇幼蛇蛇蜕的氨基酸含量高,而成蛇蛇蜕的 氨基酸含量相对较低. 3讨论 本次所测定乌梢蛇蛇蜕中氨基酸含量与赵文静 等_5所测乌梢蛇蛇干的氨基酸含量相比:乌梢蛇蛇蜕 中甘氨酸,亮氨酸,酪氨酸,丝氨酸和脯氨酸的含量均 高于乌梢蛇蛇干,其中以甘氨酸含量最高.甘氨酸是 . 】09】? 第32卷第l1期 2007年6月 中国中药杂志 ChinaJournalofChineseMateriaMedica Vo1.32,Issue11 June,2007 一 种重要的氨基酸类药,现已被证明是中枢神经系统 中惟一一种抑制性神经递质,通过激活突触后膜上的 甘氨酸受体来发挥作用J,起镇定剂的作用.乌梢蛇 蛇蜕有祛风,定惊的功效,这可能与乌梢蛇蛇蜕中含 有高达12.18%的甘氨酸有很大关系.另外,近年发 现甘氨酸可在细胞,器官和整体水平防止各种有毒物 质引起细胞损害,是一种较好的细胞,组织,器官保护 剂;甘氨酸可改善肝脏的微循环,对肝脏有较好的 保护作用J,这些可能对乌梢蛇蛇蜕在治痔疮肿痛和 各种虫毒等症及中医中认为蛇蜕入肝脾两经中起非 常重要的治疗作用.亮氨酸是人体必需的3种支链 氨基酸中的一种,对蛋白质代谢起主要调节作用J, 可减少高强度运动造成的蛋白质分解.酪氨酸可促 进儿茶酚胺的形成,从而减轻应激而造成的影 响o,"J.丝氨酸是一种生糖氨基酸,是用于治疗肝 损伤患者的氨基酸混合液中的重要成分;另外,一丝 氨酸以特殊的湿润性引,用于皮肤细胞的保护.乌 梢蛇蛇蜕可治目生翳膜,痔疮肿痛,皮肤疥癣和各种 虫毒及惊风癫痫等症,其医学作用机制可能与蛇蜕中 含有丰富的甘氨酸,亮氨酸,酪氨酸,丝氨酸等药用氨 基酸有密切关系,当然对乌梢蛇蛇蜕药效与其化学成 分之间的关系尚需更深入的研究.其次,对乌梢蛇蛇 蜕的选材从氨基酸含量分析看,以乌梢蛇幼蛇蛇蜕最 为理想,这可能是由于幼蛇食欲旺盛,食物充足,生长 速度最快所致. [致谢]黄山市蛇科所黄接棠研究员提供实验帮助, 胡建国,宗文明参加部分工作. [参考文献] [1]中国药典[s].一部.2OO5:220. [2]邓冲雨.谈谈蛇的药用价值及临床利用[J].蛇志,1995,7(3): 26. [3]中国药用动物志协作组.中国药用动物志[J].第2册.天津:天 津科学技术出版社,1983:316. [4]叶红,唐鑫生.乌梢蛇的人工孵化与冬眠前的人工饲养[J]. 四川动物.2O04,24(2):216. [5]赵文静,李辉,陈国友,等.虎斑游蛇的氨基酸含量测定及与 乌梢蛇的比较分析[J].中医药,2O02,30(3):36. [6]WheelerM,StachlewitzRF,YamashinaS,eta1.Glycine—gated chloridechannelsinneutrophilsattenuatecalciuminfluxand8U- peroxideproducfion[J].FASEBJ,2000,14(3):467. [7]LeeMA,McCauleyRD,KongSE,eta1.Pretrean~ntwithgly— cinereducestheseverityofWfIIUintestinalischemia-reperfusion injuryintherat[J].AnnHastSurg,2001,46(3):320. [8]WheelerMD,Ikeje舳K,EnomotoN,eta1.Glycine:anewanti— inflammatoryimmunontrient[J].CellMolLifeSci,1999,56:843. [9]邵继智,支链氨基酸的生化与营养[J].氨基酸杂志,1990,2: 23. [10]WunanRJ,HebermanHR.Useoftyrosineandothernutrientsto protectagaiIlststressandtoenhanceandsustainperformance.In: VanLoonGR.KvetnanskyR,McCantyR,eta1.Stress:neuIo- chemicalandhumoralmeehflnism8[M].NewYork:Gordonand Breach,1989:67. [11]OwasoyoJO,NeffDF,LamberthJG.Tyrosineanditspotential Use8sacoutenneasuretoperformancedecrementinmilitary8U$一 talnedoperations[J].AviatSpaceEnvironMed,1992,63(5): 363. [12]柴多里,邓菊香.丝氨酸[J].精细与专用化学品,2OO2,18:18. [责任编辑张宁宁】 栽培灯盏细辛中灯盏花乙素的含量测定 吴丰,刘爱民,马林h (1.中国医学科学院中国协和医科大学药物研究所,北京100050; 2.云南楚雄农业学校,云南楚雄675000) 灯盏细辛,又名短茎飞蓬,为菊科飞蓬属植物短 葶飞蓬Erigeronbreviscapus(Vant.)Hand.一Mazz.的 [收稿日期】2006-05-21 【通讯作者】'马林,Tel:(010)63165170 - 1092? 干燥全草?.主要有效成分为灯盏花乙素(scute1. 1atin)引,临床用于治疗中风后瘫痪,冠心病等.,引. 由于原药材需求量大,野生植物资源日益减少,目前 我国云南地区已开始引种栽培,但栽培种有效成分 含量如何未见报道,本研究利用HPLC测定了栽培